目录 1
上篇 实验基本技术及原理 1
第一章 实验样品的制备 1
一、血液 1
二、尿液 1
三、组织 2
第二章 几种常用的生物大分子实验技术 3
一、盐析技术 3
二、透析和超滤 5
三、减压浓缩和冷冻干燥 6
第三章 分光光度法及比色分析法 7
一、原理 7
二、仪器的基本结构 8
三、两种常用的国产仪器使用方法 9
第四章 层析技术 12
一、吸附层析 12
二、分配层析 13
三、离子交换层析 15
四、凝胶过滤 19
五、亲和层析 22
一、原理 24
第五章 电泳技术 24
二、纸上电泳和醋酸纤维素薄膜电泳 26
三、琼脂及琼脂糖凝胶电泳 28
四、聚丙烯酰胺凝胶电泳 28
第六章 酶联免疫吸附测定法 33
一、原理 33
二、类型 35
三、试剂与器材 37
五、注意事项 38
四、操作方法 38
第七章 离心分离技术 39
一、沉降理论 39
二、沉降系数 40
三、加速度的比 41
四、几种离心分离法 42
第八章 分子克隆 44
一、真核细胞基因组DNA的制备 44
二、细胞总RNA的提取 44
四、DNA插入片段的制备 45
三、质粒DNA的制备 45
五、连接反应 46
六、重组质粒的转化 47
第九章 外源基因的表达 49
一、外源基因在原核细胞中的表达 49
二、外源基因在真核细胞中的表达 50
三、Westem印迹 51
第十章 核酸分子杂交技术 53
一、核酸探针 53
二、Southem印迹 58
三、Northem印迹杂交 59
下篇 实验部分 60
实验一 蛋白质的颜色反应 60
实验二 微量凯氏定氮法 61
实验三 测定蛋白质的比色分析法 64
实验四 紫外分光光度法测定蛋白质 66
实验五 血清葡萄糖含量的测定 68
实验六 食物中维生素C含量测定 70
实验七 酶促反应动力学实验 72
实验八 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质 77
实验九 聚丙烯酰胺凝胶电泳 78
实验十 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） 83
实验十一 乳酸脱氢酶同工酶的测定（电泳法） 86
实验十二 血清脂蛋白的琼脂糖凝胶电泳 88
实验十三 胡萝卜素的吸附层析法 90
实验十四 氨基移换作用与氨基酸的纸上层析 91
实验十五 氨基酸的薄层层析 93
实验十六 DEAE纤维素离子交换层析法分离血清蛋白质 94
实验十七 血清γ-球蛋白的提纯 96
实验十八 真核细胞DNA与RNA的分离提取 99
实验十九 重组质粒DNA的提取酶切鉴定 101
实验二十 DNA与RNA的定量测定 103
实验二十一 DNA聚合酶链式反应（PCR） 103
实验二十二 DNA重组 104
实验二十三 核酸杂交 109
实验二十四 Westem印迹 117
附录 119
一、实验室安全及防护知识 119
二、实验误差与数据处理 121
三、试剂分级及注意事项 126
四、常用缓冲溶液的配制 126