目录 1
A 生物化学部分 1
*实验1 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 1
*实验2 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳 8
*实验3 聚丙烯酰胺凝胶双向电泳 14
*实验4 鸡卵粘蛋白的分离纯化 21
*实验5 胰蛋白酶粗提取与活性测定 26
*实验6 亲和层析纯化胰蛋白酶 29
*实验7 胰蛋白酶动力学测定 33
实验8 蛋白质N-末端氨基酸分析 42
实验9 猪脾DNA的制备及其含量测定 50
实验9.1 猪脾DNA的制备 50
实验9.2 紫外吸收法测定DNA的含量 52
实验10 抗血清的制备 55
*实验11 抗血清测定 59
*实验12 酶联免疫吸附测定 67
B 分子生物学部分 73
实验13 质粒DNA的分离纯化 73
实验14 质粒DNA的限制性内切酶酶切及琼脂糖凝胶电泳分离、鉴定 78
实验15 大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒DNA分子导入原核细胞 84
*实验16 DNA重组 89
*实验16.1 粘端连接法 91
*实验16.2 粘-平端连接法 96
*实验17 PCR基因扩增 102
*实验18 细菌总RNA分离纯化及其鉴定 106
*实验19 DNA核苷酸序列分析 109
*实验20 蛋白质转移 115
*实验20.1 酶联免疫反应检测生物大分子 115
*实验20.2 蛋白质化学发光免疫反应检测生物大分子 118
*实验21.1 人体微量血细胞培养(全血培养)及染色体制片 125
C 遗传与发育学部分 125
*实验21 人类外周血淋巴细胞的培养及染色体核型分析 125
*实验21.2 染色体的G带核型分析 127
实验22 人类染色体的荧光原位杂交分析 130
实验23 用P因子构建dcaf-1转基因果蝇及对dcaf-1突变株突变表型的拯救实验 133
*实验24 发育相关基因的表达、诱变及其功能研究 143
*实验24.1 斑马鱼发育特异基因表达原位杂交 143
*实验24.2 斑马鱼发育相关基因的过量表达和对发育影响的观察 143
*实验24.3 反转录病毒介导斑马鱼插入突变与诱变效率的初步判断 144
*实验24.4 线虫发育相关基因的诱变 145
*实验24.5 线虫突变品系互补实验判定两个隐形突变基因是否为等位基因 146
D 细胞生物学部分 147
*实验25 动物细胞的传代培养 147
*实验26 磷酸钙介导的外源基因导入哺乳动物细胞 150
*实验27 细胞凋亡的检测 152
E 动物生理学部分 155
实验28 蟾蜍皮肤感受器传入冲动的记录 155
实验29 玻璃微电极制备、充灌和电极电阻测量 159
实验30 在体蟾蜍心肌细胞动作电位的记录 161
实验31 蟾蜍骨骼肌细胞静息电位和动作电位的观察和记录 164
实验32 几种离子和神经递质对蟾蜍离体心脏搏动的影响 168
实验33 家兔动脉血压的调节 172
实验34 家兔减压神经对血压的调节作用及神经冲动的引导 177
F 微生物学部分 181
实验35 酵母菌单倍体原生质体融合 181
实验36 多粘菌素E发酵及管碟法测定生物效价 184
实验37 大肠杆菌λ噬菌体的局限性转导 191
G 环境生态学部分 194
实验38 种群的Logistic增长及计算机模拟 194
实验39 用黑白瓶测氧法测定水体初级生产力 196
实验40 植物激素对植物形态建成的作用 198
H 植物生理学部分 198
实验41 还原糖含量的测定 202
I 生物技术学部分 205
实验42 土壤农杆菌介导的烟草基因转化 205
实验43 外源基因在原核细胞中表达和初步纯化 210
实验44 DNA的Southern分析 215
J 组织学部分 220
实验45 动物组织石蜡切片制作 220
实验46 核酸、肝糖和碱性磷酸酶的组织化学染色 225
Ⅰ.1 常用缓冲溶液的配制方法 228
附录Ⅰ 生物化学实验常用数据表 228
附录 228
Ⅰ.2 常用蛋白质相对分子质量标准参照物 234
Ⅰ.3 常用市售酸碱的浓度 235
附录Ⅱ 人体染色体G带特征 236
附录Ⅲ 显微摄影 239
附录Ⅳ 部分仪器介绍 247
Ⅳ.1 RM6240B多道生理信号采集处理系统操作简介 247
Ⅳ.2 SWF-IW型微电极放大器简介和使用指南 250
Ⅳ.3 PIP5型玻璃微电极拉制仪简单结构和使用说明 253
Ⅳ.4 生理实验常用换能器 254