目 录 1
0绪论 1
0.1植物细胞工程的概念和任务 1
0.2植物细胞工程的发展历史 2
0.3植物细胞工程的展望 4
1细胞工程研究的基本设备和无菌操作 6
1.1基本设备 6
1.2无菌操作 14
1.3培养基组成及母液配制 18
2植物细胞工程的应用 23
2.1植物细胞工程与植物育种 23
2.1.1花粉单倍体及其育种中的应用 23
2.1.2胚胎培养与育种 27
2.1.3细胞融合与育种 34
2.1.4突变体筛选与育种 34
2.2细胞工程与植物快速无性繁殖和脱毒 34
2.2.1植物离体培养与育苗工厂化 34
2.3.2超低温保存种质基因库的研究进展 36
2.3.1种质保存的研究概况 36
2.3植物细胞工程与种质保存 36
2.2.2植物离体培养与脱除植物病毒 36
2.4植物细胞工程与医药和食品工业化生产 37
2.4.1酶制品 37
2.4.2生物碱类 37
2.4.3甾体类 37
2.4.4萜类 37
2.4.5天然色素类 37
3.1.2植物细胞全能性概念 39
3.1.1植物的再生现象 39
3.1植物细胞全能性 39
3植物细胞全能性和细胞脱分化、再分化 39
3.1.3植物细胞全能性的实现途径 40
3.2植物细胞的分化 43
3.2.1植物细胞的分化现象 43
3.2.2植物细胞分化的概念 46
3.2.3分子遗传学观点如何解释细胞分化 46
3.3离体培养条件下植物细胞的脱分化和再分化 47
3.3.1细胞脱分化和再分化的概念 47
3.3.2离体培养条件下细胞的脱分化和再分化的时期 48
3.3.3植物细胞脱分化和再分化的条件 50
3.4.1植物胚状体发生的普遍性 53
3.4植物胚状体 53
3.4.2植物胚状体的概念 56
3.4.3胚状体的类别和特点 57
4影响植物细胞脱分化和再分化的因子 59
4.1培养基组成对植物细胞脱分化和再分化的影响 59
4.1.1培养基的营养组成 59
4.1.2培养基的渗透压 66
4.1.3培养基的酸碱度 67
4.2.2温度条件 69
4.2.1湿度条件 69
4.2环境条件与植物细胞的脱分化和再分化 69
4.2.3光照条件 72
4.3供体遗传性和生理状态与植物细胞脱分化和再分化 76
4.3.1供体植物的遗传性与器官发生 76
4.3.2供体植物的生理状态与器官发生 77
5植物离体快速无性繁殖和无病毒植物的培养 79
5.1植物的离体快速无性繁殖 79
5.1.1离体无性繁殖的概念和优越性 79
5.1.2离体无性繁殖中的器官发生方式 80
5.1.3离体无性繁殖的程序和技术关键 81
5.2.1植物病毒的危害和培养无病毒植物的意义 89
5.2无病毒植物的培养 89
5.2.2脱除植物病毒的原理及方法 90
5.2.3无病毒植株脱毒程序 98
5.2.4无毒原种苗的繁殖 102
6人工诱发单倍体及其应用 104
6.1植物单倍体的概念和单倍体的发生方式 104
6.1.1植物单倍体的概念和来源 104
6.1.2单倍体在植物育种中的应用 105
6.2离体培养条件下小孢子发育成植物体的途径 110
6.2.1花粉孢子体概念的建立 110
6.2.2花粉孢子体的发育途径 111
6.2.3花粉植株的形态发生方式 115
6.3花粉单倍体植物的培养程序 115
6.3.1材料准备 116
6.3.2诱导小孢子脱分化和再分化 120
6.3.3分化培养和壮苗培养 122
6.3.4完整植物体的形成 123
6.3.5再生小植株的驯化和移植 124
6.4单倍体植株的鉴定和二倍化的方法 124
6.4.1花粉单倍体植株的鉴定 124
6.4.2单倍体植物的染色体加倍 127
7.1.1胚胎培养的意义 129
7.1胚胎培养的内容及意义 129
7植物胚胎培养 129
7.1.2胚胎培养的内容和概念 132
7.2胚培养 133
7.2.1离体胚培养的方法 133
7.2.2胚龄与胚性发育的关系 133
7.2.3离体胚培养的技术关键 135
7.3胚乳培养 136
7.3.1胚乳离体培养的意义 136
7.3.3胚乳培养的技术关键 139
7.3.2胚乳培养的方法 139
7.4植物的离体受精 142
7.4.1离体受精的概念和意义 142
7.4.2离体受精的方法 142
7.4.3离体受精成功的技术关键 143
8植物单细胞培养和突变体筛选 145
8.1单细胞培养 145
8.1.1植物单细胞培养的意义 145
8.1.2植物单细胞培养的方法 145
8.1.3单细胞培养的程序 147
8.1.4单细胞培养的技术关键 149
8.1.5单细胞培养成功的范例 152
8.2突变体筛选 154
8.2.1突变体筛选及其应用 154
8.2.2突变体筛选的原理及诱变剂 156
8.2.3植物细胞突变体的选择方法 158
8.2.4突变体筛选程序 158
8.2.5突变体筛选的成功范例 161
9.1植物原生质体培养 163
9.1.1原生质体的概念及培养的意义 163
9植物原生质体培养和细胞融合 163
9.1.2原生质体的分离 164
9.1.3原生质体的纯化 167
9.1.4原生质体培养及其技术关键 168
9.2植物细胞融合 171
9.2.1植物细胞融合的概念和意义 171
9.2.2诱导细胞融合的方法及融合剂 172
9.2.3植物细胞融合的程序 174
9.2.4融合体的类型 175
9.2.5细胞杂种的选择和鉴定 177
10.1超低温冷冻保存种质 181
10.1.1种质保存的发展概况 181
10超低温冷冻保存种质和人工种子 181
10.1.2超低温冷冻保存种质的方法及原理 182
10.1.3超低温冷冻保存种质的程序 182
10.1.4超低温冷冻保存种质技术的应用前景 184
10.2人工种子 186
10.2.1人工种子的概念及其研制的意义 186
10.2.2植物体细胞胚胎发生及其同步性技术的研究 187
10.2.3人工种皮的研制 188
10.2.4人工种子包埋方法的研究 189
10.2.5人工胚乳的研制 191
10.2.6人工种子的应用前景 192
11植物细胞遗传转化体系的建立 194
11.1植物基因转化的受体 194
11.1.1原生质体 194
11.1.2悬浮细胞 194
11.1.3胚性愈伤组织 195
11.1.4胚状体 196
11.1.5叶圆片 196
11.1.6其他受体 197
11.2植物基因转化的方法 197
11.2.1农杆菌介导法 197
11.2.2基因枪转化法 199
11.2.3聚乙二醇－介导法 200
11.2.4其他转化方法 202
11.3转基因植株再生及其检测 204
11.3.1转基因植株再生 204
11.3.2转基因植株的检测 207
附录一实验技术 211
实验1培养基母液的配制 211
实验2培养基配制与灭菌 214
实验3培养材料的灭菌与接种 216
实验4花粉发育时期的鉴定 219
实验5种胚的离体培养 221
实验6植物原生质体的游离和融合 223
实验7植物离体培养中的形态观察 227
实验8根尖染色体数目鉴定 229
实验9植物细胞的生长计量技术 232
实验10烟草遗传转化实验 239
附录二常用的培养基配方（单位mg/L） 241
附录三药品浓度换算表［mol和ppm（mg/L）的换算表］ 252
附录四温湿度换算表 260
附录五常用英文缩写词 262
参考文献 265