第一节 组织培养原理 1
第一章 概论 1
第二节 研究概况 3
第三节 实验室的建立 10
一、实验室设计 10
二、基本设备 12
三、所用仪器 13
四、常备药品 14
五、材料器皿洗涤消毒 17
六、实验室要求与无菌操作 30
第四节 基本技术 31
一、培养基 31
二、材料选择与表面消毒 44
一、主要用途 55
第二章 组织培养 55
第一节 茎尖培养 55
二、培养方法 56
三、苹果茎尖培养 58
四、梨茎尖培养 63
五、葡萄茎尖培养 66
六、桃茎尖培养 70
七、樱桃茎尖培养 74
八、山楂茎尖培养 77
九、黑穗醋栗茎尖培养 78
十、草莓茎尖培养 78
十一、枇杷茎尖培养 80
十二、番木瓜茎尖培养 81
十三、香蕉茎尖培养 83
十四、柑桔茎尖培养 84
十五、核桃茎尖培养 85
十六、板栗茎尖培养 87
十七、柿茎尖培养 88
十八、梨、榅桲茎尖培养 88
十九、李茎尖培养 88
第二节 花药培养 89
一、培养方法 90
二、培养基 91
三、苹果花药培养 96
四、梨花药培养 97
五、葡萄花药培养 98
六、草莓花药培养 100
七、柑桔花药培养 101
八、荔枝花药培养 102
九、龙眼花药培养 103
十、西瓜花药培养 104
第三节 胚培养 105
一、胚培养 105
二、苹果种胚辐射离体培养 109
三、苹果胚培养 111
四、葡萄胚培养 111
五、桃胚培养 112
六、酸枣胚培养 115
七、山楂胚培养 115
八、樱桃胚培养 117
九、草莓胚培养 117
十、梨胚培养 117
十二、核桃胚培养 119
十一、猕猴桃胚培养 119
十三、柑桔胚培养 120
十四、四季桔种胚培养 121
十五、哈密瓜幼胚培养 121
十六、西瓜种胚培养 122
十七、甜瓜胚培养 124
第四节 胚乳培养 125
一、胚乳培养中愈伤组织形成与器官化的条件 126
二、胚乳培养中的组织学和细胞学研究 128
三、胚乳培养物的形态建成 129
四、胚乳培养物的染色体 131
五、苹果胚乳培养 132
六、葡萄胚乳培养 134
八、猕猴桃胚乳培养 135
七、桃胚乳培养 135
九、枣胚乳培养 137
十、柑桔胚乳培养 138
十一、枇杷胚乳培养 139
十二、梨胚乳培养 139
第五节 器官培养 140
一、苹果的短枝扦插 140
二、猕猴桃器官培养 141
三、石榴叶片培养 146
四、核桃愈伤组织诱导 148
五、金柑组织培养 149
六、枳胚珠培养 150
八、菠萝组织培养 152
九、黄菠萝组织培养 152
十、香蕉组织培养 153
十一、柚子组织培养 155
十二、葡萄组织培养 155
十三、无籽西瓜组织培养 156
十四、白兰瓜组织培养 156
七、柑桔茎段培养 157
十五、菠萝果实培养 157
十六、西瓜子叶和下胚轴培养 157
十七、苹果叶片培养 158
十八、苹果叶柄培养 159
十九、核桃器官培养 159
二十、枣茎段培养 160
二十一、榛子组织培养 161
二十二、凤梨组织培养 162
三十三、扁桃组织培养 163
二十四、李胚与子叶培养 164
第三章 愈伤组织与细胞培养 165
第一节 愈伤组织培养 165
一、培养技术 165
二、愈伤组织的诱导 167
三、愈伤组织的生长 168
四、愈伤组织的分化 169
第二节 细胞悬浮培养 170
一、概述 170
二、操作程序 170
第三节 胚状体 173
一、胚状体的概念与研究胚状体的意义 173
二、胚状体发生的普遍性 174
四、诱导胚状体的因素 175
三、胚状体的胚胎发生过程 175
五、胚状体与器官发生型的识别 176
第四章 果树无病毒苗的培育 177
第一节 病毒危害 177
第二节 脱毒方法 177
第三节 脱毒苗的鉴定 179
第四节 无病毒苗的保存与利用 180
第五节 苹果无病毒苗的培育 181
第六节 柑桔无病毒苗的培育 182
第七节 草莓无病毒苗的培育 187
第八节 葡萄无病毒苗的培育 192
第五章 生长发育与激素控制 194
第一节 激素与胚胎培养 195
第二节 激素与花药培养 202
第三节 激素与器官培养 208
第四节 激素与原生质体培养 213
第六章 种质资源的低温保存 217
第一节 低温保存 217
第二节 冷冻保存 218
第三节 超低温冰冻保存的操作程序 222
第四节 苹果培养茎尖的超低温保存 223
第五节 苹果冬芽的超低温保存 223
第六节 草莓茎尖分生组织的冷冻保存 224
第七节 冷冻保存技术的应用及其问题 225
第七章 体细胞突变与筛选 227
第一节 从植物培养细胞分离突变体 227
第二节 突变体的选择 230
第三节从培养离体器官分离突变体 231
第四节 分子生物学诱变 234
一、培养细胞的染色体变异 237
第五节 植物培养细胞的染色体变异与鉴定方法 237
二、染色体的鉴定方法 238
第六节 果树染色体观察方法 241
第七节 同工酶的应用与测定技术 246
一、应用 246
二、测定技术 247
第八章 试管受精 250
第一节 操作方法 250
第二节 影响试管受精成功的因素 252
第三节 试管受精技术在杂交育种上的应用 254
第一节 果树原生质体培养现状与展望 256
一、概况 256
第九章 原生质体培养 256
二、原生质体分离 258
三、原生质体培养 264
四、展望 268
第二节 原生质体分离与培养 270
一、原生质体分离纯化 270
二、原生质体无关培养 281
三、原生质体培养中的生长与分化 285
第三节 苹果原生质体培养 287
第四节 梨原生质体培养 293
第五节 葡萄原生质体培养 296
第六节 猕猴桃原生质体培养 297
第七节 樱桃原生质体培养 302
第八节 柑桔原生质体培养 307
第九节 龙眼原生质体培养 309
第十节 甜瓜子叶原生质体培养 311
第十一节 哈密瓜原生质体培养 315
第十章 原生质体融合 318
第一节自发融合与诱导融合 319
第二节 诱导剂与诱导融合 319
一、PEC诱导融合法 319
二、融合体培养和核融合 322
三、融合体的选择 323
第三节 柑桔种间原生体融合 326
一、原生质体分离 326
二、原生质体融合 327
三、融合体的培养 327
第十一章 基因工程 331
一、启动子 332
第一节 基因的构成和组建 332
二、结构基因 336
三、调整子 337
四、终止子 338
第二节 选择标志基因介绍 339
第三节 基因转移方法 340
一、农杆菌基因转化法 340
二、生物射击法 351
三、聚乙二醇转化法 353
四、电场诱导转化法 354
五、湿微注射法 355
六、其它基因转化法 355
七、基因转化法小结 356
第四节 基因的表达分析与鉴定 357
一、GUS测定 358
二、DNA与DNA杂交法 359
三、DNA与RNA杂交法 360
四、蛋白质杂交技术 362
五、聚合酶链反应 363
第五节 抗性及其它有关基因的研究与应用 364
一、抗病毒基因的转化 364
二、抗虫基因的转化 366
三、抗细菌性病害的基因转化 368
四、抗真菌性病害的基因转化 371
五、其它基因研究 373
第六节 几种果树瓜类的基因转移 380
一、苹果的基因转移 380
二、桃的基因转移 382
三、核桃的基因转移 383
四、葡萄的基因转移 385
五、草莓的基因转移 386
六、李的基因转移 388
七、香瓜的基因转移 388
第十二章 PCR技术原理与应用 390
第一节 原理 390
第二节 特点 391
第三节 影响PCR的因素 393
第四节 问题及解决办法 395
第五节 Tag DNA 聚合酶的性能 396
第六节 PCR方法 397
第七节 PCR的应用 400
附录 403
一、术语解释 403
二、果树组织培养名录 407
参考文献 471