目 录 1
第1章绪论 1
参考文献 3
第2章酶工程原理 5
2.1酶研究概况 5
2.2酶催化反应的特点 6
2.3与酶相关的概念 9
2.4酶催化机理 11
2.5影响酶催化反应的因素 13
2.6酶的立体专一性反应机制 14
2.7酶催化反应三点结合学说 15
2.8对映体过量值的检测 16
2.9酶催化反应的类型 17
2.10非水相酶催化反应 17
2.10.1非水相酶催化反应中微量水的作用 18
2.10.2非水相中酶的结构与功能 19
2.10.3非水相中酶的特性 20
参考文献 24
第3章酶的生产与制备 26
3.1天然微生物酶的发酵技术 27
3.1.1 营养性因子的影响 27
3.1.2非营养性因子的影响 28
3.2工程菌的高密度发酵 31
3.2.1大肠杆菌工程菌的高密度发酵 31
3.2.2酵母工程菌的高密度发酵 34
3.3酶生产的下游技术 43
3.3.1提取 43
3.3.2包涵体的变性和复性 44
3.3.3浓缩 45
3.3.4酶的精制－柱色谱分离 47
参考文献 57
4.1.1 引言 59
4.1酶工程制药中的固定化技术 59
第4章酶工程制药的工艺和工程化技术 59
4.1.2共价结合 61
4.1.3 吸附 64
4.1.4包埋和微胶囊 64
4.1.5固定化酶的催化特性 66
4.1.6 固定化酶的反应器 68
4.1.7固定化酶的应用举例 70
4.2酶工程制药中的非水相酶催化技术 75
4.2.1酶促合成手性四氢呋喃磺酸酯 76
4.2.2二醇烯烃的酶促非对称化作用 80
4.2.3酶促合成甲酰肼 88
4.2.4肽的非水相酶法合成 102
4.3酶法手性合成技术 109
4.3.1概论 109
4.3.2血管肽酶抑制剂 110
4.3.3 β3受体激活剂 115
4.4游离酶与全细胞在制药工艺中的应用 118
4.4.1游离酶与全细胞的优点及局限性比较 118
4.4.2游离酶与全细胞应用与发展 119
4.5辅酶的再生－依赖于辅因子的氧化还原酶的应用 123
4.5.1 氧化还原酶在氨基酸合成中的应用 123
4.5.2羟酸 125
4.5.3在醇类、醛类和酮类化合物生产中的应用 126
4.5.4内酯制备 127
4.5.5在甾体化合物生物转化方面的应用 127
4.5.6其他生产过程中的应用 128
4.6展望 128
参考文献 129
第5章酶工程制药的应用 131
5.1降血压和降血脂药物 131
5.1.1血管紧张肽转变酶中性内肽酶抑制剂 131
5.1.2凝血噁烷A2拮抗剂 134
5.1.3钙离子通道阻断剂 136
5.1.4钾离子通道激活剂 136
5.2降血脂、降胆固醇药物 138
5.3抗心律失常剂 142
5.4手性药物中间体R-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的酶法合成 143
5.4.1概述 143
5.4.2酮基还原酶的克隆表达 144
5.4.3转化条件优化 148
5.5青霉素酰化酶在半合成抗生素中的应用 150
5.5.1概况 150
5.5.2生产菌株改良 151
5.5.3培养条件优化 153
5.5.4酶的提取 155
5.5.5青霉素酰化酶的固定化 156
5.5.6青霉素G经PA水解得到6-APA 159
5.5.7 固定化青霉素酰化酶生产头孢氨苄 161
参考文献 163
第6章酶工程制药的发展趋势 165
6.1科学技术发展的要求 165
6.2新酶的发现 167
6.3现有酶的改造 169
6.4仿生酶的研究 173
参考文献 180
中文索引 182
英文索引 185