第一节 流式细胞术发展史 1
第一章 流式细胞仪的结构和原理 1
第二节 流式细胞仪的结构和工作原理 2
一、流式细胞仪的结构 3
二、流式细胞仪的主要技术指标 9
三、流式细胞仪补偿设置 11
第一节 样本单细胞悬液的制备方法 16
一、新鲜实体组织样本的制备 16
第二章 流式细胞术样品制备及分析技术 16
二、组织活检、内镜取材标本单细胞悬液的制备 19
三、石蜡包埋组织样本的制备 19
四、外周血单个核细胞样本的制备 20
五、骨髓细胞单细胞悬液的制备 20
六、培养细胞单细胞悬液的制备 21
七、脱落细胞单细胞悬液的制备 21
第二节 样品的荧光标记、检测和分析 22
一、荧光标记原理 22
三、溶血剂的应用 27
二、细胞破膜剂的应用 27
第三节 免疫细胞的样品制备和分析 28
一、基本原理 28
二、淋巴细胞亚群分析 29
第四节 DNA含量检测样品的染色和分析 33
一、分析DNA含量样品的制备 33
二、细胞DNA含量的分析 33
第五节 细胞凋亡的检测和分析 36
二、早期细胞凋亡的流式细胞术检测——AnnexinVFITC/PI法 39
一、早早期细胞凋亡的流式细胞术检测——半胱氨酸蛋白酶3检测法 39
三、早期细胞凋亡的流式细胞术检测——Apo2.7检测法 40
四、晚期细胞凋亡的流式细胞术检测——TUNEL法 40
五、晚晚期细胞凋亡的流式细胞术检测——DNA含量分析法 41
六、细胞凋亡相关基因蛋白的流式细胞术检测 42
第六节 血小板及其活化的FCM分析 43
一、血小板表面标记的检测方法 43
二、用流式细胞术计数网织血小板 43
三、用流式细胞术检测血小板相关抗体 44
四、用流式细胞术检测活化的血小板 46
五、用流式细胞术检测血小板的注意事项 47
第七节 造血干细胞（CD*34＋细胞）的检测 48
一、CD*34检测方案的标准化 49
二、DNA/RNA染料／CD*34-PE/CD*45-PC5定量荧光微球检测 52
三、CD*34＋计数的质量控制 54
第八节 白血病细胞免疫分型 55
一、标本的收集、保存和处理 56
二、单克隆抗体的选择 56
三、免疫表型的分析程序 57
四、仪器分析与结果判断 58
五、流式细胞术在白血病免疫分型中的临床应用 59
六、流式细胞术用于白血病免疫分型中的注意事项 61
七、白血病微小残留病的检测 62
第九节 定量流式细胞术 62
一、细胞表面分子的定量分析 62
二、微球流式芯片技术 66
一、细胞RNA含量样品的制备及分析 69
第十节 流式细胞术在其他相关指标检测中的应用 69
二、细胞蛋白质总量样品的制备及分析 70
三、网织红细胞样品的制备及分析 70
四、外周血CD4＋细胞CD*45-RA/CD*45R0的表达 72
五、外周血CD4＋细胞CD*40/CD*40L的表达 73
六、Th1细胞和Th2细胞的检测 73
七、外周血白细胞HLA-B*27的表达 76
八、阵发性睡眠血红蛋白尿患者外周血细胞的流式细胞术分析 78
九、多药耐药基因蛋白表达的检测 79
一、流式细胞仪的可变性 81
第十一节 流式细胞术参数的质量控制 81
二、标本的可变性 86
三、操作过程的可变性 89
四、数据分析的可变性 90
第三章 人体流式细胞术参数的正常参考值 92
第四章 流式细胞术彩色图谱实例及其分析 96
第一节 不同方法对肿瘤细胞DNA含量的分析 97
一、1例肺癌患者瘤组织细胞DNA含量的不同分析方法 97
二、DNA直方图和假三维图 98
一、低渗处理 99
第二节 实验条件对流式细胞术分析结果的影响 99
二、未固定细胞样品染色后存放时间对细胞表面标志检测结果的影响 100
三、在散射光图上设一个“门”分析多种参数 100
四、用CellQuest软件设多个“门”分析某1种参数 101
五、在DNA含量分析时去除二联体细胞的方法 103
六、校准流式细胞仪线性度和检测流式细胞仪灵敏度 104
七、在细胞DNA直方图上鉴别细胞凋亡与DNA异倍体G0/1期细胞峰 105
八、在DNA直方图上鉴别细胞增殖（SPF）与DNA异倍体G0/1细胞峰 106
九、细胞凋亡和细胞坏死在细胞DNA直方图上的比较分析 107
十、磁珠分离与骨髓组织各种细胞的百分率 109
第三节 细胞总蛋白质含量分析 111
第四节 细胞RNA含量检测 111
第五节 细胞DNA倍体分类 112
一、DNA含量分析参数 112
二、二倍体细胞 113
三、近二倍体细胞 116
四、四倍体细胞 119
五、非整倍体细胞 121
六、多异倍体 128
第六节 DNA倍体异质性分析 133
一、肿瘤原发灶DNA倍体异质性分析——同质体肿瘤 135
二、肿瘤原发灶DNA倍体异质性分析——异质体肿瘤 139
三、肿瘤原发灶DNA倍体异质性分析的临床意义 149
四、肿瘤原发灶和淋巴结转移灶细胞DNA倍体异质性分析 154
五、肿瘤原发灶和癌旁组织细胞DNA倍体异质性分析 157
第七节 人类体细胞染色体的流式细胞术分析 160
第八节 细胞动力学参数检测 161
一、细胞增殖活性的检测 163
二、用增殖细胞核抗原（PCNA）检测细胞增殖活性 165
三、用Ki-67检测细胞增殖活性 166
四、用CD71检测细胞增殖活性 168
五、用BrdU单克隆抗体检测细胞增殖活性 170
六、细胞周期素的检测 171
七、细胞凋亡的检测 173
八、细胞分化的检测 190
第九节 机体免疫功能的检测 192
一、外周血T细胞、B细胞、NK细胞的同步检测法 195
二、外周血T细胞的检测 196
三、外周血B细胞的检测 206
四、外周自然杀伤（NK）细胞的检测 209
第十节 造血干细胞的表达 211
一、荧光标记单参数检测造血干细胞——CD34-FITC 212
二、荧光标记双参数检测造血干细胞 214
三、荧光标记三参数检测造血干细胞——ProCOUNT法 218
第十一节 白血病细胞的免疫分型 220
一、正常骨髓CD45/SSC流式细胞术图谱 220
二、急性淋巴细胞白血病（ALL）的免疫表型特征 220
三、急性粒细胞白血病的免疫表型特征 230
四、混合型白血病的免疫表型特征 246
五、骨髓异常增生综合征（MDS）的免疫表型分析 248
六、多发性骨髓瘤（MM）的免疫表型分析 249
七、慢性淋巴细胞增殖性疾病 250
第十二节 细胞生长因子的检测 251
一、白介素2受体（IL-2R,CD25） 251
二、干扰素γ（IFN-γ） 252
三、α肿瘤坏死因子（TNF-α） 252
五、可溶性血清蛋白分子（CBA）的检测 253
四、细胞内细胞生长因子的检测 253
第十三节 网织红细胞的检测 256
第十四节 血小板的检测 258
一、血小板表面糖蛋白（CD41）的检测 259
二、血小板抗体的检测 260
三、网织血小板的识别和统计分析 261
四、活化血小板的检测 265
第十五节 HLA-B27表达的检测 268
第十六节 常见癌基因编码蛋白的检测 272
一、抑癌基因编码蛋白表达的检测 273
二、癌基因编码蛋白表达的检测 280
三、调整基因编码蛋白的检测 286
四、多药耐药基因编码蛋白（P*170）的表达 291
五、Fas基因蛋白的检测 296
第十七节 流式细胞术在生殖医学中的应用 297
第十八节 细胞中自发荧光药物浓度的检测 300
第十九节 流式细胞术在移植中的应用 301
第二十节 流式细胞术在阵发性夜间血红蛋白尿（PNH）诊断中的应用 305
第二十一节 ALL病人KOR—SA*3544表达与Ph染色体频率 307