第一部分 绪论 3
第一章 疫苗发展历史 3
一、疫苗的概念及分类 3
目录 3
二、人用疫苗年表 4
第二章 疫苗新概念及新概念疫苗 7
一、核酸疫苗 7
二、T细胞疫苗 9
三、树突状细胞疫苗 10
第三章 未来疫苗学的发展方向及展望 13
一、针对传染性疾病的新疫苗 13
二、针对非感染性疾病的新疫苗 15
三、新的疫苗传递技术 16
第一节 核酸疫苗的发展历史 21
一、核酸免疫技术的发现及意义 21
第二部分 核酸疫苗 21
第四章 核酸疫苗概述 21
二、核酸疫苗的研究现状 23
第二节 免疫学基础 24
第三节 展望及存在问题 27
第五章 核酸疫苗的构建 30
第一节 目的基因的筛选 30
一、筛选原则 30
二、目的基因序列的来源和分离 30
三、已用于DNA疫苗的目的基因 34
第二节 载体的选择 36
一、载体的结构及功能 37
二、克隆载体 39
三、表达载体 48
一、DNA片段的制备 53
第三节 重组质粒的构建 53
二、载体的选择 59
三、外源DNA片段与载体片段的连接 59
第六章 核酸疫苗的免疫流程 65
第一节 核酸疫苗的制备 65
一、质粒的提取和纯化 65
二、细菌感受态的制备和质粒的转化 70
三、重组质粒DNA的筛选与鉴定 74
第二节 接种方法及途径 76
一、免疫途径 76
二、免疫方法 76
一、接种剂量 81
二、接种周期 81
第三节 接种剂量与周期 81
第七章 免疫保护效果的评价 84
第一节 细胞免疫 84
一、T细胞功能检测 84
二、细胞因子的检测 88
第二节 体液免疫 91
一、B细胞增殖试验 91
二、抗体检测 92
第八章 影响核酸疫苗免疫效果的因素 95
第一节 载体设计 95
一、质粒载体启动子 95
二、质粒DNA中的免疫刺激序列 96
三、质粒DNA中的免疫抑制序列 97
四、目的基因的选择 97
二、接种方法 98
第二节 接种途径和方法 98
一、接种途径 98
三、接种剂量和次数 99
第三节 核酸免疫动物模型 99
第四节 分泌型免疫原与膜结合型免疫原 100
第五节 注射器的类型、DNA溶剂的性质、注射体积、速度、方向和深度 101
第六节 其他因素 101
第九章 增强核酸免疫效果的策略 104
第一节 优化载体 104
第二节 使用肌肉再生诱导剂 105
一、肌肉再生诱导剂 105
二、使用肌肉再生诱导剂可能的机制 106
第三节 与细胞因子联合 106
一、与细胞因子联合应用的方法 106
一、CpG ODN的功能 107
二、已用于联合的细胞因子 107
第四节 使用免疫激活DNA序列CpG ODN 107
二、CpG DNA的佐剂作用 108
第五节 注射共刺激信号分子 109
第六节 与抗原蛋白联合应用 109
第七节 形成嵌合型或多重抗原型DNA疫苗 109
第八节 多表位联合疫苗 110
第九节 MVA可加强DNA疫苗抵抗疟疾 111
第十节 电脉冲增强核酸疫苗的免疫原性 111
第十一节 与趋化因子联合 112
第十二节 微生物蛋白的佐剂效应 112
第十章 核酸疫苗的特点及安全性评价 115
第一节 核酸疫苗的优点 115
（一）导致肿瘤形成 116
第二节 安全性评价 116
（三）抗DNA抗体的形成 117
（二）长期表达抗原 117
（四）其他因素 118
第十一章 核酸疫苗在病毒性疾病中的临床应用 120
第一节 乙型病毒性肝炎 120
一、乙型肝炎病毒的基因结构 120
二、传统的乙型肝炎疫苗 121
三、抗病毒药物治疗 122
四、抗病毒基因治疗 126
五、HBV核酸疫苗 126
第二节 丙型病毒性肝炎 131
一、HCV基因结构及功能 132
二、HCV核酸疫苗 132
一、HIV基因结构及功能 136
第三节 艾滋病 136
二、病毒与免疫 137
三、预防和治疗现状 138
四、HIV核酸疫苗 138
第四节 麻疹 141
一、麻疹病毒基因结构及其功能 141
二、传统的麻疹疫苗 142
三、MV核酸疫苗 142
第十二章 核酸疫苗在非病毒性疾病中的应用 154
第一节 结核病 154
一、流行病学 154
二、传统的预防和治疗概况 154
三、结核核酸疫苗 157
四、问题与展望 159
第十三章 核酸疫苗在寄生虫疾病中的应用 163
第一节 疟疾 163
一、流行病学 163
二、疟疾的生活史及抗原 163
三、传统的疟疾预防和治疗 165
四、疟疾核酸疫苗 170
第十四章 核酸疫苗在肿瘤中的应用 176
第一节 恶性肿瘤的治疗现状 176
第二节 核酸疫苗在抗肿瘤治疗中的优势 176
一、肿瘤核酸疫苗目的基因的选择 177
二、核酸疫苗在抗肿瘤治疗中的传送路径 179
三、增强肿瘤核酸疫苗免疫效果的方法 180
四、抗肿瘤核酸疫苗的相关难题及克服方法 180
二、人体试验 182
一、动物试验 182
第三节 治疗肿瘤的核酸疫苗 182
第四节 针对有遗传诱因肿瘤的预防性核酸疫苗 183
第五节 核酸疫苗对病毒介导的肿瘤的预防 184
第三部分 T细胞疫苗 191
第十五章 T细胞的表面标记和分化发育 191
第一节 T细胞的表面标记 191
一、T细胞表面标记 191
二、其他T细胞膜分子 197
第二节 T细胞的分化发育 200
一、T细胞在胸腺内分化 200
二、成熟T细胞的分化 203
第十六章 Th1和Th2的细胞特性 208
第一节 Th1和Th2的定义 208
第三节 Th1和Th2膜表面标志的区别 209
三、记忆T细胞 209
一、表达于Th1的膜表面分子 209
第二节 Th1和Th2的发育过程 209
二、效应Th细胞 209
一、前体Th细胞 209
二、表达于Th2的膜表面分子 210
三、共同表达于两类细胞的膜表面分子 210
第四节 影响Th1与Th2分化和增生的因素 211
一、细胞因子 211
二、抗原递呈细胞的作用 212
三、配体密度和抗原剂量 213
四、激素及激素前体的作用 213
五、遗传背景 213
六、趋化因子的作用 213
八、细胞凋亡 214
七、共刺激因子 214
九、小分子化学物质 215
十、分化后的Th细胞稳定性 215
第五节 Th1和Th2信号传导途径 215
一、TCR/CD3相关信号传导途径 215
二、细胞因子介导的信号传导途径 215
第六节 Th1和Th2介导的功能 216
一、Th1细胞因子的生物学功能 216
二、Th2分泌细胞因子的生物学功能 217
三、两者共同分泌的细胞因子 218
四、Th对细胞的作用 218
第七节 Th细胞与疾病的关系 219
一、感染性疾病 219
三、过敏性疾病 220
二、自身免疫性疾病 220
五、其他疾病 221
第八节 Th细胞亚群研究的临床意义 221
四、移植排斥反应 221
一、一些疾病的免疫病理和病因的讨论 222
二、诊断 222
三、预防 222
第十七章 细胞毒性T淋巴细胞 224
第一节 Tc1和Tc2 224
一、Tc细胞亚群及其分化 225
二、Tc细胞亚群的功能 226
三、Tc细胞亚群功能的调节 227
四、Tc细胞亚群与疾病的关系 229
五、抑制性T细胞 230
一、CTL 231
第二节 细胞毒性T细胞的杀伤机制 231
二、颗粒酶的释放 232
三、病毒的反击 237
第十八章 T细胞表位 239
第一节 概述 239
一、表位的概念 239
二、天然抗原的表位 240
第二节 T细胞识别抗原表位的分子基础 243
一、T细胞受体 243
二、MHC分子 244
三、辅佐分子 247
四、T细胞识别抗原表位的特点 247
二、外源性抗原的加工和呈递 248
一、内源性抗原的加工和呈递 248
第三节 抗原表位的加工和呈递 248
第四节 病原体抗原的T细胞表位 250
一、病毒 250
二、细菌 257
三、寄生虫 258
四、变应原 259
第五节 T细胞表位的应用 260
一、T细胞表位与抗感染免疫 260
二、T细胞表位与肿瘤免疫 262
三、T细胞表位与移植免疫 263
四、T细胞表位与过敏反应 264
五、T细胞表位与自身免疫性疾病 264
一、直接法 265
第六节 T细胞表位研究方法 265
二、间接法 267
三、肽库技术 270
四、计算机预测 271
第十九章 T细胞疫苗与自身免疫性疾病 276
第一节 T细胞疫苗概念的起源 276
第二节 T细胞疫苗制备方法 277
一、接种用T细胞的获得 278
二、T细胞接种前的处理 278
三、接种方式 279
四、TCR多肽疫苗的免疫作用 279
第三节 TCV的作用机制 279
一、抗独特型反应 279
二、抗活化型反应 280
四、体液免疫机制 281
第四节 TCV作用的基础 281
三、Th1/Th2细胞平衡的改变 281
第五节 TCV在移植排斥中的应用 282
第六节 T细胞疫苗的临床应用研究 283
一、多发性硬化（MS） 283
二、类风湿关节炎（RA） 284
三、非肥胖型糖尿病（NOD） 284
第七节 展望 285
第二十章 T细胞疫苗与病毒性肝炎 287
第一节 T细胞疫苗概念的拓展 287
第二节 CTL在HCV发病中的作用 288
一、CTL杀伤靶细胞的机制 288
二、CTL在HCV感染中的作用 289
三、HCV逃避CTL的可能机制 289
第三节 T细胞疫苗与丙型肝炎 291
一、肿瘤抗原的鉴定 294
第二十一章 T细胞疫苗与临床肿瘤治疗 294
第一节 T细胞在肿瘤免疫中的作用 294
二、肿瘤免疫逃避的机制 299
三、T细胞疫苗在肿瘤免疫中的作用 302
第二节 肿瘤治疗性疫苗 305
一、基于T细胞的肿瘤实验性免疫疗法的策略 305
二、肿瘤治疗性疫苗 307
第三节 T细胞功能在肿瘤治疗中的研究 310
一、黑色素瘤 312
二、胰腺癌 318
三、多发性骨髓瘤 319
四、白血病 320
五、中枢神经系统肿瘤 322
七、前列腺癌 324
六、头颈癌 324
八、消化道肿瘤 325
九、乳腺癌 327
十、肾细胞癌 328
十一、宫颈癌 329
第二十二章 CTL活性检测／监测方法及研究进展 336
第一节 抗原特异性免疫的体内检测 337
一、迟发型超敏反应 337
二、体内细胞毒活性 337
第二节 抗原特异性免疫的体外检测 338
一、体外免疫分析淋巴细胞的来源 338
二、抗原特异性细胞免疫应答的体外表型检测 338
三、特异性细胞免疫应答的体外功能检测 341
第三节 不同检测方法的比较和选用 346
第一节 树突状细胞研究历史 351
第四部分 树突状细胞疫苗 351
第二十三章 概述 351
第二节 树突状细胞的功能及其应用研究 352
第二十四章 树突状细胞的起源和发育 355
第一节 树突状细胞分化发育的基本过程 355
第二节 不同分化发育阶段树突状细胞的功能特点 357
一、淋巴系DC 357
二、髓系DC 357
第三节 人和小鼠树突状细胞的分化发育途径及影响因素 359
一、人DC发育分化途径 359
二、小鼠DC发育分化途径 362
三、影响DC分化发育的其他因素 363
第二十五章 树突状细胞的形态及其组织分布 365
第一节 树突状细胞的形态特征 365
第二节 树突状细胞的特异性分子标志 366
第三节 树突状细胞表面特异性分子DC-SIGN 367
一、DC-SIGN的生物学特征 368
二、DC-SIGN在HIV-1病毒感染中的作用 368
第四节 树突状细胞的组织分布 369
一、滤泡DC 369
二、并指状DC 369
三、朗格汉斯细胞 369
第五节 树突状细胞的迁移机制 370
一、树突状细胞迁移路径 371
二、树突状细胞迁移和成熟刺激T细胞活化 371
三、参与树突状细胞迁移的分子 371
第二十六章 树突状细胞亚群及其生物学特性 374
第一节 髓样和淋巴样树突状细胞 374
一、鼠DC的异质性 374
二、人DC的异质性 375
三、髓样DC的成熟和分化 376
第二节 DC1和DC2 378
一、人CC1/DC2亚群 378
二、小鼠DC1/DC2亚群 379
三、DC1/DC2调节Th1/Th2细胞分化的机制 379
第三节 不同树突状细胞亚群的表面标记 379
第四节 树突状细胞亚群及其在固有和适应性免疫中的功能 380
一、骨髓中未成熟DC与DC前体的多样化 381
二、未成熟DC的抗原非依赖性转移及其在免疫耐受中的功能 381
三、未成熟DC抗原依赖性转移及其功能适应性 381
第二十七章 树突状细胞免疫调节功能的新认识 384
第一节 抗原的捕获、转移和细胞成熟之间的密切联系 384
一、树突细胞前体的补充 384
三、移入流出性淋巴器官并生长成熟 385
二、抗原捕获 385
一、MHC-Ⅱ类分子 386
二、MHC-Ⅰ类分子 386
第二节 与抗原递呈相关的分子 386
三、CD1分子 387
第三节 抗原递呈与T细胞激活 387
一、T细胞的诱导 387
二、参与树突细胞、T细胞相互作用的分子 388
三、不同树突细胞亚群诱发不同的Th细胞应答反应 388
四、树突细胞功能的多种适应性 389
第二十八章 树突状细胞的抗原处理与递呈功能 391
第一节 树突状细胞摄取抗原的途径 391
一、呈递内源性抗原的胞质溶胶途径 392
二、呈递外源性抗原的内体溶酶体途径及交叉呈递 392
第二节 树突状细胞对抗原的处理与递呈 392
第三节 树突状细胞在病原-宿主相互作用中所扮演的角色 394
一、DC对病原体进入的监视作用 394
二、感染触发了DC的活化与成熟 394
三、树突状细胞从外周到淋巴组织的迁移 395
四、联合感染信号影响DC的免疫应答类型 395
五、病原体干扰DC功能是一种免疫逃避机制 395
第二十九章 树突状细胞在机体免疫系统中的重要性 397
第一节 DC与T细胞免疫 397
一、DC和T细胞的相互调节作用 397
二、DC和T细胞耐受 399
第二节 DC与B细胞免疫 400
一、DC对B细胞的作用 400
二、DC辅助B细胞产生抗体的可能机制 401
第三节 树突细胞与免疫效应细胞 402
三、FDC在维持记忆性B细胞中的作用 402
第一节 树突状细胞抗病毒免疫的作用机制 404
第三十章 树突状细胞在抗感染免疫中的作用 404
一、DC充当病毒感染的靶位 405
二、DC的病毒感染机制 406
三、DC成为感染性病毒的储存场所 406
四、病毒与DC的成熟 407
五、病毒感染后DC的功能变化 407
第二节 树突状细胞与HIV-1 409
一、DC与H1V-1传播 409
二、树突状细胞与HIV-1发病机制 411
第三节 树突状细胞与病毒性肝炎 412
一、DC与慢性病毒性肝炎 412
二、DC与肝硬化 413
四、DC疫苗在肝脏疾病中的应用前景 414
三、DC与肝癌 414
第四节 DC与其他感染性疾病 415
第三十一章 树突状细胞与肿瘤 418
第一节 肿瘤免疫治疗中的树突状细胞 418
一、用于DC治疗的肿瘤抗原 418
二、DC治疗肿瘤的机制 420
第二节 树突状细胞在肿瘤治疗中的临床应用 421
一、DC治疗肿瘤的临床应用方法 421
二、DC治疗肿瘤的临床概况 425
第三节 树突状细胞在肿瘤治疗中的问题及展望 427
一、DC在肿瘤治疗中的问题 427
二、DC用于肿瘤治疗的现状及展望 428
第一节 树突状细胞在抗血液肿瘤免疫中的作用途径 432
一、DC诱导的自身肿瘤杀伤活性 432
第三十二章 树突状细胞与血液病 432
二、DC治疗肿瘤 433
三、DC判断预后 433
第二节 树突状细胞在抗慢性粒细胞白血病免疫中的作用 434
一、CML生物治疗的分子基础 434
二、肽瘤苗免疫治疗CML研究 435
三、DC瘤苗免疫治疗CML研究 436
第三节 树突状细胞在抗急性白血病免疫中的作用 437
一、多肽瘤苗免疫治疗AL 437
二、DC瘤苗免疫治疗AL 439
第四节 树突状细胞与恶性淋巴瘤的免疫治疗 440
一、多肽瘤苗的研究 440
二、多肽瘤苗在淋巴瘤中的临床应用 441
一、MM瘤苗的研究 442
第五节 树突状细胞与多发性骨髓瘤的免疫治疗 442
二、MM瘤苗的临床研究 443
第六节 树突状细胞在抗其他血液肿瘤免疫中的作用 444
第三十三章 树突状细胞与免疫性疾病的关系 448
第一节 树突状细胞与自身免疫性疾病 448
第二节 树突状细胞在移植免疫中的作用 448
第三节 树突细胞与免疫耐受 450
一、DC在外周耐受中的作用 450
二、新的DC耐受计划 451
三、新计划中的解决方法 452
第三十四章 树突状细胞在老年病中的作用 455
第一节 老化研究中的树突状细胞 455
一、DC前体和老化 455
二、DC在老年人中的密度 455
第二节 治疗应用 456
五、老年人中的T细胞刺激性物 456
四、老龄中DC的成熟 456
三、老龄中DC的迁移 456
第三十五章 树突状细胞实验研究技术 459
第一节 树突状细胞的培养与制备 459
一、DC的来源 459
二、DC的分离纯化 460
三、DC的体外诱生 460
四、DC的鉴定和识别 461
第二节 人树突状细胞新型细胞因子的发现与功能研究 462
一、人树突状细胞cDNA质粒文库的构建及其大规模测序体系的建立 462
二、新型细胞因子CX1的发现及表达确证 462
第三节 树突状细胞研究热点及展望 463
第四节 树突状细胞的体外制备（应用举例） 465
第三十六章 树突状细胞与DNA疫苗的关系 468
第一节 抗原递呈的细胞调节作用 469
第二节 树突状细胞在细胞生物学上的新发现 470
第三节 通过细胞交叉作用的免疫调节 472
第四节 经过CD40-CD154的免疫调节 473
第三十七章 树突状细胞疫苗的制备及其临床应用 476
第一节 树突状细胞疫苗的制备 476
一、树突状细胞疫苗的主要设计策略 476
二、制备疫苗的DC来源和体外培养 479
三、DC疫苗的体外制备方法和存在的问题 479
第二节 以树突状细胞为基础的肿瘤免疫治疗策略 481
一、抗原肽刺激的DC 482
二、肿瘤提取物刺激的DC 483
三、抗原基因转染的DC 483
四、肿瘤细胞与DC的融合细胞 484
五、DC的亚细胞结构 484
一、DC用于临床试验的一般条件 485
六、细胞穿透肽（CPP）疫苗 485
第三节 树突状细胞疫苗的临床应用研究 485
二、DC干细胞来源和分离 486
三、DC离体培养和成熟的方法 486
四、用于免疫治疗的DC制剂特性 487
五、肿瘤患者DC临床治疗的要点 488
六、用于抗感染治疗的DC疫苗 489
七、DC疫苗在肿瘤临床治疗中的效果及发展方向 489
第三十八章 树突状细胞疫苗在肿瘤治疗中的应用 492
第一节 DC疫苗在前列腺癌中的应用 492
一、负载前列腺相关抗原肽的DC疫苗 492
二、负载前列腺相关抗原蛋白、融合蛋白的DC疫苗 493
三、转染肿瘤mRNA或肿瘤相关抗原mRNA的DC疫苗 495
四、转染与DC活性有关的细胞因子、IgG、抗凋亡蛋白DNA的DC疫苗 497
第二节 DC疫苗在黑色素瘤中的应用 499
一、单纯注射DC细胞 500
二、肿瘤抗原肽或肿瘤细胞溶解物负载的DC疫苗 500
三、基因修饰的DC疫苗 503
四、肿瘤细胞和DC的融合细胞疫苗 506
五、凋亡细胞负载DC疫苗 507
第三节 DC疫苗在肾细胞癌中的应用 508
一、负载肾癌溶解物、提取物和受照射肾癌细胞的DC疫苗 508
二、肾癌细胞和DC的融合疫苗 509
三、转肾癌组织RNA的DC疫苗 510
第四节 DC疫苗在其他肿瘤中的应用 511
一、乳腺癌和卵巢癌 511
二、恶性脑神经胶质瘤 511
三、膀胱癌 511