第一章 光谱技术 1
实验1 紫外分光光度法测定血清蛋白质 1
附:紫外分光光度法测定核酸的浓度 3
实验2 血红蛋白及其衍生物的吸收光谱分析 3
实验3 荧光光度法测定β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶含量 5
实验4 原子吸收分光光度法测定血浆锌的含量 7
第二章 层析技术 10
实验5 离子交换柱层析法分离混合氨基酸 10
实验6 凝胶过滤法分离蛋白质 11
实验7 亲和层析法提取特异性IgG 13
实验8 固相层析免疫分析法快速检测肌钙蛋白Ⅰ 15
附:全自动化学发光法测定血浆肌钙蛋白Ⅰ含量 16
第三章 电泳技术 17
实验9 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质 17
附:聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质 21
实验10 琼脂糖电泳分离血清脂蛋白 24
实验11 等电聚焦电泳测定血清蛋白质等电点 25
实验12 毛细管电泳分离血清蛋白质 27
实验13 脉冲场凝胶电泳技术分离DNA 28
附:自动电泳分析系统简介 30
第四章 酶学基本知识实验 31
实验14 分离纯化小麦胚芽中酸性磷酸酶 31
实验15 酶蛋白含量测定及比活性分析 34
实验16 酸性磷酸酶时间进程曲线 37
实验17 酸性磷酸酶酶浓度-速度曲线 38
实验18 pH-酸性磷酸酶活性曲线 39
实验19 酸性磷酸酶米氏常数的测定 40
实验20 磷酸盐对酸性磷酸酶活性的抑制作用 41
第五章 分子生物学实验技术 43
实验21 大鼠肝组织DNA的提取及其含量测定 43
附:外周血细胞DNA的快速提取 44
实验22 碱裂解法从大肠杆菌中制备质粒DNA 45
附:一步法提取质粒DNA 48
实验23 PCR扩增目的DNA 48
实验24 DNA限制性图谱的绘制——DNA的限制性内切酶酶切分析 50
附:聚丙烯酰胺凝胶电泳银染分析DNA 51
实验25 Southern印迹 54
实验26 DNA自动测序实验 56
第六章 方法学评价与试剂盒评价实验 60
第一节 方法学评价试验 60
实验27 线性范围试验 60
实验28 批内重复性试验 62
实验29 回收试验 65
实验30 干扰试验 66
实验31 方法比较试验 68
实验32 检测能力测定 70
附1:血糖测定评价方法(GOD-POD法) 72
附2:血糖测定比较方法(HK法) 73
实验33 化学反应速度时间曲线试验 75
第二节 试剂盒质量评价试验 75
附:稳定性试验 76
第七章 血清(浆)蛋白质测定 78
实验34 双缩脲法测定血清蛋白 78
实验35 溴甲酚绿法测定血清白蛋白 80
附:溴甲酚紫法测定血清白蛋白 82
实验36 免疫透射比浊法测定前白蛋白 83
实验37 凝固法定量测定纤维蛋白原 86
附:热沉淀比浊法测血浆纤维蛋白原 88
实验38 酚试剂法测定血清粘蛋白 89
第一节 血清(浆)葡萄糖测定 92
实验39 葡萄糖氧化酶法测定血清(浆)葡萄糖 92
第八章 糖及其代谢物的测定 92
实验40 邻甲苯胺法测定血清(浆)葡萄糖 94
实验41己糖激酶法测定血清(浆)葡萄糖 96
第二节 血清(浆)糖化蛋白的测定 98
实验42 微柱法分离糖化血红蛋白 98
实验43 果糖胺法测定糖化血清蛋白 100
第三节 血液其他糖类及糖代谢产物的测定 101
实验44 半乳糖氧化酶法测定半乳糖 101
实验45 比色法测定全血乳酸 103
实验46 乳酸脱氢酶法测定全血乳酸 105
实验47 分光光度法测定全血丙酮酸 106
实验48 乙酰丙酮显色法测定血清甘油三酯 109
第一节 血清甘油三酯的测定 109
第九章 血清(浆)脂类及脂蛋白测定 109
实验49 磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯 111
第二节 血清胆固醇的测定 113
实验50 胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇 113
第三节 血清(浆)脂蛋白的测定 114
实验51 磷钨酸-镁沉淀法测定高密度脂蛋白-胆固醇 114
附:过氧化物酶清除法测定高密度脂蛋白-胆固醇 116
实验52 聚乙烯硫酸盐沉淀法测定血清(浆)低密度脂蛋白-胆固醇 118
附:表面活性剂清除法测定血清(浆)低密度脂蛋白-胆固醇 120
实验53 免疫透射比浊法测定脂蛋白(a) 122
附:酶联免疫吸附法测定脂蛋白(a) 123
实验54 免疫透射比浊法测定血清载脂蛋白A Ⅰ和载脂蛋白B 125
第四节 血清载脂蛋白的测定 125
第十章 血清无机离子及微量元素测定 127
第一节 钾、钠离子测定 127
实验55 火焰发射光谱法测定血清钾、钠离子 127
实验56 离子选择性电极电位法测定血清钾、钠离子 130
第二节 血清钙测定 133
实验57 偶氮胂Ⅲ比色法测定血清总钙 133
实验58 甲基百里香酚蓝法测定血清总钙 134
实验59 离子选择性电极电位法测定钙离子 135
第三节 血清磷测定 137
实验60 还原钼蓝法测定血清磷 138
实验61 黄嘌呤氧化酶法测定血清磷 138
实验62 甲基麝香草酚蓝法测定血清镁 140
第四节 血清镁测定 140
实验63 钙镁试剂比色法测定血清镁 142
第五节 氯化物的测定 143
实验64 硫氰酸汞比色法测定血清氯 143
实验65 离子选择性电极法测定血清氯 146
第六节 微量元素的测定 146
实验66 双环己酮草酰二腙比色法测定血清铜 147
附:原子吸收分光光度法测定血清铜 149
实验67 吡啶偶氮酚比色法测定血清锌 150
实验68 亚铁嗪比色法测定血清铁和总铁结合力 151
实验69 血气分析 155
第十一章 血气分析 155
实验70 酶法测定血浆二氧化碳 161
第十二章 激素及激素代谢产物的测定 164
实验71 酶联免疫吸附法测定人绒毛膜促性腺激素 164
实验72 酶标免疫荧光法测定血清皮质醇 165
实验73 时间分辨免疫法测定血浆雌二醇 168
实验74 尿17-酮类固醇测定 169
实验75 尿17-羟皮质类固醇测定 172
实验76 柱层析荧光法测定尿液儿茶酚胺 173
实验77 尿香草扁桃酸测定 176
实验78 放射免疫法测定血浆醛固酮 178
第一节 血清尿素的测定 181
实验79 二乙酰一肟法测定血清尿素 181
第十三章 非蛋白含氮化合物及总胆汁酸测定 181
实验80 脲酶-波氏比色法测定血清尿素 183
实验81 酶偶联速率法测定血清尿素 184
第二节 血清肌酐测定 185
实验82 去蛋白碱性苦味酸法测定血清肌酐 186
实验83 不去蛋白速率法测定血清肌酐 187
实验84 内生肌酐清除率测定 188
第三节 血清尿酸测定 190
实验85 磷钨酸还原法测定血清尿酸 190
实验86 尿酸酶-过氧化物酶偶联法测定血清尿酸 192
第四节 血氨测定 193
实验87 酶法测定血浆氨 193
实验88 干化学法测定血浆氨 195
第五节 血清总胆红素和结合胆红素测定 196
实验89 改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素 196
实验90 胆红素氧化酶法测定总胆红素和结合胆红素 199
附1:二甲亚砜法测定总胆红素 201
附2:钒酸氧化法测定总胆红素和结合胆红素 202
第六节 总胆汁酸测定 203
实验91 酶比色法测定总胆汁酸 203
附:酶循环法测定血清总胆汁酸 206
第十四章 常用酶类测定 208
第一节 氧化还原酶类 208
实验92 连续监测法测定乳酸脱氢酶总活性(L-P反应法) 208
实验93 比色法测定乳酸脱氢酶总活性 210
实验94 琼脂糖电泳法测定乳酸脱氢酶同工酶 211
实验95 连续监测法测定葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 214
实验96 邻联大茴香胺比色法测定血清铜蓝蛋白 216
实验97 苄醛偶氮奈酚法测定血清单胺氧化酶 218
实验98 邻苯三酚自氧化抑制法测定超氧化物歧化酶 219
第二节 转移酶类测定 222
实验99 赖氏法测定血清丙氨酸氨基转移酶 222
附:赖氏法测定血清门冬氨酸氨基转移酶 225
实验100 连续监测法测定血清丙氨酸氨基转移酶 227
附:连续监测法测定血清门冬氨酸氨基转移酶 229
实验101 连续监测法测定血清γ-谷氨酰基转移酶 230
实验102 肌酸显色法测定血清肌酸激酶 232
实验103 连续监测法测定血清肌酸激酶 234
实验104 琼脂糖凝胶电泳法测定血清肌酸激酶同工酶 236
第三节 水解酶类的测定 239
实验105 磷酸苯二钠比色法测定血清碱性磷酸酶 239
实验106 磷酸麝香草酚酞比色法测定酸性磷酸酶 241
实验107 羟胺三氯化铁比色法测定血清胆碱酯酶 243
实验108 碘-淀粉比色法测定血清淀粉酶 245
实验109 连续监测法测定淀粉酶 247
实验110 血清脂肪酶的测定 248
第十五章 常用治疗性药物监测 250
实验111 双波长紫外分光光度法测定血清茶碱及药代动力学参数计算 250
实验112 化学发光酶免疫法测定地高辛 253
实验113 高效液相色谱法测定血清苯妥英 255
实验114 高效液相色谱法测定全血环孢素A 257
实验115 荧光偏振免疫法测定全血环孢素A 259
实验116 改良扩散法测定血液乙醇的含量 261
附:REA法测定乙醇含量 263
第十六章 肿瘤标志物的测定 266
实验117 放射免疫(双抗体)法测定甲胎蛋白 266
附:免疫电泳自显影法测定甲胎蛋白异质体 268
实验118 ELISA法测定癌胚抗原(CEA) 269
附:放射免疫法测定癌胚抗原 271
实验119 放射免疫分析法测定CA19-9 273
实验120 化学发光法测定抗前列腺特异性抗原(抗PAS) 275
附:时间分辨荧光免疫分析法检测PSA-α1抗胰凝乳蛋白酶 277
实验121 放射免疫分析法测定血清铁蛋白 278
实验122 β2-微球蛋白的测定 280
第十七章 神经递质与其他生物活性物质的测定 282
实验123 放射免疫法测定β-内啡肽 282
实验124 放射免疫法测定血浆P物质 285
实验125 反相高效液相色谱法测定血清γ-氨基丁酸 288
实验126 重氮化反应法测定血清一氧化氮测定 290
参考文献 294
附录一 临床化学实验室基础 296
第一节 常用玻璃器皿及量器的使用 296
第二节 试剂及试剂的配制 300
第三节 pH和缓冲液 304
附录二 常用生化检验英文缩写术语 311
中英文索引 318