第一部分 分子生物学检验技术实验室 1
一、分子生物学检验技术实验须知 1
二、分子生物学检验技术实验室介绍 3
三、分子生物学检验技术常用仪器介绍 5
四、分子生物学实验室生物安全 7
第二部分 核酸的分离与纯化 9
实验1 真核基因组DNA的分离与纯化 9
实验2 真核细胞mRNA的分离与纯化 16
实验3 质粒DNA的提取 23
实验4 核酸的鉴定 29
第三部分 核酸扩增技术 36
实验5 聚合酶链反应 36
实验6 PCR-RFLP检测线粒体DNA A3243G异质性突变 41
实验7 等位基因特异性扩增法检测结核分枝杆菌rpoB基因突变 44
实验8 TRAP－银染法检测端粒酶活性 47
实验9 多重PCR检测α－地中海贫血基因缺失 50
实验10 PCR-SSCP检测苯丙酮尿症苯丙氨酸羟化酶基因外显子7突变 53
实验11 实时荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒（HBV）核酸 57
实验12 逆转录－聚合酶链反应检测甘油醛－3－磷酸脱氢酶mRNA 60
第四部分 核酸分子杂交技术 65
实验13 探针的制备 65
实验14 DNA分子杂交 73
实验15 RNA分子杂交 77
实验16 荧光原位杂交 81
实验17 反向斑点杂交法检测β－地中海贫血 87
第五部分 分子克隆技术 94
实验18 DNA的限制性内切酶酶切反应 94
实验19 目的片段的连接 97
实验20 感受态细胞的制备及重组子转化 100
实验21 重组子的鉴定 104
第六部分 其他分子检验技术 112
实验22 真核细胞基因转染技术 112
实验23 Western印迹 120
实验24 双向聚丙烯酰胺凝胶电泳 124
实验25 HLA基因分型 129
实验26 乙型肝炎病毒基因分型（芯片法） 133
实验27 PCR－荧光探针法检测CYP2C19基因多态性 135
第七部分 创新性实验、设计性实验及综合性实验 139
实验28 采用导流杂交基因芯片技术进行人乳头瘤病毒基因分型 139
实验29 采用多重连接依赖探针扩增技术检测抗肌萎缩蛋白基因突变 141
实验30 人肝癌相关microRNA-21的定量检测 143
实验31 荧光素酶报告基因的制备 146
实验32 基因重组 146
附录 分子生物学检验技术实验中常用试剂和缓冲液的配制 149