第一部分 基础性实验 2
实验1 质粒的分离——碱裂解法 2
实验2 Silica硅石粉法纯化质粒 4
实验3 吸附膜方法提取质粒DNA 6
实验4 核酸琼脂糖凝胶电泳及“玻璃奶”法纯化回收DNA片段 7
实验5 吸附膜方法回收琼脂糖凝胶中DNA片段 9
实验6 DNA片段的连接(向质粒载体中插入外源DNA) 11
实验7 大肠杆菌感受态细胞的制备、转化及转化子的鉴定(蓝白斑筛选法) 12
实验8 聚合酶链式反应(PCR)技术 15
实验9 PCR产物连入T载体 16
实验10 菌落PCR方法快速筛选细菌重组子 18
实验11 重组子的插入方向鉴定(酶切法) 20
实验12 噬菌体铺板 21
实验13 M13噬菌体DNA的提取 24
实验14 SDS法小量提取植物基因组DNA 26
实验15 CTAB法小量提取植物基因组DNA 27
实验16 动物组织细胞基因组DNA提取 29
实验17 血液基因组DNA的纯化分离 30
实验18 Trizol试剂快速提取(动)植物总RNA 32
实验19 离心柱型方法纯化植物组织总RNA 33
实验20 植物启动子表达分析——β-葡萄糖醛酸糖苷酶(GUS)组织化学染色 35
第二部分 综合性实验 38
实验21 反转录PCR 38
实验22 谷胱甘肽S-转移酶融合蛋白质的表达及纯化 40
实验23 (His)6标记蛋白质的原核表达和纯化 44
实验24 Western-blotting分析 46
实验25 化学发光Western-blotting分析 50
第三部分 研究性实验 54
实验26 地高辛标记探针的Southern杂交 54
实验27 菌落原位杂交 58
实验28 转基因植物的PCR检测 59
实验29 花序浸泡法转化拟南芥及转化子的筛选 62
实验30 叶盘法转化烟草 64
实验31 PCR引物的电子设计 66
主要参考文献 72