《细胞生物学实验》PDF下载

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  • 作  者:李芬,胡海燕主编
  • 出 版 社:北京:科学出版社
  • 出版年份:2015
  • ISBN:9787030432254
  • 页数:215 页
图书介绍:本书从基础、综合和设计性实验三个层面设置实验37个。既涵盖部分经典细胞生物学实验,又增添一些现代细胞核分子生物学新技术,内容包括官学及电子显微镜技术、细胞形态结构、细胞化学及组分分离、细胞分裂与PCC、原代、传代细胞培养、细胞融合及转染、FISH、免疫印迹、酵母双杂、细胞同步化及凋亡的诱导与检测等。附录部分附有常用试剂的配制、器械清洗方法、常用参数换算等,以备查阅。

第一部分 基础性实验 1

实验1 普通光学显微镜的构造及使用 1

实验2 特殊光学显微镜的构造及使用 7

Ⅰ 暗视野显微镜 7

Ⅱ 相差显微镜 11

Ⅲ 荧光显微镜 14

Ⅳ 激光扫描共聚焦显微镜 18

实验3 石蜡切片法制备光学显微镜标本 23

实验4 冰冻切片法制备光学显微标本 31

实验5 透射电子显微镜及样品制备 35

实验6 扫描电子显微镜及样品制备 41

实验7 细胞形态观察、大小测量及死细胞和活细胞鉴定 45

实验8 液泡系的超活染色与动态观察 49

实验9 线粒体超活染色技术与数目统计 54

实验10 细胞骨架观察 59

Ⅰ 微丝观察 59

Ⅱ 微管观察 62

实验11 碱性磷酸酶和酸性磷酸酶染色技术 65

实验12 核仁组成区银染色技术(Ag-NOR染色法) 69

实验13 多糖的细胞化学显示法——PAS反应 73

实验14 DNA的细胞化学显示法——Feulgen反应 79

实验15 RNA的细胞化学显示法——Brachet反应 82

实验16 细胞器的分离与鉴定 85

实验17 基因组DNA的提取与检测 89

Ⅰ 动物细胞基因组DNA提取 89

Ⅱ 植物细胞基因组DNA提取 91

Ⅲ 基因组DNA的琼脂糖凝胶电泳 94

实验18 真核细胞总RNA提取与检测 97

Ⅰ TRIzol试剂提取小鼠肝脏总RNA 98

Ⅱ 热酸性酚法提取酵母总RNA 98

实验19 细胞无丝分裂和有丝分裂的形态观察 101

实验20 细胞减数分裂的形态观察 105

实验21 超前凝集染色体标本的制备与观察 110

实验22 细胞的原代培养 113

实验23 细胞的传代培养 116

实验24 细胞的冻存与复苏 119

实验25 细胞融合实验 122

实验26 流式细胞仪测定细胞DNA含量 127

第二部分 综合性实验 133

实验27 冠状动脉平滑肌细胞的分离、培养、鉴定与生长曲线绘制 133

实验28 荧光原位杂交确定特定核酸序列的定位 138

实验29 磷酸钙沉淀法将DNA导入细胞 142

实验30 RT-PCR检测大鼠肝再生中肌动蛋白基因的表达 145

实验31 Western blot检测HeLa细胞Hsp70表达 151

实验32 重组EGFP在小鼠肝脏中瞬时表达的观察(液压转基因法) 156

实验33 蛋白质与蛋白质相互作用检测——酵母双杂交筛选 160

第三部分 设计性实验 166

实验34 不同类群细胞大小和结构的比较 166

实验35 植物细胞中叶绿体的原位观察 170

实验36 不同方法制备同步化细胞的效果比较 173

实验37 细胞凋亡的诱导和检测 176

参考文献 181

附录 185

附录一 离心机转数与离心力的换算表 185

附录二 常用溶液的配制和使用 187

附录三 生物标本常用染料性能简介和常用染色剂配方 203

附录四 常用玻璃、塑料仪器的清洗和干燥 208

附录五 试剂规格 212

附录六 常用单位 214