第一章 生物化学技术实训操守与基本技能 1
第一节 生物化学技术实训操守 1
一、生物化学技术实训工作“六环节”的训练操守 1
二、生物化学技术实训室规则和安全常识 6
第二节 生物化学技术基本技能 6
一、常用玻璃仪器的洗涤 6
二、常用清洗液的清洗原理与配制 7
三、特殊清洗液的清洗原理与使用浓度 8
四、吸量管的种类和使用 9
五、取液器的种类和使用 11
六、溶液的混匀 13
七、过滤 15
八、低速台式离心机的使用 15
复习思考题 16
第二章 膜分离技术 18
第一节 膜分离基本技术 18
一、透析 21
二、超滤 22
三、微滤 23
四、电渗析 23
五、反渗透 24
六、纳米过滤 25
复习思考题 26
第二节 实训项目 26
实训2-1 蛋白质的透析脱盐与超滤浓缩、脱盐 26
实训2-2 超滤技术分离香菇多糖 34
第三章 层析分离技术 39
第一节 层析分离基本技术 39
一、分离原理 40
二、层析技术的分类 40
三、吸附层析 41
四、分配层析 43
五、凝胶层析 43
六、离子交换层析 46
七、亲和层析 47
八、高效液相层析 49
复习思考题 52
第二节 实训项目 53
实训3-1 纸层析法分离鉴定氨基酸 53
实训3-2 糖的薄层层析 58
实训3-3 茶多酚的聚酰胺薄膜层析法 63
实训3-4 蛋白质溶液的凝胶过滤脱盐 68
实训3-5 离子交换层析法分离氨基酸混合液 75
实训3-6 胰蛋白酶的亲和层析分离纯化 80
第四章 生物化学中常用的化学检测技术 86
第一节 生物化学中的化学检测基本技术 86
一、重量法 87
二、化学法 88
复习思考题 91
第二节 实训项目 92
实训4-1 总氮量测定法测定蛋白质的含量——改良微量凯氏定氮法 92
实训4-2 总氮量测定法测定蛋白质的含量——半自动凯氏定氮法 99
实训4-3 抗坏血酸（维生素C）含量的测定 104
实训4-4 还原糖和总糖的测定 108
第五章 电泳分离技术 113
第一节 电泳分离基本技术 113
一、电泳的基本原理 114
二、区带电泳 115
三、几种电泳新技术 118
复习思考题 122
第二节 实训项目 122
实训5-1 蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳 122
实训5-2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质相对分子质量 130
实训5-3 聚丙烯酰胺等电聚焦电泳测定蛋白质的等电点 137
实训5-4 DNA琼脂糖凝胶电泳 141
实训5-5 DNA的膜转移电泳（Southern印迹转移法） 147
实训5-6 蛋白质的膜转移电泳（免疫印迹转移法） 153
第六章 分光光度检测技术 161
第一节 分光光度检测基本技术 161
一、各种分光光度技术简介 161
二、待测物质的定性分析 163
三、待测物质的定量分析 164
四、分光光度计的结构原理 166
五、分光光度检测技术的实际应用 168
复习思考题 171
第二节 实训项目 171
实训6-1 福林-酚试剂法测定蛋白质含量 171
实训6-2 紫外吸收法测定蛋白质含量 177
实训6-3 Bradford法测定蛋白质含量 181
实训6-4 淀粉酶活性的测定 185
第七章 生物大分子提取与离心、沉淀技术 191
第一节 生物大分子提取与分离技术 191
一、细胞破碎技术 192
二、生物大分子提取技术 196
三、离心分离技术 198
四、沉淀分离技术 203
复习思考题 208
第二节 实训项目 209
实训7-1 大肠杆菌细胞的超声波细胞破碎 209
实训7-2 大蒜中SOD的分离提取与测活 211
实训7-3 DNA的提取 217
实训7-4 RNA的提取 222
附录 227
附录一 实验用水的制备 227
附录二 常用化学试剂的规格、保存、配制及取用 232
附录三 缓冲溶液的配制方法与使用和保存 235
附录四 常用的离子交换剂 245
附录五 常用的凝胶过滤介质 249
附录六 常用的亲和层析基质 250
附录七 透析袋、微孔滤膜和超滤膜 257
附录八 氨基酸及蛋白质的一些物理常数 259
附录九 离心机转速与相对离心力换算列线图 261
附录十 实验室常用的干燥剂 262
附录十一 实训室常用的生化设备的使用 266
参考文献 278