第一章 绪论 1
第一节 柱层析工艺在生物化工中的应用 1
一、柱层析在分离纯化工艺中具有的优点 2
二、层析工艺的种类 3
三、层析工艺的应用 4
第二节 生化分离介质应具备的特性 5
一、生化分离介质应具备的基本条件 6
二、生化分离介质的结构特点 7
第三节 生化分离介质的分类 8
一、依据母体骨架基质分类 8
二、依据层析的分离原理分类 9
参考文献 10
第二章 分离介质母体——基球的合成 11
第一节 悬浮聚合法制备珠体 11
一、悬浮聚合法 12
二、单体 12
三、交联剂 13
四、正相悬浮聚合分散剂种类 15
五、反相悬浮聚合工艺中分散剂的种类及用量 17
六、悬浮聚合工艺条件 18
第二节 多孔珠体的制备 19
一、多孔珠体的概念 20
二、孔结构的表征 20
三、聚合过程中的孔结构 23
四、高比表面积珠体的合成方法 25
五、大孔珠体的应用 26
第三节 膜乳化-悬浮聚合法制备单分散聚合物微球 27
一、膜乳化原理、装置与微球的粒度分布 27
二、膜结构对分散液滴的影响 29
三、连续相与分散相的影响 30
四、操作条件的影响 31
五、乳化过程中新乳化粒子形成的原因及解决办法 32
第四节 微球的其他制备方法 33
一、分散聚合法 34
二、种子溶胀聚合法 37
三、蒸馏-沉淀聚合法 39
参考文献 40
第三章 凝胶过滤层析介质 44
第一节 凝胶过滤层析概述 44
一、凝胶过滤层析的优点 44
二、凝胶过滤层析的基本原理 44
三、凝胶过滤层析介质的特征参数 45
四、凝胶过滤层析工艺的常用参数 45
第二节 凝胶过滤层析介质的制备 47
一、凝胶过滤层析介质应具备的条件 48
二、凝胶过滤层析介质的骨架分类 48
三、多糖类凝胶过滤层析介质的合成 49
四、合成高聚物珠体的制备 53
第三节 凝胶过滤层析介质的主要商品牌号 55
一、葡聚糖系列 56
二、琼脂糖系列 58
三、SuperdexTM系列 60
四、聚丙烯酰胺系列 61
五、SephacrylTM系列 61
六、聚乙烯醇系列 62
七、Bio-Beads S-X系列 63
八、丙烯酸酯系列 63
第四节 凝胶过滤层析的应用 63
一、凝胶过滤层析的分离方式 63
二、凝胶过滤层析介质的选择 64
三、凝胶过滤层析柱的选择 66
四、凝胶过滤层析操作中应注意的事项 66
五、凝胶过滤层析的应用实例 68
参考文献 72
第四章 离子交换层析介质 74
第一节 离子交换层析概述 74
一、离子交换层析法 74
二、离子交换层析介质的结构、分类及命名 74
三、离子交换基本原理 76
四、生物大分子的带电性 77
五、生化用离子交换剂的特点 77
六、离子交换层析的操作方式 79
七、离子交换层析中常用的几个参数 80
第二节 高聚物骨架离子交换层析介质的制备 80
一、离子交换剂功能基团的种类 80
二、苯乙烯系列离子交换树脂的制备 82
三、生化专用苯乙烯系列离子交换剂的制备 86
四、丙烯酸（酯）系列离子交换树脂的制备 88
五、丙烯腈系列离子交换树脂的制备 92
六、聚乙烯醇系列离子交换树脂的制备 93
七、缩聚型离子交换树脂的制备 93
八、螯合树脂的制备 95
第三节 多糖骨架离子交换层析介质的合成及牌号 99
一、多糖系列离子交换剂的合成路线 99
二、多糖系列离子交换剂的制备 100
三、纤维素类离子交换剂的主要牌号 105
四、葡聚糖系列离子交换层析介质的主要牌号 106
五、琼脂糖系列离子交换层析介质的主要牌号 107
第四节 离子交换层析的应用 110
一、离子交换剂的选择 110
二、离子交换层析操作中应注意的问题 111
三、离子交换层析应用实例 115
参考文献 124
第五章 疏水层析介质 129
第一节 疏水层析概述 129
一、疏水作用原理 129
二、疏水层析的优点 131
三、疏水层析与反相层析的区别 132
第二节 疏水层析分离工艺的影响因素 133
一、分离介质结构对疏水层析的影响 134
二、流动相盐溶液对蛋白分离的影响 135
三、pH值对疏水层析的影响 136
四、温度对疏水层析的影响 137
五、添加剂对疏水层析的影响 137
六、蛋白质的疏水性对疏水层析的影响 137
第三节 疏水层析分离介质的制备 138
一、疏水层析分离介质的基本结构 138
二、多孔硅胶疏水层析分离介质的制备 139
三、溴化氰活化合成多糖类疏水层析分离介质 140
四、环氧活化中间体制备多糖类疏水层析分离介质 143
五、直接偶联法制备多糖类疏水层析分离介质 148
六、以合成高聚物骨架为母体制备疏水层析分离介质 150
七、以壳聚糖为母体合成疏水层析分离介质 151
八、配基密度的测定 151
九、常用疏水层析分离介质的商品牌号 152
第四节 疏水层析分离介质的应用 153
一、疏水层析分离介质的稳定性 154
二、疏水层析分离介质的选择 155
三、疏水层析操作中应注意的事项 156
四、疏水层析的应用实例 158
参考文献 160
第六章 亲和层析介质 163
第一节 亲和层析概述 163
一、亲和层析发展历史 163
二、亲和层析的原理 164
三、亲和层析介质的组成 165
第二节 亲和层析介质的制备 171
一、溴化氰活化及偶联法 171
二、环氧活化及偶联法 173
三、高碘酸盐活化及偶联法 176
四、N-羟基琥珀酰亚胺活化及偶联法 177
五、三嗪活化及偶联法 177
六、甲苯磺酰氯活化及偶联法 177
七、丁二烯砜活化及偶联法 178
八、苯醌活化及偶联法 178
九、其他的活化及偶联法 178
十、亲和层析介质的商品牌号 179
第三节 亲和层析的类型 183
一、生物亲和层析 183
二、免疫亲和层析 185
三、固定化金属亲和层析 186
四、拟生物亲和层析 195
参考文献 199
第七章 吸附树脂 204
第一节 吸附树脂概述 204
一、吸附树脂结构特征 204
二、吸附树脂的分类 205
三、影响吸附树脂性能的因素 206
四、吸附树脂的吸附机理 207
五、吸附树脂的吸附方程 209
六、吸附树脂的特点 209
第二节 吸附树脂的外观、形态结构及孔结构参数的测定 210
一、吸附树脂的外观及形态结构 210
二、吸附树脂孔结构参数的测定 211
三、吸附树脂孔结构测定应注意的问题 213
第三节 吸附树脂的制备 215
一、影响吸附树脂孔结构的因素 216
二、通用型吸附树脂的制备 220
三、超高比表面积吸附树脂的合成 222
四、极性吸附树脂的制备 230
五、缩聚型吸附树脂的制备 235
六、碳化树脂的制备 235
七、吸附树脂的商品牌号 237
第四节 吸附树脂的应用 241
一、吸附树脂使用前的预处理 241
二、吸附树脂的安全性及纯度 242
三、吸附树脂应用中的影响因素 245
四、吸附树脂使用中的污染及复苏 248
五、吸附树脂的应用实例 248
参考文献 252
第八章 柱层析新工艺及新介质 255
第一节 扩张床吸附技术 255
一、扩张床吸附技术简介 255
二、扩张床的特性 256
三、扩张床的操作 257
四、膨胀吸附柱的基本性能 257
五、扩张床吸附剂 258
六、扩张床吸附技术应用 264
第二节 分子印迹技术 264
一、分子印迹聚合物的特点 265
二、影响分子印迹聚合物性能的因素 265
三、分子印迹聚合物的制备 267
四、分子印迹聚合物的应用 268
第三节 灌注色谱技术 268
一、灌注色谱及其介质的特点 268
二、灌注色谱原理 270
三、灌注色谱介质的种类 271
四、灌注色谱介质的制备 273
五、灌注色谱的应用 275
第四节 柱层析法进行蛋白质折叠复性 276
一、柱层析法进行蛋白质复性的优点 277
二、柱层析法进行变性蛋白质复性过程中应关注的问题 278
三、不同柱层析法进行蛋白质复性举例 280
参考文献 286