第1章 绪论 1
1.1堇菜属植物化学成分与药理活性研究概况 1
1.1.1堇菜属植物化学成分 2
1.1.2堇菜属植物药理活性 5
1.2天山堇菜化学成分与药理活性研究概况 7
1.2.1天山堇菜的化学成分研究概况 7
1.2.2天山董菜药理活性研究概况 7
1.3细胞凋亡在抗肿瘤中的应用 8
1.3.1细胞凋亡的生物学意义 9
1.3.2细胞凋亡的形态学和生化特征 9
1.3.3细胞凋亡的途径 11
1.4本课题研究背景与内容 14
1.4.1研究背景 14
1.4.2研究内容 15
1.5参考文献 17
第2章 天山堇菜挥发油的化学成分研究 30
2.1实验材料、仪器和试剂 31
2.1.1实验材料 31
2.1.2试剂与仪器 31
2.2挥发油提取方法 31
2.2.1水蒸气蒸馏法(Steam Distillation, SD) 31
2.2.2天山董菜乙酸乙酯萃取物的提取 32
2.2.3挥发油得率的计算 32
2.3蒸馏时间对提取率的影响 33
2.4挥发油的FT—IR分析 33
2.4.1 FT—IR分析条件 33
2.4.2分析结果 34
2.4.3结构鉴定 35
2.5挥发油的GC— MS分析 36
2.5.1 GC—MS分析条件 36
2.5.2成分分析 37
2.6讨论 38
2.7参考文献 39
第3章 天山堇菜挥发油的药理活性研究 42
3.1抗菌实验研究 42
3.1.1实验材料 42
3.1.2试剂与仪器 42
3.1.3实验方法 43
3.1.4实验结果 44
3.2抗氧化实验研究 45
3.2.1实验材料 45
3.2.2试剂与仪器 46
3.2.3实验方法 46
3.2.4实验结果 47
3.3抗炎实验研究 48
3.3.1实验材料 48
3.3.2试剂与仪器 48
3.3.3实验方法 48
3.3.4实验结果 49
3.3.5讨论 49
3.4参考文献 51
第4章 天山堇菜提取物的药理活性和成分分析 54
4.1抗菌实验研究 54
4.1.1实验材料 54
4.1.2试剂与仪器 54
4.1.3实验方法 55
4.1.4实验结果 57
4.2抗氧化实验研究 58
4.2.1实验材料 59
4.2.2试剂与仪器 59
4.2.3实验方法 59
4.2.4实验结果 60
4.3抗炎实验研究 60
4.3.1实验材料 61
4.3.2试剂与仪器 61
4.3.3实验方法 62
4.3.4实验结果 62
4.4抗肿瘤实验研究 63
4.4.1实验材料 63
4.4.2试剂与仪器 63
4.4.3实验方法 64
4.4.4实验结果 66
4.5化学成分研究 67
4.5.1系统定性分析 67
4.5.2天山董菜75%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位HPLC图谱 71
4.5.3天山堇菜75%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位的分离 73
4.6讨论 102
4.6.1抑菌作用 102
4.6.2抗氧化作用 102
4.6.3抗炎作用 102
4.6.4抑制肿瘤细胞 102
4.6.5活性部位及成分 103
4.6.6 HPLC图谱 103
4.6.7组分 103
4.7紫外谱线的使用实例 103
4.7.1紫外谱线组法鉴别柴胡和醋柴胡 103
4.7.2紫外谱线组法鉴别乌梅饮片及其伪品 105
4.8高效液相色谱法应用实例 107
4.8.1制备方法 107
4.8.2方法学研究 107
4.8.3分析讨论 108
4.9参考文献 108
第5章 天山堇菜七叶内酯的含量测定及抗肿瘤机制研究 112
5.1天山堇菜中七叶内酯的含量测定 113
5.1.1试剂与仪器 113
5.1.2色谱条件 114
5.1.3七叶内酯含量测定 115
5.1.4实验结果 118
5.1.5 HPLC测乌梅炭品中有机酸的含量 118
5.2七叶内酯抗肿瘤实验研究 120
5.2.1药品 120
5.2.2细胞系 120
5.2.3细胞培养材料 120
5.2.4试剂 120
5.2.5抗体 121
5.2.6 SDS—PAGE电泳材料 121
5.2.7转移与印迹材料 122
5.2.8实验仪器 122
5.2.9实验方法 122
5.2.10实验结果 128
5.3讨论 135
5.3.1七叶内酯 135
5.3.2七叶内酯的作用 135
5.4参考文献 136
第6章 总结与讨论 149
6.1天山堇菜挥发油的提取和成分分析 151
6.2天山堇菜挥发油的药理活性研究 152
6.3天山堇菜乙醇提取物的药理活性和成分分析 152
6.4天山堇菜七叶内酯含量测定及抗肿瘤机制研究 153
6.5问题与前景 155
附录1:攻读博士学位期间发表的论文情况 157
附录2:部分国内外发表的论文 158
致谢 228