第一部分 显微镜的使用 3
实验1 普通光学显微镜的基本使用方法 3
附录:石蜡切片、冷冻切片和苏木精-伊红染色法 9
实验2 相差、干涉差、暗视野显微镜的基本使用方法 13
实验3 荧光显微镜的基本使用方法 19
附录:激光扫描共聚焦显微镜的基本原理和应用简介 26
实验4 电子显微镜负染色技术 29
附录:电子显微镜超薄切片技术 33
第二部分 基本实验技术 41
实验5 细胞化学 41
Ⅰ.福尔根染色 41
Ⅱ.酸性磷酸酶的检测 45
Ⅲ.碱性磷酸酶的检测 48
实验6 免疫标记与核酸原位杂交 53
Ⅰ.免疫酶标法检测细胞骨架蛋白 54
Ⅱ.免疫荧光标记法检测细胞中的微管蛋白 56
Ⅲ.核酸原位杂交实验 59
实验7 细胞器的分离、纯化和鉴定 65
Ⅰ.差速离心法分离线粒体 65
Ⅱ.密度梯度离心法分离叶绿体 69
Ⅲ.细胞核的制备 71
实验8 细胞融合:植物原生质体制备与融合 75
实验9 动物细胞培养 79
附录1:培养细胞的冻存与复苏 83
附录2:无菌操作技术要领 84
实验10 细胞转染 86
实验11 细胞分选与分析——流式细胞仪的使用 90
第三部分 细胞的结构、功能与生命活动 99
实验12 细胞质膜及其特化结构 99
Ⅰ.细胞质膜的通透性与水孔蛋白通透效应的观察 99
Ⅱ.四膜虫纤毛的再生 102
Ⅲ.小鼠腹腔巨噬细胞吞噬作用的观察 105
Ⅳ.植物细胞胞吞作用及内膜系统动态变化的荧光显微镜观察 108
实验13 细胞骨架 112
Ⅰ.免疫荧光标记法观察细胞中微管的分布 112
Ⅱ.鬼笔环肽标记法观察细胞中微丝的分布 115
Ⅲ.黑藻细胞的胞质环流 118
Ⅳ.细胞骨架的立体镜观察 122
实验14 细胞周期 126
Ⅰ.小鼠M期染色体的制备与观察 126
Ⅱ.S期细胞的检测 130
Ⅲ.线虫胚胎细胞有丝分裂的观察 132
实验15 细胞分化 138
Ⅰ.植物细胞的脱分化与再分化 138
Ⅱ.血细胞的分化和不同类型血细胞的观察 141
实验16 细胞凋亡与细胞衰老 146
Ⅰ.细胞凋亡的诱导与检测 146
Ⅱ.植物细胞程序性死亡的诱导与形态观察 150
Ⅲ.秀丽隐杆线虫生殖细胞的细胞凋亡检测 152
Ⅳ.细胞衰老的诱导及β-半乳糖苷酶的检测 156
实验17 细胞信号转导 160
Ⅰ.G蛋白耦联受体信号通路与心肌细胞的收缩 160
Ⅱ.TGF-β对斑马鱼胚胎发育的影响 165
附录 实验材料及其培养 169
一、四膜虫 169
二、黑藻 170
三、斑马鱼 171
四、秀丽隐杆线虫 173
五、小鼠 175
六、拟南芥 177