第一篇 基本实验操作及常用仪器使用 1
第1章 生物化学常用研究技术 1
第2章 分子生物学常用研究技术 18
第3章 基本实验操作 23
第4章 常用仪器使用 34
第5章 实验室规则及安全防护 46
第6章 如何撰写实验报告 48
第二篇 经典验证性实验 49
第1章 蛋白质定量实验 49
实验一 双缩脲法测定血清蛋白质含量 50
实验二 Folin-酚试剂法测定蛋白质含量 52
实验三 紫外分光光度法测定蛋白质含量 54
实验四 考马斯亮蓝结合法测定蛋白质含量 57
实验五 BCA法测定蛋白质含量 59
第2章 层析实验 61
实验六 纸层析法观察转氨基作用 61
实验七 葡聚糖凝胶柱层析分离血红蛋白与鱼精蛋白 63
实验八 离子交换层析分离混合氨基酸 66
实验九 薄层层析分离鉴定氨基酸 68
第3章 电泳实验 72
实验十 血清醋酸纤维薄膜电泳 72
实验十一 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清LDH同工酶 76
实验十二 SDS-PAGE测定蛋白质的分子量 81
第4章 酶学实验 86
实验十三 血清碱性磷酸酶活性测定 86
实验十四 血清丙氨酸氨基转移酶活性测定 89
实验十五 影响胰蛋白酶作用的因素 92
实验十六 丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用 95
实验十七 酶的非竞争性抑制作用 98
实验十八 酶米氏常数的测定 100
第5章 糖类与脂类 103
实验十九 血糖浓度的测定 103
实验二十 肾上腺素对血糖浓度的影响 106
实验二十一 血清甘油三酯浓度测定 108
实验二十二 血清总胆固醇浓度测定 112
实验二十三 血清载脂蛋白apo A1的测定 117
第6章 核酸分离纯化技术 120
实验二十四 基因组DNA的提取制备与检测 120
实验二十五 全血基因组DNA的试剂盒法提取制备与检测 124
实验二十六 总RNA的提取制备与检测 124
实验二十七 质粒DNA的提取制备与检测 131
实验二十八 动物组织核酸的提取及成分鉴定 137
第7章 PCR技术 140
实验二十九 常规PCR技术 140
实验三十 定量PCR技术 144
第8章 分子克隆技术 148
实验三十一 DNA的限制性酶切与电泳检测 148
实验三十二 凝胶中DNA片断的纯化回收 151
实验三十三 DNA连接实验 153
实验三十四 感受态细胞的制备 157
实验三十五 重组DNA转化与蓝白斑筛选 159
第9章 分子杂交技术 162
实验三十六 Southern印迹杂交 162
实验三十七 Northern印迹杂交 166
实验三十八 Western印迹 169
实验三十九 核酸原位杂交 172
附 核酸分子探针的标记 177
第三篇 综合性实验 180
实验一 血清γ球蛋白的分离纯化与鉴定 180
实验二 碱性磷酸酶的分离纯化与动力学研究 186
实验三 β肌动蛋白基因的克隆 193
实验四 hCS在大肠埃希菌中的表达、纯化与鉴定 200
实验五 hCS基因在毕赤酵母中的表达及鉴定 206
实验六 荧光原位杂交实验 210
实验七 双脱氧链末端合成终止法测定DNA序列 213
实验八 肽或蛋白质N-端氨基酸序列测定 219
实验九 用双荧光素酶报告基因检测启动子活性 228
实验十 电泳迁移阻滞实验 232
实验十一 染色质免疫沉淀 237
实验十二 蛋白质双向电泳 242
实验十三 酵母双杂交实验 247
实验十四 RNA干扰实验 250
第四篇 创新性实验 255
实验一 重要蛋白质或酶的分离纯化 255
实验二 糖尿病的生化及遗传检测分析实验 255
实验三 家族性高胆固醇血症的诊断 256
实验四 血友病的分子诊断 258
实验五 RNA干扰技术靶向沉默目的基因 259