1 绪论 1
1.1 魏氏梭菌病原学及其毒素研究进展 3
1.2 苜蓿作为植物口服疫苗生物反应器的研究进展 21
1.3 研究目的和意义 36
2 抗魏氏梭菌病转基因植物研究材料与方法 38
2.1 研究材料 38
2.2 试验方法 42
3 抗魏氏梭菌病转基因植物研究结果与分析 64
3.1 目的基因的PCR扩增 64
3.2 重组植物表达载体的鉴定 66
3.3 α毒素基因转化苜蓿及其表达蛋白的鉴定 68
3.4 α毒素转基因苜蓿遗传稳定性的研究 77
3.5 A型魏氏梭菌致病性与形态变化规律 79
3.6 口服α毒素转基因苜蓿免疫学指标测定结果 82
3.7 A型魏氏梭菌攻毒感染和血清抗体中和试验结果 89
4 抗魏氏梭菌病转基因植物研究设计与讨论 94
4.1 提高转基因苜蓿有效表达外源蛋白的设计思路 94
4.2 转基因苜蓿表达魏氏梭菌α毒素蛋白的抗原性 107
4.3 表达魏氏梭菌α毒素转基因苜蓿的免疫效果分析 109
4.4 不同免疫方式对口服免疫转基因苜蓿产生保护效力的影响 112
4.5 LT-B在转基因苜蓿口服疫苗中的佐剂作用 115
4.6 魏氏梭菌形态变化与致病能力的关系 119
5结论 123
附录 126
参考文献 135
后记 155