第一章 多克隆血清的制备 1
第二章 单克隆抗体技术 7
第一节 免疫方案 7
第二节 细胞融合及杂交瘤选择培养 9
第三节 阳性杂交瘤的筛选 14
第四节 杂交瘤的克隆化和建系 15
第五节 单克隆抗体的大量生产 17
第六节 单克隆抗体的鉴定 18
第七节 影响因素及分析 19
第三章 免疫球蛋白纯化技术 21
第一节 饱和硫酸铵法纯化单克隆抗体 21
第二节 辛酸-硫酸铵法纯化单克隆抗体 23
第三节 Q Sepharose Fast Flow柱层析纯化小鼠腹腔积液IgG 1 25
第四节 Protein A/G亲和层析柱纯化单克隆抗体 27
第四章 免疫球蛋白标记技术 30
第一节 辣根过氧化物酶（HRP）标记抗体技术 30
第二节 异硫氰酸荧光素（FITC）标记抗体技术 36
第三节 藻红蛋白（PE）标记抗体技术 37
第四节 生物素标记抗体技术 40
第五章 酶联免疫吸附试验 44
第一节 酶联免疫吸附测定 44
第二节 生物素-亲合素放大的ELISA 49
第三节 荧光素-抗荧光素抗体放大的ELISA 53
第四节 化学发光免疫分析 55
第五节 磁分离酶免疫技术 60
第六章 细胞分离技术 64
第一节 Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离外周血单个核细胞 64
第二节 免疫磁珠法分离细胞 66
第七章 免疫荧光染色与显微镜观察 69
第一节 免疫荧光染色标本制备 69
第二节 荧光显微镜观察 72
第三节 激光共聚焦显微镜观察 72
第八章 流式细胞术 84
第一节 细胞膜表面分子免疫标记方法 84
第二节 细胞周期的检测分析 91
第三节 CFSE检测人外周血T细胞体外扩增 93
第四节 正常人外周血滤泡辅助性T细胞（Tfh）细胞染色技术 95
第五节 正常人外周血Treg细胞染色技术 97
第九章 免疫组织化学技术 99
第一节 亲和免疫化学技术 99
第二节 碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶免疫组化技术 101
第三节 组织芯片的免疫组化染色 101
第十章 淋巴细胞功能测定 103
第一节 淋巴细胞增殖检测 103
第二节 杀伤细胞功能测定 109
第三节 酶联免疫斑点实验 116
第四节 人白细胞抗原（HLA）的分型 118
第五节 HLA/抗原肽多聚体的制备和检测 122
第六节 趋化实验和侵袭实验 126
第七节 树突状细胞的分离、培养与功能检测 129
第十一章 人脐静脉血管内皮细胞的分离培养与功能实验 133
第一节 人脐静脉内皮细胞的分离培养 133
第二节 内皮细胞的通透性检测 135
第三节 内皮细胞迁移能力的检测 138
第四节 Matrigel成管法检测药物对内皮细胞成管能力的影响 140
第十二章 细胞因子检测 141
第一节 细胞因子的定量检测 142
第二节 细胞因子的生物学活性测定 147
第十三章 分子克隆常用技术 149
第一节 感受态的制备 149
第二节 转化 151
第三节 质粒提取 153
第四节 琼脂糖凝胶电泳 154
第五节 凝胶回收 157
第六节 重组DNA的构建 158
第十四章 蛋白原核表达和纯化技术 162
第一节 His标签融合蛋白的原核表达和亲和层析纯化 162
第二节 GST融合蛋白的原核表达和亲和层析 166
第三节 凝胶过滤层析技术 171
第四节 离子交换色谱技术 174
第十五章 免疫学中常用的PCR技术 179
第一节 逆转录PCR 179
第二节 荧光定量PCR 194
第十六章 蛋白与蛋白相互作用分析 202
第一节 免疫共沉淀 202
第二节 GST pull-down 205
第十七章 免疫印迹技术 208
第一节 蛋白样品的制备和浓度测定 208
第二节 聚丙烯酰胺凝胶电泳 211
第三节 免疫印迹 216
第十八章 常用细胞培养技术 224
第一节 细胞计数及活性测定 224
第二节 基因转染 226
第三节 慢病毒包装和细胞感染 229
第十九章 小分子RNA研究技术 233
第一节 siRNA研究技术 233
第二节 microRNA研究技术 238
第二十章 蛋白的亚细胞定位分析 247
第一节 细胞分步分离法 247
第二节 免疫荧光结合激光共聚焦显微镜分析 249
第二十一章 细胞凋亡的检测方法 254
第一节 细胞凋亡的形态学检测 254
第二节 细胞凋亡的流式细胞仪检测 255
第三节 DNA ladder检测 260
第四节 TUNEL检测 263
第五节 Caspase-3活性检测 265
第二十二章 蛋白与DNA相互作用分析 269
第一节 ChIP Assay（染色质免疫共沉淀） 269
第二节 双荧光素酶报告基因检测 275
第二十三章 动物模型的建立与常用实验方法 279
第一节 自身免疫病动物模型建立 279
第二节 转基因动物和基因敲除动物 282
第三节 常用动物实验方法 284
第二十四章 肿瘤相关的动物模型及检测 287
第一节 皮下荷瘤裸鼠模型 288
第二节 肝原位癌裸鼠模型 289
第二十五章 生物信息学 291
第一节 常用的蛋白数据库 291
第二节 常用的核酸数据库 298
第三节 microRNA研究中常用的数据库 303
附录 311