第一部分 蛋白质类药物的生产与分析技术 1
项目一 猪血清蛋白的生产与分析（血浆蛋白类药物） 3
项目一导读 3
任务一 猪血清蛋白的提取与分级盐析 7
1.1.1学习目标 7
1.1.2工作任务 7
1.1.3实践操作 8
1.1.4背景知识 9
1.1.4.1猪血清蛋白的用途 9
1.1.4.2盐析法沉淀分离制备蛋白质 10
1.1.4.3凝胶层析法脱盐和分离蛋白质 13
1.1.4.4蛋白质的理化性质在蛋白质类药物制备中的应用 16
1.1.5知识拓展 19
1.1.5.1血清蛋白的用途 19
1.1.5.2硫酸铵分级沉淀血清蛋白的一般规律 19
1.1.5.3超滤法提取血清白蛋白与免疫球蛋白 20
1.1.6第二课堂 21
任务二 猪血清蛋白分级盐析的分析 22
1.2.1学习目标 22
1.2.2工作任务 22
1.2.3实践操作 23
1.2.4背景知识 27
1.2.4.1蛋白质类药物含量测定的方法（一） 27
1.2.4.2常见国产分光光度计的使用 28
1.2.5知识拓展 31
1.2.5.1分光光度技术简介 31
1.2.5.2蛋白质类药物含量测定的方法（二） 34
1.2.6课外训练 35
1.2.7第二课堂 35
任务三 猪血清蛋白的电泳分离纯化 36
1.3.1学习目标 36
1.3.2工作任务 36
1.3.3实践操作 37
1.3.4背景知识 45
1.3.4.1电泳 45
1.3.4.2蛋白质类药物的电泳分析 47
1.3.4.3蛋白质分离提纯的一般步骤 51
1.3.4.4蛋白质制品的纯度鉴定方法 52
1.3.5知识拓展 53
1.3.5.1人血白蛋白的纯度测定 53
1.3.5.2醋酸纤维素薄膜电泳测定人血清蛋白各组分含量的临床意义 53
1.3.5.3聚丙烯酰胺不连续电泳分离蛋白质的原理 54
1.3.5.4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的相对分子质量 56
1.3.6课外训练 58
1.3.7第二课堂 58
本章小结 59
项目二 酪蛋白及其磷酸肽的生产与分析（营养增补剂与活性肽类药物） 60
项目二导读 60
任务一 酪蛋白的生产与分析 65
2.1.1学习目标 65
2.1.2工作任务 65
2.1.3实践操作 66
2.1.4背景知识 67
2.1.4.1酪蛋白的理化性质及其作用 67
2.1.4.2酪蛋白的组成 68
2.1.4.3酪蛋白水解肽的药用价值 68
2.1.5知识拓展 69
2.1.5.1酪蛋白制备的基本原理 69
2.1.5.2乳蛋白的组成 69
2.1.6第二课堂 70
任务二 利用溶解度差异分离各种酪蛋白 71
2.2.1学习目标 71
2.2.2工作任务 71
2.2.3实践操作 71
2.2.4背景知识 73
2.2.4.1尿素分级分离酪蛋白 73
2.2.4.2蛋白质混合物的分离纯化方法 74
2.2.5知识拓展 83
2.2.5.1阳离子交换色谱分离酪蛋白 83
2.2.5.2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离酪蛋白 84
2.2.6课外训练 85
2.2.7第二课堂 85
任务三 酪蛋白磷酸肽的生产与纯化 86
2.3.1学习目标 86
2.3.2工作任务 86
2.3.3实践操作 86
2.3.4背景知识 88
2.3.4.1多肽类药物 88
2.3.4.2离子交换色谱法分离蛋白质 89
2.3.4.3蛋白质三步纯化策略 94
2.3.4.4蛋白质类药物的工业化生产 94
2.3.5知识拓展 100
2.3.5.1离子交换树脂的预处理 100
2.3.5.2离子交换树脂的交换量 101
2.3.5.3离子交换色谱的梯度洗脱 101
2.3.5.4分离纯化蛋白质的其他色谱技术 102
2.3.5.5我国蛋白质类药物开发利用面临的问题 104
2.3.6课外训练 107
2.3.7第二课堂 107
任务四 酪蛋白磷酸肽的质量检定 108
2.4.1学习目标 108
2.4.2工作任务 108
2.4.3实践操作 109
2.4.4背景知识 115
2.4.4.1蛋白质类药物含量测定的方法（三） 115
2.4.4.2微生物限度检查法 120
2.4.4.3砷盐检查法 125
2.4.5知识拓展 128
2.4.5.1水分测定法 128
2.4.5.2灰分测定法 128
2.4.6课外训练 128
2.4.7第二课堂 131
本章小结 132
第二部分 核酸类药物的生产与分析技术 133
项目三 DNA与RNA等核酸的制备与分析（核酸类药物原料） 134
项目三导读 134
任务一 猪肝中DNA的制备与鉴定 138
3.1.1学习目标 138
3.1.2工作任务 138
3.1.3实践操作 139
3.1.4背景知识 141
3.1.4.1 DNA提取与鉴定的方法 141
3.1.4.2核酸的理化性质在核酸类药物生产中的应用 142
3.1.4.3琼脂糖凝胶电泳分离纯化DNA 144
3.1.5知识拓展 149
3.1.5.1动物组织中核酸各组成的鉴定（核酸的颜色反应） 149
3.1.5.2离子交换色谱法分离纯化核酸 149
3.1.6第二课堂 149
任务二 酵母细胞中RNA的制备与鉴定 150
3.2.1学习目标 150
3.2.2工作任务 150
3.2.3实践操作 150
3.2.4背景知识 152
3.2.4.1 RNA提取的方法 152
3.2.4.2核酸类药物的一般制备方法 153
3.2.5知识拓展 159
3.2.6第二课堂 159
任务三 DNA与RNA的含量测定 160
3.3.1学习目标 160
3.3.2工作任务 160
3.3.3实践操作 161
3.3.4背景知识 166
3.3.4.1定磷法测定核酸含量 166
3.3.4.2苔黑酚法测定RNA含量 167
3.3.4.3二苯胺法测定DNA含量 168
3.3.4.4紫外分光光度法测定核酸含量 168
3.3.5知识拓展 169
3.3.5.1核酸类药物的含量测定方法 169
3.3.5.2测定RNA含量的其他方法 170
3.3.6第二课堂 170
本章小结 171
项目四 药用ATP等核酸类药物的生产与分析（核苷酸及其衍生物类药物） 172
项目四导读 172
任务一 药用ATP的生产与分析 176
4.1.1学习目标 176
4.1.2工作任务 176
4.1.3实践操作 177
4.1.4背景知识 181
4.1.4.1药用ATP的性质及其药理作用 181
4.1.4.2溶液澄清度检查法 182
4.1.4.3硫酸盐检查法 183
4.1.4.4重金属检查法 184
4.1.4.5 pH值测定法 186
4.1.4.6纸电泳法检查ATP含量 188
4.1.5知识拓展 189
4.1.5.1 DEAE-纤维素薄板层析法检测ATP的形成 189
4.1.5.2药用ATP的其他生产方法 191
4.1.5.3费休定水法 191
4.1.5.4热原检查法 193
4.1.6课外训练 194
4.1.7第二课堂 194
任务二 脱氧核苷酸钠的生产与分析 195
4.2.1学习目标 195
4.2.2工作任务 195
4.2.3实践操作 196
4.2.4背景知识 199
4.2.4.1脱氧核苷酸钠的性质及其药理作用 199
4.2.4.2溶液颜色检查法 200
4.2.4.3干燥失重测定法 202
4.2.4.4氯化物检查法 203
4.2.5知识拓展 204
4.2.5.1铁盐检查法 204
4.2.5.2炽灼残渣检查法 205
4.2.6第二课堂 206
任务三 辅酶A的生产与分析 207
4.3.1学习目标 207
4.3.2工作任务 207
4.3.3实践操作 208
4.3.4背景知识 210
4.3.4.1辅酶A的性质及其药理作用 210
4.3.4.2辅酶A的生产方法 211
4.3.4.3辅酶A的质量检定 212
4.3.5知识拓展 213
4.3.5.1什么是GMP 213
4.3.5.2药品生产质量管理规范 213
4.3.4课外训练 214
4.3.5第二课堂 214
本章小结 215
主要参考文献 216
附录《药品生产质量管理规范》（2010年修订） 217