第一章 生化检验学的基本知识与技术 1
第一节 标本的采集、处理与保存 1
第二节 实验须知 2
第三节 参考值及其范围 2
一、参考值研究的设计 3
二、预告值 5
三、医学决定性水平 8
第四节 分析仪器的质量保证 10
一、波长校正 11
二、线性检查 14
三、杂光检查 15
四、比色杯的质量检查 16
五、分光光度计工作状态监测 17
六、稳定性检查 18
七、重复性检查 18
八、灵敏度检查 18
第五节 蒸馏水的质量 19
一、蒸馏水的制备方法 19
二、纯水纯度检查 20
第六节 缓冲液 20
第七节 常用玻璃仪器的使用和注意事项 28
一、计量仪器的种类和使用 28
二、一般玻璃仪器的使用和注意事项 30
三、玻璃器皿的清洗 30
四、容量玻璃仪器的检定多用衡量法 31
第二章 方法学评价与质量控制 32
第一节 几个基本概念 32
一、准确度 32
二、精密度 32
三、敏感性 33
四、特异性 33
五、实验误差 33
第二节 方法学选择与评价 34
一、方法选择与评价的意义和重要性 34
二、实验方法的分级 35
三、标准品的分级 35
四、方法选择的要求 35
五、方法选择与评价的步骤 36
六、评价实验 36
七、可接受性的决定 41
八、评价实验的书面报告 47
第三节 质量控制 48
一、临床化学质量控制的基本内容与步骤 48
二、室内质量控制 52
三、室间质量评价 55
四、Monica质控图 58
第四节 方法学评价的实验训练 60
实验2—1 重复性试验 61
实验2—2 回收试验 61
实难2—3 干扰试验 62
实验2—4 方法对比试验 63
第三章 葡萄糖测定 66
第一节 血糖测定 66
实验3—1 葡萄糖氧化酶法 66
实验3—2 邻甲苯胺法 68
实验3—3 口服葡萄糖耐量试验 70
第二节 其他体液中葡萄糖的测定 72
一、脑脊液中葡萄糖定量检查 72
二、尿液中葡萄糖定量检查 73
三、胸、腹水及关节液中糖定量检查 74
第三节 糖化血红蛋白测定 74
一、阳离子树脂交换层析法 75
二、亲和层析 75
三、高压液相层析 75
四、琼脂糖凝胶电泳 75
五、等电聚焦电泳 75
六、硫代巴比妥酸比色法 75
七、荧光比色法 75
八、放射免疫法 75
实验3—4 糖化血红蛋白离子交换微柱层析法 76
附1:GHb微柱法的快速离心处理 77
附2:病例 78
第四章 血脂测定 81
第一节 血清总胆固醇的测定 81
实验4—1 血清TC化学法——修改LRC法 81
实验4—2 酶法——CE-COD-POD法 82
第二节 血清甘油三酯的测定 85
实验4—3 血清TG化学法(乙酰丙酮呈色法) 86
实验4—4 GK-GPO-POD法 88
第三节 血清LDL-C的测定 90
实验4—5 血清LDL-C的测定 91
第四节 血清HDL-C的测定 92
实验4—6 血清HDL-C测定(DS-Mg2+-酶法) 92
第五节 血清HDL-C亚类测定 93
实验4—7 血清HDL-C亚类测定 93
第六节 血脂测定标准化简介 95
第七节 脂蛋白颗粒中载脂蛋白的测定 97
实验4—8 Apo B100的测定(RID法) 97
第八节 血浆脂蛋白 99
一、血浆脂蛋白的理化性质 99
二、血浆脂蛋白的结构 99
三、血浆脂蛋白的合成 101
四、血浆脂蛋白的分解代谢 102
五、高脂蛋白血症 111
第五章 血浆蛋白的测定 120
第一节 血浆蛋白 120
第二节 血浆总蛋白测定 120
实验5—1 血浆总蛋白测定(双缩脲法) 121
第三节 血清白蛋白测定 123
实验5—2 血清白蛋白测定(BCG法) 123
第四节 脑脊液和尿液蛋白质定量测定 125
实验5—3 脑脊液蛋白质定量(磺基水杨酸法) 125
实验5—4 尿液蛋白质定量(磺基水杨酸法) 127
第五节 血浆纤维蛋白原及血清粘蛋白测定 127
实验5—5 血浆纤维蛋白原测定(盐析—双缩脲法) 127
实验5—6 血清粘蛋白测定(酚试剂法) 129
第六章 酶活性测定 132
第一节 米氏常数(Km)在临床酶学检验中的应用 132
一、Km的意义 132
二、Km的实际应用 133
三、Km值的测定 135
第二节 酶活性测定方法——动力学测定法 138
一、酶促反应过程 138
二、测定酶活性方法的特点 138
三、固定时间法(二点法) 139
四、连续监测法(速率法) 140
五、酶活性测定结果的表示 142
六、酶样品的贮存与处理 143
七、酶活性测定方法的标准化与质量控制 145
第三节 血清酶在临床诊断上的应用 146
一、血清酶的分类 146
二、控制血清酶水平的因素 147
三、血清酶活性的生理差异 149
四、血清酶活性测定的选择和评价 150
五、血清酶活性测定在临床诊断中的应用举例 150
实验6—1 碱性磷酸酶的Km值测定 154
实验6—2 血清ALP活性测定(磷酸苯二钠法) 155
实验6—3 血清ALT活性测定(改良赖氏法) 157
实验6—4 血清AST活性测定(改良赖氏法) 160
实验6—5 血清γ—谷氨酰转肽酶(γ—GT)测定(对硝基苯胺法) 161
实验6—6 血清LDH活性测定(连续监测法) 162
实验6—7 血清CK活性测定(酶偶联连续监测法) 164
实验6—8 a—淀粉酶活性测定(固定时间法) 167
第七章 电泳分析技术 170
第一节 概述 170
一、电泳分析技术发展概况 170
二、电泳分析技术的分类 170
第二节 电泳的基本原理和操作要点 171
一、电泳的基本原理 171
二、影响电泳的因素 172
三、电泳的一般操作技术 175
第三节 醋纤膜电泳分析 176
实验7—1 血清蛋白质醋纤膜电泳 177
第四节 琼脂糖凝胶电泳 182
实验7—2 琼脂糖凝胶电泳分离乳酸脱氢酶(LDH)同工酶 182
实验7—3 琼脂糖凝胶电泳分离血浆脂蛋白 184
第五节 聚丙烯酰胺凝胶电泳 186
一、聚丙烯酰胺凝胶电泳的特点 186
二、聚丙烯酰胺凝胶的聚合 186
三、聚丙烯酰胺凝胶的孔径 187
四、缓冲系统的选择 188
实验7—4 血清蛋白质盘状电泳分析 188
第六节 蛋白质等电聚焦电泳技术简介 191
一、等电聚焦电泳的原理 191
二、电泳系统pH梯度的建立 192
实验7—5 蛋白质聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳 192
第七节 蛋白质转移电泳简介 193
一、转移电泳的出现 193
二、转移电泳的实验技术 194
三、转移电泳的优点 194
四、蛋白质转移电泳的应用 194
第八章 血浆无机离子测定 198
第一节 血清钠、钾测定 198
实验8—1 血清钠、钾火焰光度分析法 199
实验8—2 血清钾四苯硼钠比浊测定法 205
第二节 血清氯测定 207
实验8—3 血清氯测定(汞滴定法) 208
第三节 血浆(血清)〔HCO3-〕测定 210
实验8—4 血浆CO2—CP测定(滴定法) 210
第四节 阴离子缺额 212
第五节 血清钙、无机磷的测定 213
一、血清钙测定 214
实验8—5 血清钙测定(EDTA·Na2滴定法) 215
实验8—6 血清钙测定(甲基百里酚蓝比色法) 216
二、血清无机磷测定 217
实验8—7 血清无机磷测定(硫酸亚铁还原法) 218
第九章 血气分析 220
第一节 血气分析的物理化学基础 220
一、气体定律 220
二、气体容积表示法 221
三、ctCO2、cHCO3、cdCO2、pH的相互关系 222
第二节 血氧 223
一、血氧参数 223
二、HbO2解离曲线 224
三、Po2(0.5 )或P50 224
第三节 酸碱平衡与酸碱失衡 225
一、酸碱平衡量及其调节 225
二、酸碱平衡紊乱——酸碱失衡 229
第四节 血气分析技术 239
一、样品采集与保存 239
二、血气分析仪简介 239
三、样品测定 246
四、结果分析或计算 247
五、质量控制 251
第十章 激素 253
第一节 肽类及蛋白质类激素 253
一、丘脑下部的激素 253
二、神经垂体激素 256
三、腺垂体激素 257
四、胃肠道激素 260
第二节 非多肽类激素 262
一、氨基酸类激素(甲状腺激素) 262
二、儿茶酚胺类激素 266
三、类固醇激素 268
第三节 激素代谢产物的测定 275
一、体液中激素及其代谢产物的测定 275
二、内分泌腺功能的其他试验 275
实验10—1 尿液17—羟皮质类固醇(17—OHCS)测定 276
实验10—2 尿液17—酮类固醇(17—KS)测定 278
实验10—3 3-甲氧基-4-羟基苦杏仁酸(VMA)测定 280
第四节 激素的放射免疫分析 282
一、放射免疫分析的基本原理 282
二、建立放射免疫分析的必要条件及实验条件的选择 284
三、激素的放射免疫分析 289
实验10—4 血清甲状腺素(T4)测定 291
实验10—5 血浆胰岛素测定 292
实验10—6 血浆醛固酮测定 293
四、RIA的剂量反应曲线 294
五、RIA的质量控制 295
第十一章 肝脏功能试验 298
第一节 胆色素代谢及检验 298
一、胆色素的正常代谢 298
二、胆色素的异常代谢——黄疸 300
三、血清中胆红素 301
四、血清胆红素测定 301
实验11—1 黄疸指教测定 304
实验11—2 血清胆红素定性试验 304
实验11—3 血清总胆红素和1分钟胆红素定量测定 306
第二节 血浆蛋白质与肝功能 308
一、血清蛋白测定对肝病诊断的意义 308
实验11—4 麝香草酚浊度试验(TTT) 309
实验11—5 硫酸锌浊度试验(ZnTT) 310
二、血清酶活性测定 311
三、病毒性肝炎的抗原—抗体系统 312
第三节 肝脏的色素排泄功能 312
实验11—6 四溴酚酞磺酸钠(BSP)试验 312
第四节 肝功能试验的选择和评价 313
一、肝功能试验的选择 313
二、肝功能试验的评价 314
第十二章 肾脏功能试验 315
第一节 肾脏的生理功能 315
一、尿液的生成 315
二、内分泌功能 315
第二节 非蛋白氮物质 316
一、尿素 316
二、肌酐 317
三、尿酸 318
第三节 清除或浓缩试验 318
一、影响试验结果的因素 318
二、肾脏的血流和尿液形成 318
三、肾脏功能试验 319
实验12—1 尿素氮测定(二乙酰一肟法) 320
实验12—2 尿素氮测定(半酶法) 321
实验12—3 血清肌酐测定(碱性苦味酸法) 323
实验12—4 内生肌酐清除率试验 326
实验12—5 血清尿酸测定(Henry氏法) 327
实验12—6 尿蛋白醋酸纤维薄膜电泳 330
第十三章 肿瘤标志物 331
第一节 概述 331
一、肿瘤 331
二、恶性肿瘤发生原因 331
三、生物致癌因素 332
第二节 肿瘤标志物 334
一、抗原 334
二、酶 336
三、激素 338
四、胺类 340
第三节 个别肿瘤的标志物 342
第十四章 治疗药物监测 344
第一节 影响血清药物水平的因素 344
一、病人合作情况 344
二、药物的吸收 344
三、蛋白质结合作用 345
四、药物的代谢 345
五、肾脏的排泄 346
第二节 药物代谢的动力学 347
一、剂量反应曲线 347
二、连续多次用药剂量反应曲线 347
三、稳定状态 347
四、影响动力学的其他因素 348
第三节 血清药物浓度分析技术 349
一、紫外分光光度法和气液色层分析 349
二、直接免疫检验方法 349
三、药物筛选 349
第四节 个别药物监测举例 350
一、乙醇 351
二、水杨酸盐 352
三、对乙酰氨基酚 352
四、巴比妥 352
实验14—1 血清巴比妥的测定 354
附录 356