防疫检验手册PDF电子书下载

第一篇　总则 1

第一章　概述 1

第一节　防疫检验工作的特点 1

一、影响范围 1

二、工作规模 1

三、紧急程度 1

四、病原体的种类 1

目录 1

五、标本情况 2

第二节　防疫检验室的组织和任务 2

一、中心检验室 2

二、基层检验室 3

第三节防疫检验工作守则 3

第一节　采集标本的原财 4

第二章　标本的采集和运送 4

第二节　采集标本的要求 5

第三节　标本的采集方法 6

一、空气采样 6

二、水样 7

三、昆虫、动物的采集 8

四、患者标本的采集 9

五、尸检标本采样 10

六、生物战剂沾染物的采样 11

第四节　标本的保存和运送原则 11

一、标本保存 12

二、标本的运送 12

第二节 标本的处理 13

二、转送 13

一、一般方法 13

第一节　标本的接收和输送 13

一、标本的接收 13

第三章　初步检验 13

二、节肢动物标本的处理 15

第三节　初步检验 16

一、初步检验程序 16

二、初步检验要点 17

三、初步检验结果的判定标准 20

第二篇 细菌和毒素的检验 22

第四章 细菌的检验 22

第一节　鼠疫杆菌 22

一、检验程序 22

二、分离方法 22

三、鉴定方法 23

四、判定标准 26

五、注意事项 26

附：鼠疫抗血清的制备 26

第二节　霍乱弧菌 27

一、检验程序 27

二、分离方法 27

三、鉴定方法 28

四、判定标准 31

五、注意事项 31

附：霍乱抗“O”免疫血清的制备 32

第三节　炭疽杆菌 32

一、检验程序 32

五、注意事项 1 33

二、检验方法 33

三、鉴定方法 36

四、判定标准 40

五、注意事项 40

附一：抗炭疽杆菌荚膜血清的制备 40

附二：抗炭疽杆菌沉淀素荧光抗体的制备 41

附三：青霉素溶液 41

附四：消毒用碘液 41

附五：10％中性甲醛固定液 42

附六：甘油蛋白固定剂 42

第四节　兔热杆菌 42

一、检验程序 42

二、分离方法 42

三、鉴定方法 43

五、注意事项 44

附：兔热杆菌免疫血清的制备 44

四、判定标准 44

第五节 布氏杆菌 45

一、检验程序 45

二、分离方法 45

三、鉴定方法 46

四、判定标准 49

五、注意事项 50

附一：布氏杆菌病人的血清学诊断 50

附二：染料滤纸片的制备方法 51

二、分离方法 52

附三：布氏杆菌免疫血清的制备 52

一、检验程序 52

第六节　类鼻疽杆菌 52

三、鉴定方法 53

四、判定标准 55

五、注意事项 55

附：类鼻疽杆菌免疫血清的制备 55

第七节　沙门氏、志贺氏杆菌 55

一、检验程序 56

二、检验方法 56

三、鉴定方法 57

四、判定标准 66

一、检验程序 67

五、注意事项 67

第八节　创伤感染厌氧病原菌 67

二、厌氧菌分离方法 68

三、梭杆菌属的鉴定 71

四、判定标准 73

五、注意事项 73

第九节　创伤感染需氧病原菌 73

金黄色葡萄球菌 73

一、检验程序 73

绿脓杆菌 74

二、分离培养方法 74

三、鉴定方法 74

三、判定标准 75

一、检验程序 75

二、分离鉴定 75

一、检验程序 76

二、分离方法 76

第十节　脑膜炎奈瑟氏菌 76

三、鉴定方法 77

四、判定标准 78

五、注意事项 78

二、检验方法 79

一、检验程序 79

第一节　肉毒毒素 79

第五章　毒素的检验 79

四、注意事项 82

三、判定标准 82

第二节　葡萄球菌肠毒素 83

一、检验程序 83

二、检验方法 83

三、判定标准 85

四、注意事项 85

第三篇 螺旋体和真菌的检验 86

第六章　螺旋体的检验 86

第一节　钩端螺旋体 86

二、检验方法 87

一、检验程序 87

三、鉴定方法 90

四、血清学诊断 92

五、判定标准 95

六、注意事项 95

第二节　回归热螺旋体 96

一、直接涂片镜检 96

二、鸡胚接种法 97

三、动物接种法 97

第七章　真菌的检验 97

第一节　组织胞浆菌 97

一、检验程序 97

四、判定标准 98

三、鉴定方法 98

二、分离方法 98

五、注意事项 99

第二节　球孢子菌 99

一、检验程序 99

二、分离方法 99

三、鉴定方法 100

四、判定标准 100

五、注意事项 101

第四篇　病毒、衣原体及立克次体的检验 102

第八章　病毒、衣原体及立克次体检验概述 102

二、检验方法 105

一、检验程序 105

第一节　天花病毒 105

第九章　病毒的检验 105

三、鉴定方法 110

四、判定标准 111

五、注意事项 112

第二节　虫媒病毒（东马、西马与委马病毒、黄热与登革热病毒、乙型脑炎与森林脑炎病毒） 112

一、基本概念 112

二、检验程序 116

三、检验方法 117

四、鉴定方法 120

第三节　流行性感冒病毒 123

六、注意事项 123

五、判定标准 123

二、病毒分离 124

一、检验程序 124

三、鉴定方法 126

附：可溶性抗原的制备 126

四、快速血清学检验 126

五、判定标准 127

六、注意事项 127

附：霍乱滤液的制备与检定 127

第十章　衣原体与立克次体检验 129

第一节　鸟疫衣原体 129

附：蔗糖、磷酸盐、谷氨酸盐液 130

一、检验程序 130

二、检验方法 130

三、鉴定方法 131

附：鸟疫衣原体补体结合抗原制备方法 132

四、判定标准 133

第二节　立克次体 133

一、检验程序 134

二、检验方法 135

三、鉴定方法 138

四、血清学诊断 142

五、判定标准 145

六、注意事项 146

二、复红染色法 147

三、革兰氏染色法 147

第五篇　技术方法 147

一、美蓝染色法 147

第十一章 染色液与染色法 147

四、姬姆萨染色法 148

五、荚膜染色法 148

六、乳酸酚棉蓝染色法 148

七、马（Macchiavello）氏染色法 148

八、吉梅尼茨（Gimenez）染色法 149

九、细胞计数用结晶紫溶液 149

十、碘液染色法 149

二、甲基红（M-R）试验 150

一、糖类发酵试验 150

第一节　糖类代谢试验 150

第十二章　细菌的生物化学试验 150

三、伏-泼（V-P）试验 151

四、巯基乙酸钠糖发酵培养基 151

第二节　蛋白质代谢试验 151

一、靛基质试验 151

二、硫化氢产生试验 152

附：厌氧菌硫化氢产生试验 152

三、明胶液化试验 153

四、尿素酶试验 153

五、霍乱红试验 153

七、牛乳凝固试验 154

八、苯丙氨酸脱氨试验 154

六、果胶液化试验 154

九、赖氨酸脱羧试验 155

十、赖氨酸脱羧快速实验 155

第三节　盐类利用试验 156

一、柠檬酸盐利用试验（Simmon氏法） 156

二、酒石酸盐利用试验（Jordan和Ha rmon氏法） 156

三、粘液酸盐利用试验 157

四、藻胶酸盐利用实验 157

五、丙二酸钠利用试验 157

第四节 呼吸酶类试验 158

一、硝酸盐还原试验 158

二、厌氧菌硝酸盐还原试验 158

三、氰化钾抑制试验 158

五、细胞色素氧化酶试验 159

四、氧化酶试验 159

第一节　基础培养基 160

一、牛肉浸液 160

二、肉浸液肉汤 160

三、牛肉膏肉汤 160

第十三章　培养基和保存液的制备 160

四、普通琼脂培养基 161

五、赫金格尔（Hottinger）氏消化液 161

六、赫金格尔（Hottinger）氏培养基 161

第二节 鼠疫杆菌的培养基 162

二、龙胆紫亚硫酸钠琼脂培养基 162

一、1％溶血琼脂培养基 162

八、血琼脂培养基 162

七、肝浸液 162

三、胆碲铜紫培养基 163

四、抗血清琼脂培养基 163

五、草酸镁琼脂培养基 163

第三节　霍乱弧菌的培养基 164

一、碱性蛋白胨水 164

二、胆碲碱性蛋白胨水 164

三、甲酚红甘露糖琼脂培养基 164

四、庆大霉素培养基 165

第四节　炭疽杆菌的培养基 165

一、2％兔血清肉汤 165

四、青霉素琼脂（供串珠试验用） 166

二、五倍浓缩肉汤 166

三、戊烷脒血琼脂培养基 166

五、活性炭碳酸氢钠琼脂培养基 167

第五节　兔热杆菌的培养基 167

一、葡萄糖半胱氨酸血琼脂培养基 167

二、先锋霉素培养基 168

第六节　布氏杆菌的培养基 168

一、改良赫氏琼脂培养基 168

二、胰蛋白？琼脂培养基 168

三、双相（固体和液体）培养基 168

二、4％甘油普通琼脂培养基 169

一、4％甘油肉汤 169

第七节　类鼻疽杆菌的培养基 169

五、抗敌霉素培养基 169

四、万古霉素培养基 169

三、类鼻疽杆菌选择性培养基 170

四、中性红胆盐培养基 170

第八节　沙门氏、志贺氏菌属的培养基 170

一、革兰氏阴性菌（GN）增菌液 170

二、亚硒酸盐煌绿（SBG）增菌液 170

三、亚硒酸盐（SF）增菌液 171

四、胆汁葡萄糖肉汤 171

五、海氏（Hektoen）肠道菌琼脂培养基 172

六、伊红、美蓝（EMB）琼脂培养基 172

八、三糖铁琼脂培养基 173

七、SS琼脂培养基 173

九、尿（素）动（力）靛（基质）培养基 174

第九节　创伤感染病原菌的培养基 174

一、庖肉培养基 174

二、葡萄糖血琼脂 174

三、乳糖卵黄牛奶培养基 175

四、巯基乙酸钠肉汤半固体培养基 175

第十节 脑膜炎奈瑟氏菌的培养基 175

一、葡萄糖肉汤增菌培养基 175

二、巧克力琼脂平板 176

三、PV（多万）选择培养基 176

四、半固体糖发酵管 176

第十一节 葡萄球菌的培养基 177

一、葡萄糖血琼脂培养基 177

五、糖血清琼脂平板 177

六、菌种保存培养基 177

二、甘露醇食盐琼脂培养基 178

三、蛋黄亚碲酸盐甘氨酸培养基 178

四、葡萄球菌产毒培养基 178

第十二节　钩端螺旋体的培养基 179

一、改良柯少夫（Ko rthof）培养基 179

二、切尔斯基（Терский）培养基 179

三、含炭双层培养基 180

第十三节　真菌的培养基 180

一、沙氏（Sabouraud）琼脂培养基 180

三、脑心浸液血琼脂培养基 181

二、沙氏琼脂选择性培养基 181

第十四节　菌（毒）种保存培养基或保存液 182

一、卡-布（Cary-Blair）氏半固体保菌培养基 182

二、文-腊（Venkatraman-Ramakrishnan）氏霍乱标本保存液 182

三、炭疽标本淀粉保存管 182

四、20％中性甘油盐水 182

五、50％甘油磷酸盐缓冲液 183

六、炭末琼脂保存培养基 183

第一节 沉淀试验 184

二、琼脂扩散试验 184

一、环状沉淀试验 184

第十四章　血清学试验 184

七、病毒保存液 184

三、琼脂免疫电泳 186

第二节　凝集试验 187

一、玻片（定性）凝集试验 187

二、试管（定量）凝集试验 188

附一：肥达氏试验 188

附二：外斐氏试验 189

第三节　红细胞凝集和红细胞凝集抑制试验 189

一、流行性感冒病毒血凝抑制试验 190

二、虫媒病毒血凝抑制试验 194

三、注意事项 199

附：主要溶液配制方法 199

一、试剂和器材 200

第四节　反向间接红细胞凝集试验 200

二、试验方法 201

三、结果判定 203

四、注意事项 204

附一：免疫球蛋白的提取 204

附二：干燥诊断红细胞的制备 207

第五节　炭凝集试验 208

一、试剂和器材 208

二、试验方法 209

三、结果判定 210

四、注意事项 210

第六节　中和试验 210

一、一般中和试验方法 211

二、微量细胞培养中和试验 214

第七节　补体结合试验 217

一、试剂配制 218

二、操作方法 219

三、注意事项 223

附一：巴比妥缓冲液的配制 224

附二：10％蛋清盐水的配制 224

第十五章　荧光抗体技术 225

一、概述 225

二、荧光抗体的制备 226

三、荧光抗体染色法 230

四、荧光显微镜的结构与使用 233

五、荧光抗体法在生物防疫检验中的应用 235

附：蛋白质与荧光素定量标准曲线 237

第十六章　动物实验 238

一、接种方法 238

二、采血方法 241

三、实验动物的剖检 243

第十七章　鸡胚培养 244

一、接种前准备 245

二、接种方法 246

三、培养和观察 248

四、剖检和收获 248

二、组织培养盖玻片 249

一、培养容器 249

第一节　器材准备和溶液配制 249

第十八章　组织培养 249

三、橡皮塞 250

四、主要溶液的配制 250

第二节　细胞培养法 253

一、鸡胚细胞培养 254

二、地鼠肾细胞培养 255

三、人胚肾细胞培养 255

四、黑拉（HeLa）细胞培养 255

第三节　组织细胞保存法 256

一、单层细胞短期保存 256

二、细胞悬液长期保存 256

一、病毒检验组织培养法操作程序 257

二、标本接种 257

第四节　标本接种与观察 257

三、观察指标 258

附：粘病毒组织培养红细胞吸附试验 258

第五节　病毒空斑技术 260

一、虫媒病毒（A组）空斑 260

二、空斑中和法（抑制法） 261

三、登革热病毒空斑 262

附一：空斑法用培养基的制备 263

附二：空斑固定液 263

第六节　组织培养注意事项 263

第十九章　药物敏感试验 264

一、抗菌药物敏感性的测定（纸片法） 264

二、联合抗菌素的敏感性测定（纸条法） 266

第二十章　菌（毒）种保存法 268

一、简易保存法 268

二、冷冻真空干燥保存法 270

附篇 272

一、基层检验室药品、器材 272

二、常用缓冲液 277

三、实验室常用消毒剂 280

四、常用元素的原子量 281

五、常用指示剂及pH范围 281

六、度量衡名称及简写 281

七、度量衡的进位制 282

八、手册中药品、试剂中英文对照 282

九、缩写中英对照 287