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克隆识别  应用于流行病学和院内感染学的方法和技术
克隆识别  应用于流行病学和院内感染学的方法和技术

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医药卫生

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  • 作 者:李蓉,郭晓奎主编
  • 出 版 社:北京医科大学;中国协和医科大学联合出版社
  • 出版年份:1994
  • ISBN:7810343823
  • 页数:251 页
图书介绍:本书专门介绍流行病学、院内感染学领域中的微生物定性、定量、定位分析技术。内容包括经典方法、核酸分析方法、蛋白质和酶分析方法等,重点介绍分子生物学技术。
《克隆识别 应用于流行病学和院内感染学的方法和技术》目录

第一篇 经典分析技术简介 1

抗生素敏感性分型 3

生物分型 6

噬菌体分型 6

血清型分型 6

细菌素分型 6

第二篇 核酸分析技术 9

第一章 质粒图谱分析技术 11

第一节 概述 11

1. 小量制备质粒DNA用菌株的培养和收获 17

第二节 方法 17

2. 质粒DNA的提取 19

3. 凝胶电泳 26

4. 琼脂糖凝胶中DNA的回收 39

5. 限制性内切酶的使用 44

6. 质粒和质粒酶切图谱结果分析 51

第二章 基因组核酸电泳图谱分析技术 61

第一节 概述 61

第二节 基本组核酸电泳核型分析方法 67

1. 低等真核生物基因组核酸电泳分析 67

2. 病毒基因组核酸电泳分析 69

第三节 基因组核酸酶切电泳图谱分析 71

1. 基因组核酸的提取 72

2. 限制性内切酶酶切 79

3. 电泳 80

4. 结果分析 80

第三章 核酸分子杂交技术 82

第一节 概述 82

第二节 方法 94

1. 重组质粒目的基因的获取 94

2. 核酸探针的标记 98

3. 固相杂交 109

第四章 染色体探针杂交图谱分析技术 120

第一节 概述 120

第二节 方法 127

1. Southern转移 128

2. Southern膜的预杂交 131

3. Southern膜杂交 132

4. 杂交后Southern膜的洗涤 132

5. 放射自显影 133

6. 注意事项 133

第一节 概述 136

第五章 PCR分析技术 136

第二节 方法 140

1. 参与PCR的组成部分及相关因素 140

2. PCR的基本方法 151

3. PCR实验室操作注意事项 152

第六章 寡核苷酸分析技术 157

第一节 概述 157

第二节 方法 159

1. 微生物分离培养 161

2. RNA的提取 161

4. γ-32PATP标记 162

3. T1酶消化 162

5. 寡核苷酸提取 163

6. 标本处理 163

7. 电泳 164

8. 结果判定 167

第三篇 蛋白质和酶分析技术 171

第七章 全细胞可溶性蛋白图谱分析技术 173

第一节 概述 173

第二节 方法 176

1. 全细胞可溶性蛋白样品的制备 176

2. SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 177

3. 蛋白免疫印迹法 182

第八章 外膜蛋白图谱分析技术 190

第一节 概述 190

第二节 方法 193

1. 外膜蛋白提取 193

2. OMP的SDS-PAGE方法 195

3. 结果分析方法和资料处理 195

第九章 多位点酶电泳分析技术 199

第一节 概述 199

1. 制备酶提取物 203

第二节 方法 203

2. 电泳 204

3. 酶的染色 205

4. 结果判定 220

5. 资料分析 223

附录 227

1. 器材和仪器 227

2. 试剂和溶液 230

3. 培养基和抗生素溶液的配制 238

4. 常用数据 242

5. 核酸的定量 248

6. EB溶液的净化处理 249

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