基因克隆理论与技术PDF电子书下载

上篇 基因克隆理论 1

第一章 概论 1

第一节 基因研究历史回顾 1

第二节 遗传的物质基础 2

第三节 基因和基因克隆的概念 3

第四节 基因工程的研究内容和安全性 4

第二章 基因的结构和功能 8

第一节 核酸的结构和功能 8

第二节 遗传物质的组织结构 13

第三节 基因组的结构和功能 21

第三章 蛋白质的结构和功能 33

第一节 蛋白质的基本单位和分类 33

第二节 蛋白质的分子结构和理化性质 37

第三节 蛋白质的生物学功能 47

第四章 基因克隆中常用的工具酶 50

第一节 限制性核酸内切酶 50

第二节 DNA聚合酶 54

第三节 DNA连接酶 58

第四节 修饰酶 59

第五章 基因克隆的载体 63

第一节 质粒载体 63

第二节 噬菌体载体 77

第三节 病毒载体 82

第四节 大容量载体 89

第六章 基因的表达和调控 93

第一节 原核生物基因的表达调控 94

第二节 真核生物基因的表达调控 110

第七章 基因克隆在治疗和诊断中的应用与进展 125

第一节 基因治疗研究进展 125

第二节 基因诊断的研究进展 128

第八章 基因克隆技术在生物制药中的应用 134

第一节 概况 134

第二节 基因工程药物 135

第三节 基因工程抗体 135

第四节 基因工程疫苗 136

第五节 核酸疫苗 137

第六节 生物医药的发展方向 137

下篇 基因克隆技术 139

第九章 分子生物实验中的常用仪器及试剂的配制 139

第一节 分子生物实验室的常规仪器及设备 139

第二节 常用试剂的配制 141

第十章 琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳 145

第一节 原理 145

第二节 琼脂糖电泳 145

第三节 聚丙烯酰胺凝胶电泳 146

第四节 电泳的影响因素 147

第五节 电泳中常用的指示剂和染色剂 148

第十一章 目的基因克隆 149

第一节 化学合成法获取目的基因 149

第二节 PCR扩增法获取目的基因 149

第三节 RT-PCR法获取目的基因 154

第十二章 载体的准备 157

第一节 感受态细胞的制备和质粒的转化 157

第二节 质粒DNA的提取 158

第十三章 目的基因与载体的连接 160

第一节 目的基因和载体的酶切 160

第二节 从凝胶中回收DNA 162

第三节 目的基因和载体的连接 163

第十四章 重组载体的检测 166

第一节 酶切和电泳检测 166

第二节 DNA序列测序鉴定 166

第十五章 重组载体的转染 172

第一节 磷酸钙共沉淀法 172

第二节 脂质体法 172

第三节 反转录病毒感染法 173

第四节 腺病毒载体转染法 174

第五节 结果和转染方法的选择 175

第十六章 重组体插入基因、RNA和表达产物蛋白质的检测 177

第一节 Southern blot 177

第二节 Northern blot 180

第三节 Western blot 182

第十七章 大鼠BDNF基因的构建及骨髓间充质干细胞转染 187

第一节 实验原理与实验目的 187

第二节 实验设备、试剂及配制 187

第三节 实验步骤 193

第十八章 纳米粒子介导人生存素基因修饰嗅鞘细胞实验 210

第一节 实验原理 210

第二节 实验所需设备、试剂及其配制 211

第三节 实验步骤 212

第四节 实验结果 216

第五节 结果分析 218

第十九章 小鼠NT-4基因的体外构建、骨髓间充质干细胞转染和脑内移植 221

第一节 实验目的及实验原理 221

第二节 小鼠NT-4基因的体外构建及骨髓充质干细胞转染 221

第三节 NT-4GFP转基因骨髓间充质干细胞脑内移植 234

第四节 结果分析与经验体会 239