基础生物化学实验方法和技术PDF电子书下载

前言 1

第一篇 生物化学实验原理与技术 1

第一章 生化分离制备的特点与原理 1

第一节 生化分离制备方法的特点 1

第二节 生化分离制备方法的原理 2

第三节 生化分离制备的分析鉴定方法 3

第四节 生化分离制备中材料提取方法的选择 4

第五节 生化分离制备中分离纯化方法的选择 6

第二章 生物大分子的分离制备 8

第一节 蛋白质和酶的提取分离 8

一、蛋白质及酶的一般提取方法 8

二、蛋白质和酶提取后的纯化 12

第二节核酸的提取分离 13

一、核酸及其溶解性 13

二、提取方法 13

第三节 多糖及其他水溶性生化物质的提取分离 15

第四节 脂类化合物的提取分离 16

第五节 植物次生物的提取及溶剂系统分离的选择 17

第三章 生物化学常用实验技术 19

第一节 离心技术 19

一、基本原理 19

二、离心设备 20

三、离心方法 20

第二节 分光光度法 22

一、基本原理 22

二、仪器的基本结构 23

三、几种常用分光光度计的使用方法 24

第三节 层析技术 30

一、吸附层析 30

二、分配层析 32

三、离子交换层析 33

四、凝胶过滤 36

五、亲和层析 37

第四节 电泳技术 39

一、电泳原理 39

二、聚丙烯酰胺凝胶电泳 41

三、几种特殊的聚丙烯酰胺凝胶电泳 46

四、琼脂糖凝胶电泳 49

五、淀粉凝胶电泳 50

六、醋酸纤维素薄膜电泳 52

第二篇 实验内容 54

实验1 氨基酸的纸层析分离 54

实验2 氨基酸纤维素薄层层析 57

实验3 植物组织中游离氨基酸总量的测定 59

实验4 植物组织中可溶性蛋白质含量的测定 62

实验5 植物组织中丙酮酸含量的测定 69

实验6 凯式定氮法测定蛋白质含量 71

实验7 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量 76

实验8 植物过氧化物酶同工酶的测定 81

实验9 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质 85

实验10 酶的性质 87

实验11 蔗糖酶米氏常数的测定 90

实验12 淀粉酶活力的测定 93

实验13 植物组织中DNA的快速提取 96

实验14 紫外吸收法测定核酸含量 98

实验15 二苯胺法测定DNA含量 100

实验16 酵母RNA的提取与鉴定 102

实验17 定磷法测定核酸含量 104

实验18 苔黑酚法测定RNA含量 107

实验19 NA聚合酶链式反应（PCR）技术 109

实验20 植物组织中可溶性糖含量的测定 111

实验21 植物组织中淀粉含量的测定 119

实验22 真菌多糖的提取及测定 123

实验23 血清葡萄糖含量的测定 125

实验24 维生素C含量的测定 127

实验25 粗脂肪的提取和含量测定 130

实验26 游离脂肪酸含量的快速测定 132

实验27 酮体的生成和利用 134

实验28 血清转氨酶活力的测定 136

实验29 植物体内的转氨基作用 140

实验30 超氧化物酶（SOD）活力的测定 142

实验31 过氧化物酶（POD）活力的测定 146

实验32 过氧化氢酶（CAT）活力的测定 148

实验33 苯丙氨酸解氨酶（PAL）的提取、纯化及活性测定 152

实验34 蔗糖酶的分离提纯 159

实验35 质粒DNA的提取、酶切及电泳鉴定 164

第三篇 附录 168

一、实验室安全及防护知识 168

二、实验室常识 171

三、实验误差与数据处理 173

四、玻璃仪器的洗涤及各种洗液的配制法 177

五、常用容量玻璃仪器的使用方法 179

六、常用溶液混匀方法 181

七、常用缓冲溶液的配制方法 182

八、常用酸碱的比重（密度）和浓度的关系 189

九、常用固态化合物的摩尔浓度配制参考表 190

十、常用蛋白质分子量及等电点 191

十一、硫酸铵饱和度的常用表 193

十二、易变质及需要特殊方法保存的试剂 195

参考文献 196