酵母遗传学方法实验指南2005版PDF电子书下载

译者序 1

原著序 1

前言 1

遗传学命名法 1

实验篇 5

实验一 酵母细胞的观察 5

实验二 营养缺陷型、温度敏感型和渗透压敏感型突变株的分离和鉴别 12

实验三 减数分裂作图 20

实验四 有丝分裂重组和随机孢子分析 30

实验五 酵母转化 39

实验六 合成致死突变体 47

实验七 基因置换 52

实验八 ras2抑制基因的分离 68

实验九 细胞型操作 76

实验十 用插人诱变法分离突变体 85

实验十一 利用双杂交差异互作筛选以分离功能突变体 91

技术和方案篇 98

技术和方案1 酵母的高效转化 98

技术和方案2 快速粗放的酵母菌落质粒转化法 100

技术和方案3 酵母DNA分离 101

技术和方案4 酵母蛋白质的抽提 107

技术和方案5 TAP纯化方法 108

技术和方案6 酵母RNA的分离 111

技术和方案7 质粒DNA的羟胺突变 115

技术和方案8 酵母β-半乳糖苷酶的测定 116

技术和方案9 羧肽酶Y的平板鉴定 120

技术和方案10 随机抱子分析 121

技术和方案11 酵母活细胞染色 122

技术和方案12 酵母免疫荧光法 124

技术和方案13 已固定细胞的肌动蛋白染色 127

技术和方案14 PCR介导基因破坏法 129

技术和方案15 酵母菌落PCR 133

技术和方案16 分光光度法测酵母细胞密度 134

技术和方案17 细胞同步化 136

技术和方案18 染色质免疫沉淀 138

技术和方案19 酵母DNA流式细胞记数 143

技术和方案20 对数生长 145

技术和方案21 EMS诱变 146

技术和方案22 四分体解剖 148

技术和方案23 制备四分体解剖针 150

技术和方案24 挑取合子 152

技术和方案25 测定铺板效率 153

技术和方案26 小量提取E.coli DNA 154

技术和方案27 E.coli感受态的制备与转化 156

技术和方案28 系统缺失菌株的保存及操作 159

附录A 培养基 161

附录B 菌株保存 171

附录C 酵母遗传图谱和物理图谱 172

附录D 平板划线模板 179

附录E 菌株核型分析电泳的Southern印迹作图 181

附录F 菌株 183

附录G 用标准血球计数板进行酵母细胞计数 186

附录H 四分抱子计分表 187