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第一篇 分子生物学技术 3

第一章 DNA的制备和分析 3

实验1 细菌质粒的制备和分析 5

实验2 植物基因组DNA的制备和分析 10

实验3 酵母DNA的制备 14

实验4 线虫DNA的提取 17

第二章 DNA的克隆 19

实验5 DNA的限制性内切核酸酶剪切与DNA片段的回收 22

实验6 DNA的体外重组、转化与蓝白筛选 25

实验7 外源基因在大肠杆菌中的表达 30

第三章 PCR相关技术 32

实验8 PCR法快速筛选阳性克隆 36

实验9 转基因烟草的PCR检测 38

实验10 反转录PCR 40

实验11 PCR产物的TA克隆 46

第四章 RNA的制备和分析 48

实验12 植物组织总RNA的制备 50

实验13 总RNA的定量和完整性分析 53

实验14 mRNA的分离和纯化 56

实验15 小RNA的分离与制备 61

第五章 核酸分子杂交技术 63

实验16 同位素标记探针的Southern杂交 69

实验17 DIG标记探针的Northern杂交 73

实验18 菌落原位杂交 78

第六章 蛋白质电泳技术 80

实验19 SDS-PAGE和蛋白质分子质量的测定 81

实验20 双向电泳 90

实验21 肽质量指纹谱技术 96

第七章 分子间的互作技术 100

实验22 凝胶阻滞分析 101

实验23 免疫共沉淀技术 106

实验24 Western杂交 108

分子克隆实验设计方案举例 111

主要参考文献 114

第二篇 细胞生物学技术 117

第八章 显微镜技术 117

实验25 普通光学显微镜技术 118

实验26 几种研究用显微镜技术 128

实验27 电子显微镜技术 136

实验28 电镜样品制备技术 141

第九章 细胞培养与转基因技术 151

实验29 酵母细胞的培养、计数与观察 152

实验30 酿酒酵母细胞的LiAc转化 155

实验31 HeLa细胞的传代培养 161

实验32 非脂质体介导的外源基因转染HeLa细胞 163

实验33 植物细胞的悬浮培养 165

第十章 植物转基因技术 167

实验34 农杆菌介导的叶盘法转化烟草 172

实验35 基因枪转化技术 177

实验36 植物原生质体的制备及基因瞬时转化 182

实验37 细胞融合 185

第十一章 细胞的基本结构与功能及电生理技术 188

实验38 细胞膜的渗透性 189

实验39 离心技术与叶绿体和细胞核的分离 192

实验40 核酸（DNA和RNA）的细胞核定位观察 198

实验41 细胞骨架的光学显微镜观察 200

实验42 非损伤微测技术简介和微电极的制备 202

实验43 利用爪蟾卵母细胞电压钳系统测定细胞膜离子转运功能 206

第十二章 细胞的生命活动与调节 208

实验44 蟑螂巨大神经和空气振动感受器 209

实验45 异源功能互补与金属离子转运蛋白的功能鉴定 213

实验46 质膜蛋白的分选与翻译后调控 218

实验47 植物细胞胞吞作用及内膜系统的荧光显微镜观察 221

实验48 微丝骨架的特异性标记 224

实验49 细胞凋亡小体和梯状DNA的观察 226

实验50 细胞周期与流式细胞仪的应用 230

细胞生物学实验设计方案举例 232

主要参考文献 235

附录 236

附录1 有关核酸的常用数据 236

附录2 与DNA凝胶电泳有关的数据 238

附录3 缓冲液 239

附录4 常用的生物酶类和抗生素类 241

附录5 常用培养基 243

附录6 杂交实验中用于降低背景的封闭剂 247

附录7 生物信息学常用数据库及其软件 248

附录8 分子生物学有毒试剂的净化处理和安全使用 254