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第1章　绪论 1

1.1　分子生物学技术发展简史 1

1.2　DNA重组的一般过程 5

1.3　分子生物学技术的应用 12

第2章 分子生物学实验室常用仪器设备及安全注意事项 13

2.1　分子生物学实验室常用仪器设备 13

2.2　分子生物学实验室安全注意事项 19

第3章　分子生物学实验基本操作技术 23

3.1　除（灭）菌技术 23

3.2　无菌操作技术 28

3.3　微量操作技术 30

第4章　分子克隆常用工具酶和载体 32

4.1　分子克隆常用工具酶 32

4.2　常用载体 37

4.3　宿主细胞 39

第5章　核酸定量测定技术——紫外分光光度法 41

5.1　主要内容 41

5.2 目的要求 41

5.3　实验原理 42

5.4　材料、试剂及器材 42

5.5　方法与操作步骤 43

第6章　核酸标记技术 46

6.1　主要内容 47

6.2 目的要求 47

6.3　实验原理 47

6.4　材料、试剂与器材 48

6.5　方法与操作步骤 49

第7章　琼脂糖凝胶电泳技术 52

7.1　主要内容 53

7.2 目的要求 53

7.3　实验原理 53

7.4　材料、试剂及器材 55

7.5　方法与操作步骤 56

第8章　聚丙烯酰胺凝胶电泳技术 60

8.1　主要内容 62

8.2 目的要求 62

8.3　实验原理 62

8.4　材料、试剂与器材 64

8.5　方法与操作步骤 65

第9章 动物组织中DNA的提取与纯化 70

9.1　主要内容 70

9.2 目的要求 70

9.3　实验原理 71

9.4　材料、试剂及器材 71

9.5　方法与操作步骤 72

第10章 动物组织总RNA的提取及定量 75

10.1　主要内容 75

10.2 目的要求 75

10.3　实验原理 76

10.4　材料、试剂及器材 76

10.5　方法与操作步骤 76

第11章　大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 79

11.1　主要内容 79

11.2　目的要求 79

11.3　实验原理 80

11.4　材料、试剂及器材 81

11.5　方法与操作步骤 82

第12章 质粒DNA的提取、纯化与电泳鉴定 85

12.1　主要内容 85

12.2 目的要求 86

12.3　实验原理 86

12.4　材料、试剂及器材 87

12.5　方法与操作步骤 88

第13章　重组子的构建与筛选鉴定 93

13.1　主要内容 93

13.2　目的要求 93

13.3　实验原理 94

13.4　材料、试剂与器材 94

13.5　方法与操作步骤 96

第14章 目的基因在大肠杆菌中的表达与检测 99

14.1　主要内容 100

14.2 目的要求 100

14.3　实验原理 100

14.4　材料、试剂与器材 101

14.5　方法与操作步骤 101

第15章　聚合酶链式反应 104

15.1　主要内容 104

15.2　目的要求 104

15.3　实验原理 104

15.4　材料、试剂与器材 106

15.5　方法与操作步骤 106

第16章　Southern杂交技术 112

16.1　主要内容 113

16.2 目的要求 113

16.3　实验原理 113

16.4　材料、试剂及器材 115

16.5　方法与操作步骤 116

第17章　Northern杂交技术 120

17.1　主要内容 120

17.2 目的要求 120

17.3　实验原理 120

17.4　材料、试剂及器材 121

17.5　方法与操作步骤 123

第18章 免疫印迹技术——Western Blot 128

18.1　主要内容 128

18.2 目的要求 129

18.3　实验原理 129

18.4　材料、试剂及器材 130

18.5　方法与操作步骤 131

第19章　实验记录、数据处理与结果分析 138

19.1　实验记录 138

19.2　数据处理 140

19.3　结果分析与结论 143

第20章　实验报告 146

附录 149

一、常用缓冲溶液的配制方法 149

二、常用电泳上样缓冲液 151

三、常用限制性核酸内切酶的识别序列及切点 152

四、常用宿主细胞及特点 152

五、常用蛋白酶与核酸酶的配制及使用浓度 154

六、常用培养基 154

七、常用抗生素的配制及使用浓度 155

八、琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶的浓度及其有效分离范围 155

九、不同浓度聚丙烯酰胺凝胶的配制方法 156

十、蛋白质和核酸常用分子质量标准 157

参考文献 160