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第一章 糖类 1

实验1 糖的颜色反应 1

实验2 糖的还原作用 4

实验3 血糖的定量测定（Folin-Wu法） 5

实验4 血糖的定量测定（Folin-Malmros法） 8

实验5 血糖的定量测定（葡萄糖氧化酶法） 11

实验6 血液中葡萄糖的测定（邻甲苯胺法） 13

实验7 葡萄糖含量测定（苯酚法） 15

实验8 蒽酮比色定糖法 16

实验9 植物组织中可溶性总糖的测定（蒽酮比色法） 18

实验10 总糖和还原糖的测定（3,5-二硝基水杨酸法） 20

实验11 多糖的试验 22

实验12 肝素钠的定量测定 24

实验13 糖的旋光性和变旋现象 26

第二章 脂类 29

实验14 脂肪的组成 29

实验15 卵磷脂的提取和鉴定 31

实验16 粗脂肪含量的测定（Soxhlet抽提法） 32

实验17 碘价的测定（Hanus法） 35

实验18 皂化价的测定 37

实验19 脂肪酸价的测定 39

实验20 脂肪乙酰价的测定 40

实验21 血清胆固醇的定量测定（磷硫铁法） 42

实验22 血清总胆固醇的测定（邻苯二甲醛法） 44

实验23 血清胆固醇的定量测定（醋酸酐法） 45

实验24 血清甘油三酯简易测定法 47

实验25 血清甘油三酯的测定（GPO-PAP法） 49

实验26 丙二醛（MDA）的测定 51

第三章 蛋白质 54

实验27 蛋白质的颜色反应 54

实验28 蛋白质的沉淀反应 57

实验29 蛋白质浓度测定（微量凯氏定氮法） 59

实验30 蛋白质浓度测定（双缩脲法） 63

实验31 蛋白质浓度测定（Folin-酚试剂法） 64

实验32 蛋白质浓度测定（紫外光吸收法） 66

实验33 蛋白质浓度测定（考马斯亮蓝结合法） 67

实验34 非蛋白氮（NPN）的测定 69

实验35 甲醛滴定法 71

实验36 DNP-氨基酸的制备和鉴定 72

实验37 DNS-氨基酸的制备和鉴定 76

实验38 用DNS法鉴定蛋白质或多肽的N-端氨基酸 78

实验39 用DNS法测定多肽的氨基酸组成 81

实验40 肽的序列分析（PTH法） 83

实验41 甲硫氨酰甘氨酸二肽的合成 86

实验42 尿素对蛋白质的变性作用 89

实验43 氨基酸纸层析法 92

实验44 氨基酸微晶纤维素薄板层析法 95

实验45 离子交换柱层析法分离氨基酸 97

实验46 血清白蛋白的分离与纯化 98

实验47 凝胶层析法分离纯化蛋白质 101

实验48 DEAE-Sephadex A-25分离纯化多肽 103

实验49 亲和层析法分离纯化单克隆抗体 106

实验50 醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质 108

实验51 血清糖蛋白醋酸纤维薄膜电泳 111

实验52 牛乳中酪蛋白和乳糖的制备与鉴定 113

实验53 聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳法分离血清蛋白质 115

实验54 聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法鉴定胰岛素 119

实验55 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的相对分子质量 122

实验56 用等电聚焦电泳法测定蛋白质等电点 126

实验57 对流免疫电泳法测定胎儿甲种蛋白质 128

实验58 火箭免疫电泳法 130

实验59 Western印迹 132

实验60 酶联免疫吸附测定（ELISA） 134

第四章 核酸 137

实验61 核酸的定量测定（定磷法） 137

实验62 酵母RNA的提取 139

实验63 RNA的定量测定（苔黑酚法） 141

实验64 动物肝脏中DNA的提取 142

实验65 DNA的定量测定（二苯胺法） 144

实验66 5′-核苷酸的定量测定（过碘酸氧化法） 145

实验67 DEAE-纤维素薄板层析法测定核苷酸 148

实验68 腺苷三磷酸的定量测定（纸电泳法） 150

实验69 核酸的酶法降解以及葡聚糖凝胶层析法制备5′-单核苷酸 152

实验70 质粒DNA的提取 154

实验71 DNA琼脂糖凝胶电泳 156

第五章 酶 160

实验72 过氧化氢酶的作用 160

实验73 过氧化物酶的作用 161

实验74 细胞色素氧化酶的作用 162

实验75 乳酸脱氢酶及其辅酶的作用 163

实验76 影响酶促反应的因素——温度、pH、激活剂及抑制剂 165

实验77 胰蛋白酶米氏常数的测定 168

实验78 胆碱酯酶米氏常数的测定 171

实验79 过氧化氢酶米氏常数的测定 174

实验80 用正交法测定几种因素对酶活力的影响 175

实验81 溶菌酶的提纯结晶和活力测定 179

实验82 猪胰糜蛋白酶的制备和纯度鉴定 181

实验83 大肠杆菌碱性磷酸酶的制备 184

实验84 碱性磷酸酶的提取和分离及比活力测定 187

实验85 琼脂糖凝胶电泳法分离乳酸脱氢酶同工酶 192

实验86 聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离乳酸脱氢酶同工酶 194

实验87 肝脏谷丙转氨酶活力测定 197

实验88 血清谷丙转氨酶活力测定 200

实验89 固定化5′-磷酸二酯酶的制备及其在分离核苷酸中的应用 202

第六章 维生素 208

实验90 维生素A的定性测定 208

实验91 维生素B1的定性测定 209

实验92 维生素C的定量测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法） 210

实验93 维生素C的定量测定（磷钼酸法） 212

实验94 核黄素（维生素B2）荧光光度定量测定法 214

实验95 荧光法测定核黄素结合蛋白-核黄素的解离常数 217

第七章 激素 220

实验96 尿中17-羟皮质类固醇的测定（Porter-Silber法） 220

第八章 物质代谢与生物氧化 223

实验97 肌糖原的酵解作用 223

实验98 脂肪酸的β-氧化 225

实验99 华氏（Warburg）呼吸仪瓶常数的测定 228

实验100 L-谷氨酸的酶促脱羧作用（测压法测定L-谷氨酸） 230

实验101 发酵过程中无机磷的被利用和ATP的生成（ATP的生物合成） 233

第九章 综合实验 235

实验102 酵母醇脱氢酶的提纯及其性质的研究 235

实验102.1 酵母醇脱氢酶的提纯 235

实验102.2 酵母醇脱氢酶的凝胶层析 238

实验102.3 酵母醇脱氢酶的专一性 239

实验102.4 酵母醇脱氢酶的动力学研究 241

实验103 α-淀粉酶的分离纯化、鉴定和Km、Vmax的测定 248

实验103.1 α-淀粉酶的活力测定 248

实验103.2 α-淀粉酶的疏水层析 251

实验103.3 α-淀粉酶的离子交换柱层析 253

实验103.4 聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法鉴定α-淀粉酶 255

实验103.5 米氏常数（Km）和最大反应速度（Vmax）的测定 257

实验104 螺旋藻藻蓝蛋白的分离、纯化与鉴定 260

实验104.1 螺旋藻粗藻蓝蛋白的制备 260

实验104.2 离子交换柱层析法分离藻蓝蛋白 261

实验105 原花色素的提取、纯化与测定 263

实验105.1 山楂原花色素的提取 263

实验105.2 原花色素的测定（Ⅰ） 264

实验105.3 原花色素的测定（Ⅱ） 266

实验106 熊果酸的制备和测定 268

实验106.1 山楂熊果酸的制备 268

实验106.2 熊果酸含量测定 269

实验107 镍化合物诱导人Jurkat细胞凋亡途径的研究 271

实验107.1 Jurkat细胞的培养 271

实验107.2 Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡 273

实验107.3 RT-PCR检测凋亡相关基因bcl-2的表达 274

实验107.4 酶联免疫吸附检测Bcl-2蛋白表达水平 277

附录 279

一、生物化学实验须知 279

二、玻璃仪器的洗涤及一些常用的洗涤剂 281

三、移液器的使用 282

四、吸管的使用 284

五、过滤和离心 284

六、722型分光光度计的使用 285

七、930型荧光光度计的使用 288

八、UV-9100型紫外可见分光光度计的使用 290

九、实验室常用酸碱的比重和浓度 295

十、常用酸碱指示剂 295

十一、缓冲液的配制 296

十二、恒沸盐酸的制备 303

十三、大肠杆菌丙酮粉的制备 303

十四、生物化学中某些重要化合物的Mr及pK值 304

十五、氨基酸的一些物理常数 306

十六、某些蛋白质的物理性质 308

十七、化学元素的相对原子质量表 309

十八、离心机转速（r/min）与相对离心力（RCF）的换算 310

十九、硫酸铵饱和度的常用表 312

二十、常用离子交换剂 313

二十一、常用凝胶过滤层析介质 316

二十二、汞的密度 318