T细胞受体的研究和应用PDF电子书下载

第一章 概述 1

第一节 免疫细胞 1

一、造血干细胞 1

二、淋巴细胞 2

（一）T淋巴细胞 2

（二）B淋巴细胞 6

三、抗原提呈细胞 9

（一）单核-巨噬细胞 9

（二）树突状细胞 10

四、NK细胞 11

（一）NK细胞表面标志及其作用 11

（二）NK细胞的识别模式 12

（三）NK细胞的受体 12

（四）NK细胞的杀伤靶细胞机制 12

（五）NK细胞的主要生物学功能 13

五、其他免疫相关细胞 13

（一）中性粒细胞 13

（二）嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和肥大细胞 14

（三）红细胞 14

第二节 免疫应答 15

一、免疫应答的类型 15

二、免疫应答的基本过程 15

三、抗原的处理及提呈 15

（一）MHC-Ⅱ类分子途径 16

（二）MHC-Ⅰ类分子途径 17

（三）MHC分子对抗原的交叉提呈现象 18

四、T细胞介导的免疫应答 18

（一）T细胞对抗原的识别 18

（二）T细胞的增殖和分化 19

（三）效应T细胞的作用机制 20

五、B细胞介导的免疫应答 21

（一）B细胞对抗原的识别 21

（二）Th细胞在B细胞免疫应答中的辅助作用 22

（三）B细胞在生发中心的分化成熟 23

六、体液免疫应答的一般规律 25

（一）初次应答 25

（二）二次应答 25

七、黏膜免疫应答 25

（一）黏膜伴随淋巴组织的结构特点 25

（二）分泌性IgA及其胞吞转运作用 26

第三节 T细胞发育与成熟 26

一、胸腺微环境 27

（一）分泌细胞因子和胸腺肽类分子 27

（二）细胞-细胞间相互接触 27

二、T细胞的分化成熟和胸腺选择 27

（一）T细胞的分化成熟 27

（二）胸腺中T细胞的选择 29

（三）γδ+T细胞 30

第四节 免疫突触与T细胞的活化 30

一、免疫突触的组成 31

二、免疫突触的形成 31

（一）T细胞的极化 31

（二）免疫突触的动态形成过程 31

三、免疫突触形成的影响因素 32

（一）TCR与免疫突触 32

（二）CD4与免疫突触 32

（三）脂筏与免疫突触 32

（四）细胞骨架与免疫突触 33

（五）共刺激分子与免疫突触 35

（六）其他分子与免疫突触的关系 36

（七）免疫突触与疾病 37

四、结语 37

第二章 T细胞受体 39

第一节 TCR概况 39

一、αβTCR的结构 39

二、γδTCR的结构 41

三、NKT细胞的抗原受体 43

（一）小鼠NKT TCR限制性选用特点 43

（二）人类NKT TCR限制性选用特点 44

第二节 TCR的抗原识别机制 45

一、TCR的抗原肽-MHC配体 45

二、TCR与抗原肽-MHC配体接触的印迹图谱 46

三、TCR-抗原肽-MHC复合物结构 47

四、同一TCR如何识别自身和异基因两种MHC 48

五、γδTCR的抗原识别 51

六、TC R突变与抗原识别 52

第三节 TC R基因结构，重排和多样性 53

一、TCRα、TCRβ、TCRγ和TCRδ基因结构 53

二、TC R基因重排和多样性 55

（一）TCR基因重排规律 55

（二）TCR基因重排启动机制 55

（三）TCR基因重排和多样性产生 58

（四）TCR基因多样性与T细胞克隆性 61

（五）TCR基因再次重排 62

（六）等位基因排斥 62

第四节 TCR基因的调控 64

一、TCR基因启动子和增强子 64

（一）TCR启动子 65

（二）TCR增强子 67

二、调控TC R基因启动子和增强子的转录因子 68

三、TCRαβ和TCRγδ定向分化的调控 69

（一）Eδ和Eα的开关作用 69

（二）转录因子的细胞系定向作用 69

（三）Notch信号途径的作用 69

（四）其他因素 70

四、V（D）J基因片段选用的调控 70

第五节 TCR基因删除重排 72

一、TCRδ基因删除 73

（一）TCRδ基因删除的特殊机制 73

（二）TCRδ基因优先删除重排片段 74

（三）δRec重排的优先比率 74

（四）δRec-ψJα-sjTRECs的形成原理和意义 75

（五）TCRVδ-Jα的删除重排 75

二、T-ALL细胞的TCRδ基因删除重排和特点 76

（一）T-ALL和T细胞株中δRec和ψJα基因片段的重排 76

（二）δRec-ψJα结合区 76

三、TCRβ基因删除重排 76

（一）Vβ-Dβ和Dβ-Jβ sjTRECs 76

（二）Dβ-Jβ重排优势利用的情况 77

（三）sjTRECs的连接区多样性 78

四、TCR基因删除重排的调控 79

（一）TCRδ删除重组酶复合物 79

（二）TEA 79

（三）PJA-BP 79

（四）肿瘤性T细胞TCRδ基因删除的调控 80

第六节 TCR独特型与T细胞肿瘤 81

一、TCR独特型 81

（一）独特型概念的提出 81

（二）独特型定义和分类 81

二、肿瘤性T细胞TCR独特型研究 82

（一）T-ALL中白血病T细胞的独特型TCR 82

第七节 TCR谱系选择与特异性免疫 85

一、概述 85

二、病毒免疫中TCR多样性的影响 87

三、肿瘤免疫中TCR谱系偏移 87

四、自身免疫中TCR谱系选择 89

五、影响TCR谱系偏移的因素 90

（一）自身MHC 90

（二）初始免疫应答 90

（三）持续抗原刺激 91

（四）个性和共性的TCR偏移的选择 91

六、TCR偏移的结构分析 91

第八节 高亲和力TCR的改构 94

一、概述 94

二、TCR CDR突变体 94

三、高亲和力TCR相关的可能分子机制 95

（一）CDR3β突变体 95

（二）CDR3α突变体 96

（三）CDR1α突变体 96

（四）CDR1β突变体 96

（五）CDR2α突变体 96

（六）CDR2β突变体 96

（七）Vα Glu1 Leu突变体 97

第九节 衰老与T细胞多样性变化 99

一、概述 99

二、年龄与T细胞动态平衡 99

三、年龄与胸腺活力 100

四、年龄与TCR多样性 100

第三章 TCR研究的应用 103

第一节 肿瘤抗原特异性CTL的研究和应用 103

一、肿瘤抗原特异性CTL的TCR谱系分布特点 103

二、肿瘤抗原特异CTL应用研究 105

（一）体外实验 105

（二）αβ+CTL的体内实验研究 108

（三）临床应用研究 108

三、γδ+CTL 110

四、NK T细胞 111

第二节 病毒特异CTL的研究和应用 114

一、EBV特异CTL 114

二、CML特异CTL 115

三、HIV特异CTL 116

四、HTLV特异CTL 116

五、HPV相关CTL 117

第三节 基于TCR基因重排分析细胞免疫功能缺陷和免疫重建 120

一、肿瘤病人T细胞免疫缺陷状态 120

（一）肿瘤病人T细胞谱系的限制性 120

（二）肿瘤病人胸腺输出功能变化 121

二、病毒感染患者T细胞免疫缺陷状态 121

三、基于TCR基因重排的免疫重建研究 122

（一）T细胞免疫重建评价指标 122

（二）肿瘤化疗后T细胞免疫重建研究 122

（三）造血干细胞移植后免疫重建 123

（四）HIV感染和AIDS病人T细胞免疫重建评价 125

第四节 TCR谱型分析与移植物抗宿主病和移植排斥反应 127

一、移植物抗宿主病 127

（一）αβ+T细胞克隆性增殖与GVHD 127

（二）γδ+T细胞克隆与GVHD 129

二、移植排斥反应 130

第五节 TCR谱型分析在自身免疫性疾病的发病机制和治疗性应用研究 132

一、系统性红斑狼疮 132

（一）实验动物模型研究 133

（二）临床研究 133

二、类风湿性关节炎 133

（一）RA相关的TCRαβ亚家族T细胞变化特点 133

（二）利用TCR基因谱系和克隆性分析鉴定RA相关的抗原 134

（三）分析HLA表型与TCR的相关性及发病易感性 134

（四）免疫抑制治疗与TCR基因谱系变化 134

（五）TCR疫苗 134

（六）γδ+T细胞变化特点 135

（七）RA动物模型研究 135

三、多发性硬化 136

（一）TCR基因多态性／HLA等位基因与MS的遗传易感性关系研究 136

（二）利用MBP多肽研究TCR特异克隆T细胞 136

（三）MS发病相关的TCR基因谱系选用特点 136

（四）动物模型研究 137

（五）TCR谱系检测判断临床治疗效果 137

（六）TCR疫苗的应用研究 137

四、重症肌无力 137

（一）TCR基因谱系特点 138

（二）动物模型实验研究 138

（三）转基因EAMG小鼠中TCR的选用特点 138

五、1型糖尿病 139

（一）基因组TCR基因多态性与自身免疫性糖尿病发生的易感性关系 139

（二）实验动物体内研究 139

（三）临床研究 140

六、甲状腺炎 140

（一）实验性自身免疫性甲状腺炎（EAT）动物模型 140

（二）AITDs病人TCR基因谱系改变特点 140

（三）体外研究 141

七、肾炎 141

（一）IgA肾病 141

（二）膜型肾炎 141

（三）其他自身免疫性疾病并发肾炎 141

八、脑膜炎 141

（一）EAE相关的TCR基因谱系分析 142

（二）TCR基因与EAE易感性 143

（三）EAE治疗性研究 143

九、肺结节病 144

十、再生障碍性贫血 144

十一、特发性血小板减少性紫癜 145

十二、骨髓增生异常综合征 145

十三、其他自身免疫性疾病 145

（一）心肌炎 145

（二）肝炎 146

（三）眼病 146

（四）神经炎 147

（五）血管炎 147

（六）胃炎 147

（七）皮肤病 147

（八）肠炎 147

（九）阵发性睡眠性血红蛋白尿 148

（十）自身免疫性溶血性贫血 148

第六节 TCR独特型疫苗与T细胞肿瘤治疗 152

一、概述 152

二、TCR独特型蛋白疫苗研究概况 153

三、TCR独特型DNA疫苗的研制和抗独特型免疫效应 153

四、TCR独特型DNA疫苗抗T细胞肿瘤效应的研究 154

第七节 抗原特异性TCR基因转导和应用 155

一、抗原特异性TCR 155

二、TCR基因转导技术和抗原识别模式改构 155

（一）TCR基因转导技术 155

（二）TCR基因修饰T细胞的特点 157

（三）增强TCR基因转导T细胞生物学活性 158

（四）TCR基因转导T细胞治疗的安全性 160

三、TCR基因转染T细胞的应用前景 161

（一）恶性肿瘤特异性过继性免疫治疗 161

（二）抗病毒特异免疫治疗 164

（三）自身免疫性疾病的发病机制和免疫调节治疗研究 165

四、TCR基因转导T细胞的应用前景和存在问题 165

第八节 定量分析δRec-ψJα-sjTRECs的应用 169

一、评价HIV感染和AIDS免疫重建特点 169

二、评价肿瘤患者胸腺输出功能 170

三、了解造血干细胞移植后细胞免疫重建情况 170

四、TRECs水平与GVHD相关性 170

五、定量分析TRECs用于评价免疫因子疗效 171

第九节 TCR基因位点断裂与重排的研究及其意义 173

一、概述 173

二、染色体易位相关癌基因在T-ALL的发病机制中作用 174

第十节 TCR基因重排分析在微小残留病检测中的应用 175

一、概述 175

二、血液肿瘤中TCR基因重排的检测和应用 176

（一）独特型TCR基因在监测T细胞肿瘤MRD中的应用 176

（二）独特型TCR基因在监测非T细胞肿瘤MRD中的应用 176

（三）缓解期特点和残留病变检测 177

（四）TCR基因重排分析在造血干细胞移植后早期复发的监测 178

（五）克隆演变分析 178

三、检测方法选择和评价 178

第四章 TCR相关研究与应用 181

第一节 TCRζ基因 181

一、TCRζ链基因和分子结构 181

（一）TCRζ链的结构 181

（二）TCRζ基因和异构体 181

二、TCRζ链生物学功能 182

三、TCRζ链参与T细胞跨膜信号转导的机制 182

第二节 TCRζ基因分析的意义和应用 183

一、TCRζ链的异常表达与疾病 184

（一）实体肿瘤 184

（二）自身免疫性疾病 184

（三）感染性疾病 184

（四）血液系统疾病中TCRζ链的表达情况 184

二、TCRζ链的重建 185

（一）白细胞介素2（IL-2） 185

（二）CD3／CD28单抗 185

（三）L-精氨酸 185

（四）地塞米松 185

（五）肿瘤坏死因子α（TNF-α） 185

（六）基因治疗 186

第三节 TCR转基因动物的研究和应用 187

一、概述 187

二、TCR转基因小鼠模型的研究和应用 188

（一）BDC2.5 TCR转基因小鼠或Iio／TCR转基因小鼠（Iio／BDC2.5） 188

（二）BM3.3 TCR转基因小鼠 188

（三）K／BxN TCR转基因小鼠 188

（四）D011.10小鼠 188

（五）MBP-TCR转基因鼠 188

三、“重组TCR基因”小鼠 190

第四节 实验动物中胸腺近期输出功能特点 191

一、概述 191

二、不同小鼠sjTRECs水平的测定 191

三、灵长类动物sjTRECs水平的测定 191

四、实验禽类sjTRECs的测定 192

第五节 细菌超抗原与TCR-MHC关系及其意义 192

一、超抗原的特点 193

二、超抗原的生物学特点 193

三、超抗原与MHC-Ⅱ类分子的关系 194

四、SEA与T细胞受体（TCR）的关系 195

第六节 T细胞刺激因子诱导TCR Vβ亚家族T细胞的增殖特点 197

一、抗CD3单克隆抗体诱导的TCR Vβ亚家族T细胞的增殖特点 197

二、IL-2诱导的TCR Vβ亚家族T细胞的增殖特点 198

三、有丝分裂原诱导的TCR Vβ亚家族T细胞的增殖特点 198

第七节 职业病易感性研究中TCR基因重排的应用 199

一、概述 199

二、T细胞受体谱系分析在职业接触苯工人中的应用 199

三、胸腺近期输出功能分析在职业病分析的应用和意义 200

第五章 TCR相关检测方法 202

第一节 TCR表型检测 202

第二节 TCR亚家族T细胞分选 204

第三节 TCR基因谱系表达检测 206

第四节 TCR CDR3多样性检测和序列分析 209

第五节 T细胞受体重排删除环定量分析 213

第六节 TCR β链基因重排删除DNA环的检测 217

第七节 TCR ζ链定量检测和突变分析 234

第八节 抗原特异TCR α／β基因克隆和双基因表达载体的构建 236

第九节 TCR转基因方法 238

第十节 TCR转基因动物技术 243

第十一节 可溶性MHC-肽四聚体检测抗原特异性CTL方法 246

第十二节 涉及TCR基因位点染色体易位的基因重排检测 250

第十三节 TCR基因序列比对和提交基因库 252

第十四节 TCR独特型DNA疫苗的构建和检测 259

英文缩略语与中文对照 265