酶学实验手册 原著第2版PDF电子书下载

1 概述 4

2 酶学分析的一般特性 4

2.1 酶学实验的基本要求 4

2.2 酶学测定必须遵循什么？ 6

2.2.1 反应级数 6

2.2.2 酶学反应级数的重要性 8

2.2.3 酶反应速率的测定 10

2.2.4 米氏方程 22

2.2.5 酶的抑制 25

2.2.6 多底物反应 30

2.2.7 酶学实验的必要条件 32

2.3 仪器方面 45

2.3.1 光谱方法 45

2.3.2 电化学方法 62

2.3.3 放射性标记法 65

2.3.4 其他方法 65

2.4 偶联酶反应理论 66

2.4.1 双偶联酶反应 66

2.4.2 三偶联反应 69

2.5 底物测定 69

2.5.1 终点法 70

2.5.2 偶联酶反应的底物测定 71

2.5.3 动力学方法测定底物 71

2.5.4 酶的循环 72

3 酶学检测实验 75

3.1 酶的命名 75

3.2 酶实验操作中的注意事项 77

3.3 特殊酶实验 80

3.3.1 氧化还原酶，EC 1 80

3.3.2 转移酶，EC 2 116

3.3.3 水解酶，EC 3 130

3.3.4 裂解酶，EC 4 166

3.3.5 异构酶，EC 5 173

3.3.6 连接酶类（合成酶），EC 6 177

3.3.7 多酶复合体的检测 180

3.3.8 底物测定 185

3.4 酶性质的测定 188

3.4.1 蛋白质定量 188

3.4.2 磷酸测定 199

3.4.3 糖蛋白测定 200

3.4.4 蛋白质与二甲基辛二硝酸二盐酸酯交联 201

3.4.5 酶溶液浓缩 202

3.5 酶免疫测定 207

3.5.1 放射性免疫测定 207

3.5.2 非竞争固相酶免疫测定 208

3.5.3 竞争固相酶免疫测定 208

3.5.4 酶免疫测定方法及固定化技术 210

4 结合测定 215

4.1 不同类型的结合 215

4.1.1 总论 215

4.1.2 如何识别专一可逆性结合？ 216

4.1.3 实验方面 217

4.2 利用大小差异的结合测定 219

4.2.1 平衡透析 220

4.2.2 结合实验评估 224

4.2.3 超滤 225

4.2.4 凝胶过滤 225

4.2.5 超速离心 226

4.3 光谱法 227

4.3.1 示差分光法 228

4.3.2 荧光分光法 233

4.4 其他结合测定法 237

4.4.1 放射性标记法 237

4.4.2 表面等离子共振法 237

5 酶的技术应用 239

5.1 酶的固定化模式 239

5.1.1 吸附法 240

5.1.2 包埋法 241

5.1.3 微囊法 241

5.1.4 交联法 242

5.1.5 固相载体共价固定法 243

5.2 酶的固定化实验 245

5.2.1 尼龙珠微量包埋 245

5.2.2 聚丙烯酰胺包埋 246

5.2.3 玻璃表面共价固定化 247

5.2.4 可控孔洞玻璃表面共价固定化 249

5.2.5 聚酰胺共价固定化 251

5.2.6 聚酯固定化 255

5.2.7 对苯甲磺酰氯辅助的碱性水解、活化与固定化 257

5.2.8 羰基二咪唑参与的碱解、活化与固定化 258

5.3 固定化酶的分析 259

5.3.1 通则 259

5.3.2 固定化酶的连续光度测定 260

5.3.3 与固定化酶反应的辅助因子 261

5.4 酶反应器 262

5.4.1 批式反应器（搅拌罐式反应器） 263

5.4.2 膜反应器 263

5.4.3 固定床反应器 263

5.4.4 固定化细胞 264

5.5 生物传感器 264

5.5.1 酶电极 264

5.5.2 免疫电极 267

5.5.3 其他生物传感器 267

5.6 固定化酶用于治疗 268