细胞生物学实验 第4版PDF电子书下载

第一篇 显微镜技术 2

第一章 光学显微镜及其使用 2

实验一 普通光学显微镜及其使用 2

实验二 特殊光学显微镜及其使用 6

Ⅰ．暗视野显微镜 7

Ⅱ．相差显微镜 8

Ⅲ．偏振光显微镜 10

Ⅳ．微分干涉差显微镜 12

Ⅴ．荧光显微镜 14

实验三 激光扫描共聚焦荧光显微镜和双光子激光扫描荧光显微镜 18

Ⅰ．激光扫描共聚焦荧光显微镜 18

Ⅱ．双光子激光扫描荧光显微镜 21

第二章 电子显微镜及其使用 27

实验四 透射电子显微镜术 27

Ⅰ．透射电子显微镜的原理与操作 27

Ⅱ．透射电子显微镜超薄切片样品制备 31

实验五 扫描电子显微镜术 43

Ⅰ．扫描电子显微镜的原理、用途与使用方法 43

Ⅱ．扫描电子显微镜样品制备 46

第二篇 基础性实验 52

第三章 细胞形态结构和生理活动 52

实验六 细胞显微结构观察 52

实验七 细胞器的活体染色与观察 54

Ⅰ．高尔基体活体染色与观察 56

Ⅱ．内质网活体染色与观察 57

Ⅲ．液泡和溶酶体活体染色与观察 57

Ⅳ．线粒体活体染色与观察 58

Ⅴ．细胞核活体染色与观察 59

实验八 植物液泡观察、分离纯化及H＋-ATPase活力测定 60

实验九 叶绿体的分离、纯化及荧光观察 64

实验十 细胞骨架组分的荧光标记定位 67

Ⅰ．微丝的直接荧光标记定位 67

Ⅱ．微管的间接免疫荧光定位 70

实验十一 细胞膜的渗透性 73

实验十二 细胞凝集反应 75

实验十三 细胞生死状态的鉴别 78

实验十四 细胞自噬的诱导及检测 82

实验十五 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能检测 86

实验十六 植物内源H2S、NO和ROS的原位检测 89

第四章 细胞分裂与染色体分析 93

实验十七 动物细胞有丝分裂及染色体标本制备 93

实验十八 植物细胞有丝分裂及染色体标本制备 96

Ⅰ．常规压片法制备植物细胞染色体标本 97

Ⅱ．去壁-低渗火焰干燥法制备植物细胞染色体标本 99

实验十九 人外周血淋巴细胞培养及其染色体分带与核型分析 101

实验二十 人类染色单体色差分析技术 105

实验二十一 荧光原位杂交定位 108

Ⅰ．端粒序列的荧光原位杂交 108

Ⅱ．5S、18S rDNA和SSR在黑麦中期染色体上的荧光原位杂交 111

实验二十二 减数分裂观察与染色体标本制备 114

Ⅰ．植物花粉母细胞减数分裂观察 114

Ⅱ．动物生殖细胞减数分裂观察与染色体标本制备 117

实验二十三 细胞分裂异常与染色体畸变 120

Ⅰ．植物细胞分裂异常与染色体畸变 120

Ⅱ．肿瘤细胞有丝分裂异常与染色体畸变 123

第三篇 综合性与设计性实验 128

第五章 细胞培养与细胞工程 128

实验二十四 植物组织培养（设计性实验） 128

实验二十五 动物细胞培养 132

实验二十六 体外培养细胞的冻存、复苏和活力测定 137

实验二十七 细胞计数与计量 140

Ⅰ．用台盼蓝排染法进行细胞计数 141

Ⅱ．用MTT法进行细胞计量 142

Ⅲ．用SRB法进行细胞计量 143

实验二十八 培养细胞生长曲线绘制和有丝分裂指数的测定 145

Ⅰ．细胞生长曲线的测定 146

Ⅱ．培养细胞有丝分裂指数的测定 147

实验二十九 细胞迁移分析——划痕实验（设计性实验） 149

实验三十 动物细胞融合 152

实验三十一 小鼠胚胎干细胞培养及体外诱导分化 155

实验三十二 动物细胞显微注射技术 159

第六章 细胞周期与细胞凋亡 164

实验三十三 动物细胞周期检测 164

实验三十四 细胞同步化 166

实验三十五 植物细胞周期检测 169

实验三十六 植物根尖细胞有丝分裂高频同步化诱导 172

实验三十七 抗癌药物对肿瘤细胞增殖的影响（设计性实验） 174

实验三十八 细胞凋亡的诱导、形态学观察及生化特征检测（设计性实验） 178

Ⅰ．细胞凋亡的诱导与形态学观察 178

Ⅱ．细胞凋亡的生化特征检测 181

实验三十九 单细胞凝胶电泳检测细胞中DNA链的断裂 183

第七章 细胞的遗传转化、基因编辑及蛋白质互作 187

实验四十 哺乳动物细胞转染技术 187

实验四十一 植物原生质体的分离及外源基因的瞬时表达 189

实验四十二 GUS和GFP报告基因在植物组织中的表达及其检测 192

实验四十三 哺乳动物细胞基因的定向敲除——CRISPR-Cas9技术 195

实验四十四 蛋白质分子互作的体外检测——酵母双杂交技术 201

实验四十五 细胞内蛋白质分子互作检测——双分子荧光互补技术 205

附录 210

附录1 细胞生物学实验室注意事项 210

附录2 实验报告的书写要求 211

附录3 实验室器具的清洁和灭菌 214

附录4 显微镜物镜常用的一些符号说明 215

附录5 离心机转数与离心力换算表及公式 217

附录6 试剂浓度的表示法及其计算 218

附录7 部分动、植物及人的染色体数目 220

附录8 常用缓冲液的配制 221

附录9 荧光染料参数 226

附录10 细胞器常用特异荧光探针和抗原 229

附录11 常用培养用液的配制 230

附录12 常用细胞生物学词汇 233