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实验总则 1

第一篇 基础免疫学实验 5

第一章 抗体的制备技术 5

第一节 多克隆抗体制备 5

第二节 单克隆抗体制备 9

第三节 蛋白质的分离纯化 15

第二章 抗原抗体反应 19

第一节 凝集类实验 19

第二节 沉淀类实验 28

第三节 免疫浊度实验 39

第三章 免疫酶测定技术 42

第一节 酶标记抗体的制备 42

第二节 酶联免疫吸附实验 43

第三节 酶免疫组化技术 51

第四章 放射性免疫标记技术 53

第一节 抗原放射性核素标记 53

第二节 放射免疫分析技术 55

第三节 免疫放射分析 57

第四节 生物合成过程的标记 58

第五章 免疫荧光技术 60

第一节 直接免疫荧光法测抗原 60

第二节 间接免疫荧光法测抗体 62

第六章 金免疫技术 64

第一节 胶体金与免疫金的制备 64

第二节 斑点金免疫渗滤实验 66

第三节 斑点免疫层析实验 68

第四节 免疫金（银）光镜染色技术 69

第五节 免疫金电镜染色技术 70

第七章 补体的测定与补体结合实验 73

第一节 血清补体总活性测定 73

第二节 补体旁路活化途径的溶血活性（ACH50）测定 75

第三节 补体单个成分的测定 76

第四节 补体结合实验 78

第八章 化学发光免疫分析技术 80

第一节 发光酶免疫测定 80

第二节 化学发光免疫测定技术 82

第三节 电化学发光免疫测定技术 84

第四节 酶标记化学发光法测AFP 86

第九章 免疫印迹 88

第一节 蛋白质抗原电泳分离 88

第二节 蛋白质的转膜 94

第三节 免疫检测 98

第四节 蛋白印迹在免疫学中的应用 101

第五节 DNA印迹 103

第六节 RNA印迹 109

第七节 蛋白印迹 117

第八节 免疫染色 126

第十章 免疫细胞分离 146

第一节 外周血单个核细胞的分离 146

第二节 白细胞低渗分离法 148

第三节 T细胞分离 151

第四节 B细胞的磁珠分离法 153

第五节 中性粒细胞分离 155

第六节 单核细胞的分离 156

第十一章 免疫细胞与细胞因子测定技术 159

第一节 淋巴细胞转化试验——形态学检测法 159

第二节 T淋巴细胞增殖实验——MTT法 161

第三节 溶血空斑实验 163

第四节 炎症介质释放实验 164

第五节 细胞因子生物学活性检测法 166

第六节 细胞因子mRNA的检测（RT-PCR法） 174

第七节 细胞因子免疫学检测法——ELISA法 177

第八节 细胞因子检测试剂盒简介 178

第十二章 细胞体外培养方法 180

第一节 细胞培养简介 180

第二节 常见器械的准备 181

第三节 常用培养液的配制 183

第四节 常见体外细胞的培养方法 184

第五节 细胞的计数、分装与培养 185

第十三章 流式细胞技术及其应用 190

第一节 流式细胞仪简介 190

第二节 流式细胞术在免疫学检查中的应用 192

第三节 流式细胞仪的分析及分选原理 196

第四节 流式细胞仪数据的显示与分析 202

第五节 流式细胞仪免疫检测样品制备 206

第六节 免疫分析中常用的荧光染料与标记染色 208

第七节 流式细胞术分析淋巴细胞亚群 212

第八节 MultiSET四色免洗淋巴细胞亚群的绝对计数 216

第九节 HLA-B27分析和软件操作 217

第十节 细胞DNA测定 218

第十一节 流式细胞术检测胞内抗原 219

第十四章 非特异免疫功能测定 222

第一节 中性粒细胞吞噬率与吞噬指数测定 222

第二节 白细胞杀菌能力测定 223

第三节 中性粒细胞硝基四氮唑蓝（NBT）还原实验 224

第四节 小白鼠碳粉廓清实验 226

第五节 溶菌酶测定法 227

第六节 巨噬细胞吞噬功能检测法 229

第七节 NK细胞活性的检测 233

第十五章 分子生物学技术 236

第一节 PCR 236

第二节 反转录PCR 246

第三节 实时荧光定量PCR 254

第二篇 临床免疫学技术 262

第十六章 感染性疾病的免疫学检测 262

第一节 抗链球菌溶血素“O”抗体测定 262

第二节 TORCH抗体测定 263

第三节 甲型肝炎病毒IgM抗体测定 265

第四节 梅毒螺旋体血清学检测 266

第五节 轮状病毒感染的免疫学检测 268

第十七章 自身免疫性疾病的免疫学检测 270

第一节 类风湿因子测定 270

第二节 抗核抗体测定 272

第三节 抗双链DNA抗体测定 273

第四节 ENA抗体测定 277

第五节 抗组蛋白抗体测定 278

第六节 抗乙酰胆碱受体抗体测定 279

第七节 抗甲状腺球蛋白抗体的测定 281

第十八章 免疫缺陷性疾病的免疫学检测 283

第一节 外周血CD4＋和CD8＋T细胞检测 283

第二节 HIV蛋白的检测 284

第十九章 肿瘤与免疫增殖疾病的免疫学检验 290

第一节 肿瘤标志物的检测 290

第二节 肿瘤抗体的检测 292

第三节 血清中异常免疫球蛋白的检测 293

第二十章 超敏反应性疾病的免疫学检测 297

第一节 特异性过敏原体外实验检测方法 297

第二节 特异性过敏原体内检测方法 309

第三节 变应原浸液制备的工艺流程 320

附录一 实验动物 329

第一节 实验常用动物 329

第二节 实验动物的抓取与固定 331

第三节 动物接种技术 333

第四节 实验动物采血技术 334

第五节 实验动物的处死 336

附录二 部分免疫学实验仪器设备使用简介 338

附录三 免疫学实验常用试剂及配制方法 351

附录四 医学免疫学理论与技术在蒙医药研究中的应用 358