生化实验方法和技术PDF电子书下载

实验一 铜试剂法测定还原糖 1

第一章 糖 1

实验二 费林试剂法测定还原糖 6

实验三 3，5-二硝基水杨酸比色定糖法 9

实验四 细菌细胞壁糖的薄层层析 11

实验五 葡糖-1-磷酸的制备及其纯度测定 17

实验六 红细胞膜的制备及其结构成分的分析 21

一 红细胞膜的制备 21

第二章 脂类 21

二 膜蛋白的分析(SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法) 23

三 膜磷脂的分析(薄层层析法) 24

四 膜胆固醇的测定 26

实验七 猪心肌线粒体、亚线粒体的制备及可溶性腺三磷酶的提纯 28

实验八 猪心线粒体腺三磷酶复合体在脂质体上的重组 32

第三章 蛋白质 37

实验九 苯甲酰L-酪氨酰胺的合成 37

实验十 N-乙酰-L-酪氨酸乙酯的合成 41

实验十一 双甘二肽的合成 44

实验十二 胱氨酸的制备 48

实验十三 量气法测定氨基酸--Van Slyke仪测定α-氨基氮 51

实验十四 总氮量的测定--微量凯氏定氮法 55

实验十五 蛋白质中色氨酸含量的测定 60

实验十六 蛋白质及肽的N-末端氨基酸DNS分析法--聚酰胺薄膜层析技术 62

实验十七 蛋白质及肽的顺序分析--PTH分析法 67

实验十八 蛋白质及肽的N-末端氨基酸FDNB分析法 71

实验十九 邻苯二甲醛荧光分析法及其在肽检测中的应用 80

实验二十 血清蛋白质的纸上电泳 83

实验二十一 血清脂蛋白的琼脂糖凝胶电泳 90

实验二十二 聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳分离蛋白质 94

实验二十三 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量 112

实验二十四 聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳法测定蛋白质的分子量 119

实验二十五 蛋白质分子量的测定--凝胶层析法 124

实验二十六 细胞色素c的制备及测定 133

实验二十七 鸡卵类粘蛋白的制备 138

第四章 酶 143

实验二十八 脲酶的动力学研究 145

〔附〕康维微量等温蒸馏定氨法 152

实验二十九 酰化酶Ⅰ的制备和活力测定 155

实验三十一 从生产胰岛素后的猪胰残渣中制备胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶 157

〔附1〕氨基酸含量的测定法：茚三酮溶液显色法，甲醛滴定法 160

〔附2〕蛋白质含量的测定法：双缩脲法，Folin-酚试剂法，紫外吸收法 164

实验三十 猪胰蛋白酶的结晶和活力测定 169

实验三十二 辣根过氧化物酶的制备和活力测定 179

实验三十三 结晶乳酸脱氢酶的制备 183

实验三十四 大肠杆菌碱性磷酸酯酶的制备 188

实验三十五 羧肽酶Y的分离提纯 195

实验三十六 限制性内切酶EcoRI的纯化和活力测定 201

实验三十七 亲和层析法纯化胰蛋白酶 206

实验三十八 亲和层析法分离牛脾二肽酶Ⅰ 209

第五章 核酸 216

实验三十九 动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定 216

〔附1〕紫外吸收法测定核酸含量 218

〔附2〕二苯胺显色法测定DNA含量 219

〔附3〕地衣酚显色法测定RNA含量 220

〔附4〕定磷法测定核酸含量 221

实验四十 酵母和白地霉RNA的制备(稀碱法和浓盐法) 224

实验四十一 酵母转移RNA的制备(苯酚法) 225

实验四十二 小牛胸腺DNA的制备(浓盐法) 227

实验四十三 质体的分离、纯化和鉴定 229

实验四十四 细胞核的分离 239

实验四十五 大鼠肝细胞染色质的分离 242

实验四十六 RNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳 244

实验四十七 DNA的琼脂糖凝胶电泳 247

实验四十八 离子交换柱层析分离核苷酸 251

实验四十九 高压纸上电泳法分析鉴定核苷酸 255

实验五十 肌二磷和胞二磷的化学合成 258

第六章 组织代谢 265

实验五十一 瓦氏呼吸计测压法及组织呼吸强度的测定 265

一 瓦氏呼吸计测压法 265

二 组织耗氧量的测定 271

实验五十二 D-系-α-氨基酸的氧化脱氨基作用 276

〔附〕等温蒸馏定氨法 280

实验五十三 用液氮固定法研究动物的新陈代谢--自然缺氧条件下机体乳酸含量变化的测定 281

实验五十四 用滤纸定量层析法研究大白鼠在自然缺氧状态下脑组织中游离氨基酸含量的变化 288

第七章 免疫化学 300

实验五十五 免疫吸附亲和层析法分离、纯化甲胎蛋白 301

实验五十六 免疫电泳技术 310

一 双向免疫扩散法 311

二 微量免疫电泳 313

三 对流免疫电泳 315

四 单向定量免疫电泳(火箭电泳) 316

五 双向定量免疫电泳 318

实验五十七 用免疫荧光法观察甲胎蛋白在人胚肝中的分布 319

第八章 放射性同位素 325

实验五十八 放射性焦磷酸盐(32PPi)的制备 333

实验五十九 酶促合成高比放射性γ-32磷-腺三磷 337

实验六十 放射性焦磷酸(32PPi)-腺三磷交换法测定核糖核酸连接酶活性 342

实验六十一 寡核苷酸的同系层析分离及鉴定 344

(二) 实验室灭火法 350

(一) 实验室安全知识 350

一 实验室安全及防护知识 350

附录 350

(三) 实验室急救 351

二 实验室常识 352

三 玻璃仪器的洗涤及各种洗液的配制法 354

四 一些重要仪器的使用法 355

(一) 酸度计 355

(二) 分光光度计 358

1. 72型分光光度计 358

2. 751型分光光度计 360

(三) 部分收集器及紫外检测仪 362

(四) 荧光分光光度计 364

(五) 冰冻离心机 365

五 缓冲溶液 369

(一) 一些常用作缓冲剂的化合物的酸解离常数 370

(二) 常用缓冲溶液的配制方法 371

六 生物化学中某些重要化合物的分子量及pK值 376

七 某些重要生化物质的克分子消光系数 377

八 氨基酸的一些物理常数 380

九 某些蛋白质的物理性质 382

十 核苷、核苷酸及其衍生物的一些物理常数 382

十一 某些生物大分子、亚细胞器及微生物的沉降系数 388

十二 指示剂 389

十三 冷却剂和干燥剂 390

十四 层析法常用数据表 392

(一) 离子交换纤维素 392

(二) 常用离子交换树脂某些物理化学性质表 393

(三) 各类常用离子交换树脂型号对照表 396

(四) 葡聚糖凝胶的某些技术数据 397

(五) 聚丙烯酰胺凝胶的技术数据 397

(六) 琼脂糖凝胶的技术数据 398

(七) 各种凝胶所允许的最大操作压 398

十五 硫酸铵饱和度的常用表 399

十六 测压法常用物理常数表 400

十七 放射性测量单位 401

十八 离心机转数(rpm)与相对离心力(RCF)的换算 402

十九 试剂的配制及一些常用数据表 403

(一) 一般注意事项 403

(二) 常用数据表 404

1. 元素的原子量表 404

2. 常用酸碱百分浓度、比重和当量浓度的关系 406

3. 实验室中常用酸碱的比重和浓度的关系 407

4. 常用固态化合物的当量浓度(或克分子浓度)配制参考表 407

6. 常用基准物质的干燥温度和应用范围 408

5. 一些常用化合物的溶解度(20℃) 408

7. 某些有机溶剂的主要物理常数 409

二十 一些常用单位 409

(一) 长度单位 409

(二) 体积单位 410

(三) 重量单位 410

(四) 摩［尔］数与摩［尔］浓度表示法 410

(五) 十进位数量词头及符号 411

二十一 一些重要的生物化学期刊及手册 411