重组DNA简明篇PDF电子书下载

第一章 确定基因在细胞中的功能 19

1．细胞是生命基础的建材 20

2．细胞是有扩充性的小工厂其能同时合成数千种不同的分子 20

3．细胞中的分子可分为大小两种 20

4．专一性的细胞触媒称为酶类有效地决定细胞中的化学反应 21

5．特定蛋白质的聚肽链系由特殊的胺基酸排列而成 22

6．有功能的酶类系由聚肽链依照精确的摺叠而成 23

7．促使分子至高能状态以增进其化学反应能力 24

8．细胞的代谢作用可经由代谢图说明 25

9．酶类不能决定聚肽链中胺基酸的顺序 25

10．孟德尔的豌豆育种试验最先发现基因的分离性 26

11．染色体携带细胞的遗传物质 26

12．一基因一蛋白假说 30

第二章 DNA是基本的遗传物质 32

1．仅染色体上有DNA 32

2．细胞含有DNA及RNA 33

3．发现能测定遗传分子的生物分析方法 34

4．病毒是一种能够从一个细胞移至另一个细胞的一包遗传因子 36

5．在形体上能够互相配合的分子相互吸引 36

6．DNA直径的确定 38

7．DNA及RNA上的核苷酸由规则的5′→3′磷酸二脂键连结在一起 38

8．不同生物体DNA的氮基组成有很大的差异 39

9．DNA具有高度规则的形状 40

10．DNA的基本单位为二条互相缠绕的聚核苷酸链（双螺旋） 41

11．双螺旋藉氮基对间的氢键结合在一起 41

12．DNA两股的配对性成为其自行复制的核心 43

13．DNA於复制时分成两股的证据 45

14．DNA分子不仅可变性也可复原 45

15．G-C氮基对较A-T对不易分开 46

16．倒置重复段落可促进单股DNA上氮基间的氢键 46

17．5-甲基胞嘧啶可取代DNA中的胞嘧啶 46

18．含单一DNA分子的染色体 47

19．病毒为均一性DNA分子的来源 48

20．λ噬菌体DNA能并入大肠菌染色体的特定位置 49

21．不正常转运噬菌体能提供细菌染色体的独特段落 50

22．质体为能自行复制的迷你染色体 51

23．环状DNA分子可能为超螺旋形态 52

24．大部份双螺旋结构为右转的状态，但在特殊情况某些DNA的核苷酸序列使DNA变为左转 54

第三章 遗传密码的阐释 59

1．鉴定突变血红蛋白分子中胺基酸的取代现象 59

2．精密结构遗传学的发展 60

3．基因及其聚肽产物有一对一的排列顺序 61

4．RNA携带DNA的讯息至细胞质中供蛋白质的合成 61

5．胺基酸在RNA模版上如何排列？ 62

6．酶类及模版在核酸及蛋白质合成时的功用 63

7．蛋白质合成的顺序系自N-末端到C-末端 64

8．参与蛋白质合成的RNA有三种 64

9．遗传学证明译码由三个氮基组合而成 68

10．RNA链以5′→3′方向合成及转译 68

11．人工合成的携讯RNA可用以测定译码的性质 68

12．基因密码的性质至1966年6月已完全明瞭 69

13．「摇晃」经常使单一的转运RNA认识多个的译码 70

14．基因密码的普遍性如何？ 70

15．一般基因至少含有1,200个氮基对 71

16．阻遏性的转运RNA会误译遗传密码 71

17．DNA含有合成特定RNA分子的起始及终止信号 73

18．利用外来mRNA从事活体外的转译作用已有更精确的系统 73

第四章 控制基因表现的遗传因子 78

1．压抑体控制诱致性酶类的合成 78

2．具有相关功能的细菌基因组成操纵基因群 80

3．促进因子为RNA合成的开始信号 80

4．固定性地合成压抑体分子 81

5．压抑体已获得分离及鉴定 81

6．基因转录的积极节制 83

7．衰减作用 83

8．转译的控制 85

9．早期探测高等动植物中基因节制作用的困难 86

10．Xenopus核糖体RNA基因的纯化 87

11．真核细胞的mRNA有头盖及尾部 88

12．真核生物有三种不同的RNA聚合酶 89

13．真核细胞的DNA组织成为核仁小体 90

14．动物的病毒为高等细胞中基因表现的模式系统 90

15．RNA肿瘤病毒藉双股DNA中间产物复制 91

第五章 制造重组DNA分子的方法 95

1．核酸序列分析方法的确定 95

2．限制酶剪切DNA上特定的位置 96

3．限制座分布图十分地专一性 97

4．限制酶分解产生的片段导致DNA序列分析新方法的产生 100

5．小段聚核苷酸可用化学法合成 102

6．Eco RI分解产生的段落含有黏尾（凝聚末端） 104

7．许多酶类参与DNA的复制 106

8．黏尾可利用酶类添加於齐平末端的DNA分子上 106

9．小质体为选殖外来基因的媒介 108

11．科学家们认为无限制的基因选殖具有危险性 110

10．高等生物的DNA也可作分子阶层的分析 110

12．Asilomar会议制定重组DNA的方针 112

第六章 选殖基因的分离 114

1．发展「安全的」细菌及质体媒介 114

2．为何利用抗药性质体？ 115

3．选殖基因的的探测核酸 116

4．反讯息 DNA 的合成及选殖 117

5．鉴定含有特定反讯息DNA的纯系 120

6．选殖基因组段落於λ噬菌体中 122

7．凝聚质体能选殖较大的外来DNA片段 124

8．染色体拼接法用於长段真核DNA的分析 124

9．选殖外来DNA於M13噬菌体中便利於以Sanger法作序列的分析 127

10．Southern 及 Northern 斑迹杂合法 127

11．制造稀少蛋白质的基因之选殖法 130

12．利用小段聚核苷酸为探测核酸以筛选基因集合库 132

13．利用电脑组合反讯息DNA的种类 132

14．利用表现媒介分离特定的真核反讯息DNA 133

15．利用免疫筛选法测定表现媒介的产物 136

第七章 真核基因料想不到的复杂现象 140

1．发现分裂基因 140

2．释出段与干扰段的边界含有特定的氮基序列 143

3．自主叠接现象的发现 145

4．第一个经过完全序列分析的哺乳类基因 145

5．DNA中无终止信息的转录架构代表蛋白质的密码区域 146

6．领导序列在分泌蛋白质的氨基端 147

7．干扰段有时标明有功能性蛋白质的范围 147

8．一基因经过不同的叠接途径会产生不同的mRNA 149

9．一基因的管制区域在基因的5′及 3′末端 150

10．一串基因群中可能含有在演化中发生退化的遗迹 151

11．基因族可藉mRNA分子的逆转录作用而扩大 152

12．真核DNA中散布有重复的序列 152

13．前驱聚肽产生蛋白质贺尔蒙 154

第八章 活体外的致变作用 159

1．缺失作用 159

2．插入作用 162

3．取代作用：胞嘧啶的脱氨基反应 164

4．取代作用：核苷酸类似物的并入 166

5．取代作用：核苷酸错误的并入 166

6．利用已确定序列的小段聚核苷酸制造突变种 168

第九章 抗体基因系由生殖细胞的DNA段落重排而形成 173

1．确定抗体分子的基本构造 173

2．V及C段落被怀疑系由不同的基因转录而成 174

3．利用mRNA探测核酸证实V及C基因接合之理论 174

4．自骨髓癌细胞分离具有功能的抗体基因 175

5．胚胎细胞为未接合V及C基因的来源 176

6．许多J（连接）段落附着在基因组C（固定）段落上 177

7．DNA上三个不连续的区域控制抗体重链上胺基酸的组合 177

8．一个DNA消除事件造成一个VH基因与两个不同的CH基因的结合 178

9．交替的叠接使单一的细胞能够制造含有相同的VH段落的μ及δ级重链 179

10．体细胞的突变为形成免疫血球素种类益为繁多的因素 179

11．利用基因选殖法确定主要的组织一致性复合蛋白质基因及其抗体蛋白质的基因 181

第十章 致瘤病毒 185

2．SV40及多性瘤病毒的瘤蛋白质 186

1．致瘤病毒DNA合并於寄主染色体内後的选殖方法 186

3．包被SV40及多性瘤病毒染色质的结构蛋白质系由重叠基因制成 188

4．合成SV40与多性瘤病毒早期及晚期基因的mRNA时系使用不同的控制信号 190

5．SV40及多性瘤病毒的DNA复制始点涵盖大约100个氮基对的区域 190

6．RNA致瘤病毒（逆转录病毒）的复杂结构 191

7．高度致瘤性的逆转录病毒含有特殊的致瘤序列 192

8．前驱病毒与其RNA基因组有相同的基因顺序 193

9．前驱病毒的LTR含有合成RNA的促进因子 193

10．逆转录病毒的致瘤基因经常为制造蛋白质激酶的基因 194

11．细胞中的正常基因是逆转录病毒致瘤基因的来源 195

12．逆转录病毒的致瘤基因系正常细胞基因的过份表现抑是错误表现尚待证明 196

13．弱致瘤性的逆转录病毒能诱致癌症 197

14．致癌一般性的理论 197

第十一章 移动基因 202

1．移位因子在移位时需产生另一个移位因子 203

2．移动遗传因子可能是所有生物皆备的物体 205

3．利用移位因子从事果蝇胚胎的遗传工程 206

4．分离玉米的Ds移位因子 209

5．RNA致瘤病毒的基因组是否由移动遗传因子演变而来？ 209

6．移位因子在功能上是否可分为两类？ 210

7．基因取代为酵母菌改变性别的机制：卡带夹模式 211

8．基因的更换导致锥形虫抗原的改变 212

9．基因重排导致淋病奈瑟菌抗原的改变 215

第十二章 在控制的状态下传递外来DNA於酵母菌体内 218

1．酵母菌的球形体能摄取外来的DNA 219

2．酵母菌基因在大肠菌体内的表现 219

3．往返媒介 220

4．酵母菌也含有质体 220

5．添加复制始点於DNA上以增进转化的效果 221

6．利用酵母菌的中节DNA稳定酵母菌的质体 222

7．酵母菌染色体的末端（端粒）有发夹状的圆弧 223

8．选殖的DNA直接合并入酵母菌染色体中的方法 225

9．回收媒介（retriever vectors） 227

10．基因的组织 228

11．管制酵母菌基因的表现 231

第十三章 利用冠状树瘿质体从事植物的遗传工程 235

1．传统的植物育种法 235

2．组织培养的植物细胞 235

3．从组织培养的植物细胞再分化而产生完全的植物 236

4．植物的原细胞能够再分化为完全的植物 236

5．利用原细胞融合的方法制造杂种植物 237

6．遗传工程制造的植物 239

8．致瘤（Ti）质体 240

7．冠状树瘿 240

9．Ti质体突变的菌株 241

10．T DNA并入植物染色体 242

11．T DNA是否为一种移位因子？ 243

12．T DNA孟德尔式的遗传 243

13．Ti质体DNA可作为传递基因的媒介 244

14．转化植物细胞及其原细胞 244

16．衰减状态的T DNA能使转化的细胞生成完全的植物 246

15．Ti质体上的vir段落能启动T DNA 246

17．T DNA插入植物细胞DNA的现象可做为筛选植物基因的用途 247

18．Ti质体在植物遗传工程上的实际用途 249

第十四章 转移基因於哺乳动物细胞之内 252

1．钙离子能促进有脊椎动物细胞对DNA的摄取 252

2．胸腺定激酶（TK）为转运感染实验的标准筛选标志 253

3．转化正常真核细胞所需的显性作用媒介 253

4．DNA在真核细胞内接合及共同转化 256

5．利用微量注射法移转DNA於哺乳动物细胞中 256

6．甲基化DNA传入细胞後的半稳定遗传现象 257

7．传递於细胞中的基因的分离方法 259

8．基因於传递後的管制 262

9．利用DNA转移实验确定人体特定癌症基因的存在 264

10．人体致瘤基因的选殖 266

第十五章 病毒媒介 271

1．SV 40媒介 271

3．置换SV 40的晚期基因区域 272

2．利用SV 40病毒原为媒介 272

4．置换SV 40的早期基因区域 273

5．表面抗原基因於选殖後的分析 275

6．SV 40媒介在COS细胞中以类似质体的方式复制DNA 277

7．利用COS细胞与含有SV 40 DNA细胞的融合技术救助SV 40 DNA的复制 278

8．从SV 40媒介的研究发现增效序列 278

9．乳头状瘤病毒DNA在白鼠细胞中能像质体般地复制 281

10．RNA致瘤病毒可作为传递基因的媒介 282

第十六章 转移外来基因於受精的白鼠卵中的方法 285

1．外来基因并入染色体 285

2．外来基因并不并入特定的染色体 286

3．外来DNA能稳定地并入生殖细胞中 287

4．外来DNA在白鼠体内的表现 288

5．微量注射後MK融合基因的表现 288

6．MK基因的表现与组织的种类有关 289

8．MGH融合基因的功能表现 290

7．MK基因在子代白鼠中表现性能的改变 290

9．MuLV DNA的并入 291

10．利用MuLV病毒感染早期的胚胎 292

11．利用微量注射法传递前驱病毒DNA於生殖细胞中 294

12．移殖基因至受精卵实验所得的初步暗示 294

13．「纯系」动物 295

第十七章 重组DNA与遗传疾病 300

1．孟德尔遗传方式 300

2．先天性的代谢疾病 301

3．先天性代谢疾病的医治 302

4．早期鉴定及实施流产 302

5．利用DNA分析法鉴定遗传疾病 303

6．β-儿童母红血球性贫血 304

7．无意义突变及架构移改突变 305

8．转录阶层的突变 305

9．RNA处理过程的突变 306

10．镰状细胞性贫血 306

11．利用人造小段聚核苷酸鉴定α1-抗胰朊酶的缺乏 307

12．西瓜胺基酸缺乏症与精胺酸琥珀酸盐合成酶的mRNA变异有关 309

13．利用邻接的基因鉴别遗传基因的突变 310

14．找寻突变基因 312

15．人类染色体的图谱 312

16．体细胞遗传学 313

17．人鼠杂合细胞 313

18．基因在染色体上的位置 314

19．染色体移位与癌症的关系 317

20．原位杂合 318

21．染色体的个别选殖 319

22．为细胞遗传学及分子遗传学搭桥 321

23．基因治疗法的远景 321

24．诱致儿童母红血球性贫血患者的胎儿血红蛋白 322

第十八章 应用於重组DNA工业的科技 328

1．重组DNA在商业上的潜力 328

2．基因选殖在商业上应用的方法 329

3．利用细菌制造人类胰岛素 329

4．人类胰岛素的构造 329

5．人工制造的胰岛素「基因」 330

6．制造前驱胰岛素的反讯息DNA 331

7．分泌前驱胰岛素的细菌 332

8．利用基因选殖的方法制造人类生长贺尔蒙 334

9．制造生长贺尔蒙「基因」 335

10．蛋胺酸问题 336

11．不同种类的干扰素 336

12．人类α-干扰素在大肠菌体内高效率地制造 338

14．利用病毒蛋白质制造疫苗 339

13．γ-（免疫）干扰素基因的选殖 339

15．口蹄疾病毒DNA的选殖 340

16．利用人工制造的肽为疫苗 340

17．人类肝炎B病毒的疫苗 341

18．利用基因选殖法制造肝炎B病毒的抗原 341

重组DNA发展的历史 344

附录A 限制酶 350

附录B 使用於重组DNA研究的其他酶类 356

索引 358