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Ⅰ总 论 1

微生物的保存法 1

（森地敏树，山里一英，铃木正敏，高野光男，根井外喜男）1保存菌种的目的 1

目 录 1

2传代培养保存法 2

3液体石蜡覆盖保存法 3

4载体保存法 5

4-1土壤保存法 5

4-2砂土保存法 6

4-3硅胶保存法 7

4-5纸垫片保存法（滤纸保存法） 8

4-4磁珠保存法 8

5悬液保存法 9

5-1蒸馏水保存法 9

5-2糖液保存法 12

5-3其他悬液保存法 12

6寄主保存法 12

7冷冻保存法 12

7-1一般注意事项 12

7-2低温冰箱保存法 14

7-4液氮保存法 15

7-3干冰保存法 15

8冷冻干燥保存法 19

8-1冷冻干燥法的原理和适用范围 19

8-2冷冻干燥保存概要 21

8-3冷冻干燥前的培养条件 24

8-4菌株号码等的标记 25

8-5安瓿的准备 25

8-6添加保护剂（制备分散剂） 27

8-7制备菌液 29

8-8菌液分装安瓿的方法 30

8-9预冷 31

8-10干燥 34

8-11二次干燥 41

8-12熔封 42

8-13保存条件 46

8-14安瓿的启封 46

8-15复水 47

8-16主要的测定仪器 47

8-17含水量的测定法 50

8-18保存效果的短期鉴定法 52

8-19防止突变 53

8-20病原微生物冷冻干燥时应注意的事项 56

8-21冷冻干燥有困难的微生物及其对策 57

9 冷冻干燥以外的干燥保存法 58

9-1常压干燥保存法（风干保存法） 58

9-2 Stamp干燥保存法（明胶片干燥保存法） 59

9-3菌片封袋干燥保存法 60

9-4 Sordelli干燥保存法 61

9-5 L－干燥保存法（真空干燥保存法） 63

文 献 76

1 前 言 84

Ⅱ各 论 84

1 动物病毒的保存法 （赤尾赖幸） 84

2低温保存法 88

3冷冻保存法 88

4冷冻干燥保存法 90

5各群病毒的保存法 91

文 献 98

2植物病毒的保存法 （脇本哲） 99

1 前 言 99

2冷冻保存法 100

1-2与保存有关的因素 100

1-1保存的预先处理 100

3干燥保存法 101

4冷冻干燥保存法 101

4-1寄主植物的种类 102

4-2实际操作 102

4-3分散剂 102

植物病毒的保存方法和保存效果一览 103

文 献 118

1-2噬菌体悬液的制备 119

1-1一般注意事项 119

1 前 言 119

3噬菌体的保存法 （饭岛贞二） 119

2低温保存法 120

3冷冻保存法 121

4液氮保存法 121

5冷冻干燥保存法 122

6 L－干燥保存法 122

7其他保存法 123

噬菌体的保存方法和保存效果一览 123

文 献 126

1-1病原细菌的保存目的 127

1 前 言 127

——医学领域 （三输谷俊夫，田中吉纪） 127

4病原细菌的保存法（Ⅰ） 127

1-2菌株保存法 128

2传代培养保存法 128

3冷冻保存法 129

4冷冻干燥保存法 129

4-1细菌悬液的准备 130

4-2安瓿的灭菌和冷冻干燥 131

4-3冷冻干燥样品的保存 132

4-4冷冻干燥样品的复原 132

4-5复水液 133

4-6在冷冻干燥保存法中存在的问题 134

5 Stamp氏明胶片干燥保存法 134

5-1培养菌 134

5-2分散剂 134

5-3石蜡滤纸 135

5-4干燥法 135

5-5保存法 136

5-6保存菌的复原 137

5-7其他注意事项 137

培养基的组成和配制法 138

分散剂（保护剂）的配制 150

病原细菌的保存方法和保存效果一览 153

文 献 157

〔附记〕 东京大学医学科学研究所关于病原细菌冷冻保存和冷冻干燥保存的实例 （帖佐浩）1传代培养基 158

2分散剂（保护剂）的配制 159

冷冻保存和冷冻干燥保存的实验成绩 160

5病原细菌的保存法（Ⅱ） 162

——兽医学领域 （柚木弘之） 162

1 前 言 162

3冷冻保存法 163

4冷冻干燥保存法 163

2传代培养保存法 163

4-1菌悬液的制备 164

4-2保护剂和保存温度 164

4-3冷冻干燥菌株的变异 164

4-4冷冻干燥菌株的复原 165

5 明胶片干燥保存法 165

培养基的组成和配制 165

分散剂（保护剂）的组成 170

兽医学领域内病原细菌的保存法和保存效果一览 170

文 献 173

1 前 言 174

6植物病原细菌的保存法 （脇本哲） 174

2传代培养保存法 175

3液体石蜡覆盖保存法 175

4土壤保存法 176

5水液保存法 176

6冷冻保存法 177

7冷冻干燥保存法 177

培养基的组成和配制 178

分散剂（保护剂）的组成 181

植物病原细菌的保存法和保存效果一览 182

文 献 188

7非病原需氧性细菌的保存法 （山里一英） 190

1 前 言 190

2传代培养保存法 190

2-1琼脂斜面培养基密封保存法 191

2-2软琼脂法 192

3 液体石蜡覆盖保存法 192

4土壤保存法 193

4-1芽孢杆菌芽孢的土壤保存法 194

4-2根瘤菌孢囊的土壤保存法 194

5硅酸胶保存法 194

6磁珠保存法 195

7 悬液保存法 196

8冷冻保存法 196

9冷冻干燥保存法 198

10 Sordelli氏干燥保存法 201

11 L－干燥保存法 201

12其他干燥保存法 201

12-1 Stamp氏干燥保存法 202

12-2Kerr氏干燥保存法 202

12-3常压干燥保存法（风干保存法） 202

培养基的组成和配制 203

12-5袋装尼龙薄膜片（Disc-in-bag）干燥保存法 203

12-4 Brown氏干燥保存法 203

分散剂（保护剂）的组成和配制法 236

非病原需氧性细菌的保存法和保存效果一览 239

文 献 253

8厌氧菌的保存法 （铃木祥一郎，上野一惠） 257

1 前 言 257

2传代培养保存法 258

3 液体石蜡覆盖保存法 259

4 PRAS （Pre-Reduced Anaerobically Sterilized 259

预先还原无氧灭菌的）培养基的传代培养法 259

5-1去纤维羊血保存法 260

5冷冻保存法 260

5-2脱脂乳保存法 261

6冷冻干燥保存法 262

7 明胶片干燥保存法 263

培养基的组成和配制法 263

厌氧菌的保存法和保存效果一览 274

文 献 282

1 前 言 283

1-1需氧性和兼性厌氧放线菌的保存 283

9放线菌的保存法 （清野昭雄） 283

1-2生产菌株的保存 284

1-3遗传标志的保存 285

1-4放线菌类各属的保存 285

2传代培养保存法 285

2-1维持培养基 285

2-2放线菌类用琼脂培养基一览 288

3液体石蜡覆盖保存法 288

4土壤保存法 288

6-1厌氧性放线菌类的冷冻保存法 289

6-2液氮保存法 289

6冷冻保存法 289

5干曲保存法 289

7冷冻干燥保存法 290

培养基的组成和配制法 290

分散剂（保护剂）的组成 297

放线菌的保存法和保存效果一览 298

文 献 301

10支原体（Mycoplasma）的保存法 （柚木弘之，帖佐浩）1前 言 303

2冷冻保存法 303

2-1菌悬液的配制法 304

3冷冻干燥保存法 305

2-3保护剂和保存温度 305

2-2支原体的菌量测定 305

3-1菌悬液的配制法 306

3-2保护剂 306

3-3冷冻干燥菌株的保存 306

3-4冷冻和冷冻干燥菌株的变异 306

3-5冷冻干燥菌的复原 307

培养基的组成和配制法 307

分散剂（保护剂）的组成 314

支原体的保存法和保存效果一览 314

文 献 318

2-1传代培养保存法 319

2钩端螺旋体（Leptoospira）的保存法 319

11 病原螺旋体的保存法 （梁川良） 319

1 前 言 319

2-2冷冻保存法 320

2-3冷冻干燥保存法 320

3 密螺旋体（Treponema）的保存法 321

3-1传代培养保存法 321

3-2冷冻保存法 322

3-3冷冻干燥保存法 322

4-1传代培养保存法 323

4-2冷冻保存法 323

4疏螺旋体（Borrelia）的保存法 323

4-3冷冻干燥保存法 324

培养基、分散剂的组成和配制法 324

文 献 329

12立克次氏体的保存法 （宍户亮） 331

1 前 言 331

2冷冻保存法 332

3冷冻干燥保存法 333

3-1材料 333

3-2分散剂 333

3-3应用 333

立克次氏体保存法一览 334

文 献 335

13病原真菌的保存法 （岩田和夫） 336

1 前 言 336

2传代培养保存法 337

2-1真菌保存用培养基 337

2-2传代间隔 338

2-3保存场所应具备的条件 338

2-4移植时应注意的事项 339

3 矿油覆盖保存法（液体石蜡覆盖保存法） 340

5蒸馏水保存法 341

4土壤或砂基保存法 341

6冷冻保存法 342

7冷冻干燥保存法 342

8 防止变异应注意的事项 343

9在保存中防止污染的方法 344

文 献 345

14酵母菌的保存法 （高田信男） 346

1 前 言 346

2传代培养保存法 346

3液体石蜡覆盖保存法（矿油覆盖保存法） 347

4土壤保存法 348

6冷冻保存法 349

6-1冷冻前的培养条件 349

5蒸馏水保存法 349

6-2冷冻和融解速度 351

7冷冻干燥保存法 352

7-1冷冻干燥的分散剂（保护剂） 353

7-2冷冻干燥前的各种条件 353

8其他干燥保存法 355

9适合于酵母菌长期保存的保存法 355

7-3冷冻和干燥条件以及冷冻干燥后的保存条件 355

培养基、分散剂（保护剂）的组成和配制法 356

酵母菌的保存法和保存效果一览 357

文 献 361

15丝状菌的保存法（Ⅰ） 363

——曲霉属、青霉属和孢子囊菌类、藻菌类 363

（阿部重雄） 363

1 前 言 363

2传代培养保存法 363

3矿油覆盖保存法（液体石蜡覆盖保存法） 363

6冰箱保存法 364

5硅胶保存法 364

4土壤保存法 364

7液氮保存法 365

8冷冻干燥保存法 365

9其他干燥保存法 365

培养基的组成和配制法 366

保护剂（分散剂）的组成 369

曲霉、青霉和子囊菌类、藻菌类的保存法、保存效果 369

一览 369

文 献 391

1 前 言 394

2担子菌类的保存法 394

——担子菌类和半知菌类 （横山竜夫） 394

16丝状菌的保存法（Ⅱ） 394

3半知菌类的保存法 397

3-1传代培养保存法 397

3-2液体石蜡覆盖保存法 398

3-3土壤保存法 398

3-4硅胶保存法 398

3-5风干保存法（自然干燥保存法） 399

3-6冷冻保存法 399

3-9 L－干燥保存法 400

3-8冷冻干燥保存法 400

3-7液氮保存法 400

培养基的组成和配制法 401

保护剂（分散剂）的组成 409

担子菌类和半知菌类的保存法和保存效果一览 410

文 献 431

17微小藻类的保存法（Ⅰ） 436

——微小藻类的传代保存法 436

（市村辉宜，伊藤忠夫） 436

1前 言 436

2传代培养保存法 436

2-1藻株的性状 437

2-2维持培养基 438

2-3培养条件和保存条件 438

2-4移植间隔 439

2-5讨论 439

维持培养基的组成 439

东京大学应用微生物研究所微小藻类系统保存株和保 450

存法一览 450

文 献 462

2冷冻干燥保存法 464

1 前 言 464

（都留信也） 464

——微小藻类的冷冻和冷冻干燥保存法 464

18微小藻类的保存法（Ⅱ） 464

3冷冻保存法 466

微小藻类的保存法和保存效果一览 468

文 献 471

19病原原生动物的保存法 （常松之典） 472

1 前 言 472

2锥体虫属（Trypanosoma）的冷冻保存 474

3利什曼虫属（Leishmania）的冷冻保存 475

4 毛滴虫属（Trichomonas）的冷冻保存 475

5 内变形虫属（Entamoeba）的冷冻保存 476

6疟原虫属（Plasmodium）的冷冻保存 477

7 弓型属（Toxoplasma）的冷冻保存 478

病原原生动物的保存法和保存效果一览 478

文 献 485

20非病原原生动物的保存法 （松坂理夫） 487

1 前 言 487

2冷冻保存法 487

非病原原生动物的保存法和保存效果一览 488

文 献 489

微生物学名索引 490