实验技术与方法PDF电子书下载

上篇 1

第一章 生物化学与分子生物学实验基本知识 1

第一节 实验室基本规则 1

第二节 实验基础知识与操作 5

第二章 光谱光度分析技术 16

第一节 比色法与分光光度法 16

第二节 荧光分析法 26

第三章 电泳技术 30

第一节 电泳技术的基本知识 30

第二节 常用电泳技术 36

第四章 层析技术 45

第一节 吸附层析 45

第二节 分配层析 51

第三节 凝胶过滤层析 55

第四节 离子交换层析 61

第五节 亲和层析 68

第五章 离心技术 78

第一节 离心技术的原理 78

第二节 离心技术的分类与应用 82

第三节 离心机的类型与结构 86

第六章 常用分子生物学技术 89

第一节 重组DNA技术 89

第二节 聚合酶链反应技术 100

第三节 分子杂交技术 117

下篇 129

实验一 双缩脲法测定蛋白质含量 129

实验二 Folin-酚试剂法测定蛋白质含量 131

实验三 紫外分光光度法测定蛋白质含量 133

实验四 考马斯亮蓝G-250染色法测定蛋白质含量 135

实验五 BCA法测定蛋白质含量 137

实验六 血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳 140

实验七 血清蛋白质聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳 144

实验八 SDS-PAGE测定蛋白质的相对分子质量 148

实验九 氨基酸薄层层析 153

实验十 凝胶柱层析法分离蛋白质 155

实验十一 紫外吸收法测定核酸含量 157

实验十二 肝脏DNA和RNA的分离与测定 158

实验十三 碱性磷酸酶的分离纯化与比活性测定 163

实验十四 碱性磷酸酶的动力学分析 171

一、pH对酶促反应速度的影响 171

二、温度对酶促反应速度的影响 174

三、底物浓度对酶促反应速度的影响 175

四、抑制剂对酶促反应速度的影响 176

实验十五 测定血糖及激素对血糖浓度的影响 177

实验十六 血清甘油三酯的测定 180

实验十七 血清丙氨酸氨基转移酶测定 184

实验十八 血清尿素测定 188

实验十九 聚合酶链式反应体外扩增DNA 191

实验二十 琼脂糖凝胶电泳检测DNA 194

实验二十一 质粒DNA的提取 196

实验二十二 DNA的限制性内切酶消化 199

实验二十三 DNA的重组技术——DNA的连接、感受态细胞制备及质粒转化 201

实验二十四 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达 205

实验二十五 Southern blot 207

实验二十六 Northern blot 210

实验二十七 Western blot 214

实验二十八 单链构象多态性分析技术检测基因突变 218

附录 222

附录一 实验室常用试剂、缓冲液的配制方法 222

附录二 常用培养基及抗生素的配制方法 231

附录三 生物化学与分子生物学常用数据 232

附录四 生物化学与分子生物学网上资源、数据库及国内外期刊 240

参考文献 244