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目录 1

第一章 概论 1

一、酶法分析原理 1

二、酶的性质 2

三、影响酶反应速度诸因素 4

1．酶浓度的影响 5

2．底物浓度的影响 5

3．激活剂的影响 6

4．抑制剂的影响 7

（1）可逆抑制 8

（2）不可逆抑制 9

5．温度的影响 11

6．pH的影响 11

7．离子强度的影响 13

四、浓度测定 13

1．总变化法或平衡法 14

2．动力学法 15

五、生化试剂处理 16

六、酶活性 17

参考文献 18

一、化学方法 20

二、仪器方法 20

第二章 测定方法 20

1．测压法 21

2．分光光度法 21

3．旋光测定法 24

4．电化学法 25

（1）离子选择性电极 25

（2）微电流电位法 26

（3）电流法 26

（4）电量法 28

（5）极谱法 28

5．荧光法 29

6．放射化学法 31

参考文献 32

第三章 酶的测定 35

一、概述 35

二、水解酶 35

1．淀粉酶 35

2．胆碱酯酶 36

（1）测压法与pH法 36

（2）比色法 37

（3）电化学法 38

（4）荧光法 39

（5）放射测量法 45

3．纤维素酶 45

5．二氧化碳 （1 47

4．胰凝乳蛋白酶 47

5．β－葡糖苷酶与半乳糖苷酶 49

6．β－葡糖醛酸苷酶 51

7．透明质酸酶 51

8．脂肪酶 53

9．磷酸酯酶 58

10．尿素酶 62

1．氨基酸氧化酶 63

三、氧化酶 63

2．过氧化氢酶 65

3．葡糖氧化酶 68

4．过氧化物酶 72

5．黄嘌呤氧化酶 73

四、脱氢酶 76

1．概述 76

2．乳酸脱氢酶 80

3．6－磷酸葡糖脱氢酶 81

4．谷氨酸脱氢酶 81

5．α－羟基丁酸脱氢酶 82

7．苹果酸脱氢酶 83

6．醇脱氢酶和甘油脱氢酶 83

五、激酶与转氨酶 84

六、其它酶 87

参考文献 87

第四章 底物的测定 99

一、概述 99

二、糖类 99

1．葡萄糖 99

（1）用己糖激酶测定 99

（2）用葡糖氧化酶测定 100

（i）测量耗氧量 101

（ii）用过氧化物酶测定 102

（iii）其它方法 103

（3）用其它酶测定 104

2．半乳糖 104

3．果糖 106

4．蔗糖 107

5．糖原 108

6．其它糖类 109

三、胺类 111

1．用二胺氧化酶测定 111

2．用单胺氧化酶测定 112

3．用尿素酶测定尿素 113

四、氨基酸 115

1．用D－氨基酸氧化酶测定D－氨基酸 115

2．用L－氨基酸氧化酶测定L－氨基酸 116

3．用L－氨基酸脱羧酶测定L－氨基酸 119

4．L－谷氨酸的测定 121

（1）用谷氨酸脱氢酶测定 121

5．L－丙氨酸的测定 122

（2）用谷氨酸－丙酮酸转氨酶测定 122

6．L－门冬氨酸的测定 123

7．肌酸的测定 123

五、有机酸 124

1．乙酸 124

2．丁酸及其羟基衍生物 125

3．DL－柠檬酸与D－异柠檬酸 126

4．甲酸 131

5．延胡索酸 133

6．透明质酸 133

7．L－乳酸 134

（1）用Ⅱ型乳酸脱氢酶和辅酶Ⅰ(NAD)测定 134

8．L－苹果酸 135

（2）用酵母乳酸脱氢酶（Ⅳ型）测定 135

9．琥珀酸 136

六、羟基化合物、酯类及醛类 137

1．乙醇与脂肪族醇 137

（1）用醇脱氢酶测定 137

（2）用醇氧化酶测定 137

2．甘油与二羟基丙酮 138

（1）用甘油脱氢酶测定 138

（2）用甘油激酶测定甘油 140

3．羟基丙酮酸 140

4．丁二醇 141

5．山梨糖醇 141

8．黄嘌呤与次黄嘌呤 142

7．苯酚类 142

6．甘油三酸酯 142

9．类固醇 144

（1）3α－羟基类固醇脱氢酶 144

（2）3β-,17β－羟基类固醇脱氢酶 144

（3）11β－羟基类固醇脱氢酶 144

（4）20β－羟基类固醇脱氢酶 144

10．酯类的检定与测定 145

七、无机物质 146

1．过氧化物 146

2．氨 146

3．硝酸盐 147

4．羟胺 147

7．焦磷酸盐 148

6．磷酸盐 148

参考文献 149

第五章 激活剂与辅酶的测定 158

一、概述 158

二、无机物质的测定 158

1．镁、锰及锌的测定 158

2．钡的测定 161

3．氧的测定 162

4．氰化物、硫化物及碘化物的测定 163

5．其它物质的测定 163

2．黄素单核苷酸 165

3．黄素腺嘌呤二核苷酸 165

1．概述 165

三、辅酶的测定 165

4．辅酶Ⅰ*(NAD)与还原型辅酶Ⅰ(NADH) 167

5．辅酶Ⅱ*(NADP)与还原型辅酶Ⅱ(NADPH) 168

6．用酶促循环法测定辅酶Ⅰ(NAD)与辅酶Ⅱ(NADP) 169

7．5′－三磷酸腺苷（ATP） 171

（1）用荧光素酶测定 171

（2）用己糖激酶与6－磷酸葡糖脱氢酶测定 172

（3）用磷酸甘油酸激酶测定 172

8．5′－二磷酸腺苷（ADP）与5′－单磷酸腺苷（AMP） 173

9．磷酸肌酸 174

（1）用己糖激酶测定 174

（2）用荧光素酶测定 174

参考文献 175

一、概述 178

第六章 抑制剂的测定 178

二、无机物质的测定 180

1．概述 180

2．葡糖氧化酶 182

3．葡糖苷酶 182

4．透明质酸酶 184

5．转化酶 185

6．异柠檬酸脱氢酶 186

7．肝酯酶 188

8．过氧化物酶 189

9．碱性磷酸酯酶 192

10．尿素酶 193

11．黄嘌呤氧化酶 194

12．其它酶系 195

三、杀虫剂的测定 195

1．抗胆碱酯酶化合物（有机磷化合物与氨基甲酸酯化合物）的测定 195

2．根据碳酸酐酶的抑制测定DDT 201

3．根据脂肪酶的抑制，测定含氯杀虫剂与其它杀虫剂 202

4．用磷酸酯酶测定杀虫剂 205

四、其它有机化合物的测定 206

1．与巯基结合的化合物 206

2．肝素 206

3．抗坏血酸 207

4．中性去污剂——三通X-100 207

5．其它化合物 207

参考文献 208

一、概述 213

第七章 固相酶 213

二、淀粉凝胶固相法 214

1．概述 214

2．固相胆碱酯酶的制备 214

3．凝胶固相酶的性质与应用 215

4．抑制剂的自动检测 217

（1）电化学法 217

（2）荧光法 219

三、聚丙烯酰胺凝胶固相法 221

1．概述 221

2．凝胶的制备（Hicks和Updike法） 221

3．凝胶的性质 222

4．尿素电极的制备 226

5．其它的研究 227

四、酶的其它固相法 228

1．概述 228

2．与高聚物骨架（PolymericLattices）的共价键结合 229

（1）不溶性的胰蛋白酶与胰凝乳蛋白酶 229

（2）不溶性的木瓜蛋白酶 230

五、未来的应用 231

参考文献 232

第八章 自动化在酶法分析中的应用 235

一、概述 235

二、起始斜率法 236

三、固定浓度（变化时间）法 237

四、固定时间法 240

参考文献 254

附录各种酶的分析测定综合一览表 256