动物细胞培养技术PDF电子书下载

细胞培养概述 1

一、细胞培养发展简史 1

二、细胞培养的基本概念 4

三、细胞培养的基本要求 5

实验一 实验器材的清洗、包装和消毒 8

一、常用的实例器材 9

二、清洗 10

三、包装 13

四、消毒 13

实验二 实验室常用的仪器设备 21

一、净化台 21

二、自动双重纯水蒸馏器 22

三、抽气泵 24

四、压力蒸汽消毒器 25

五、电热恒温培养箱 26

六、电热恒温干燥箱 26

七、液氮生物容器 26

八、CO2培养箱 27

九、冰箱 28

实验三 动物细胞培养用液 30

一、蒸馏水的制备 31

二、平衡盐溶液（balanced salt solution,BSS）的配制 32

三、天然培养基 33

四、合成培养基 36

五、血清细胞培养基 44

六、无血清细胞培养基 44

七、消化液 49

八、pH调整液 52

九、200毫摩尔/升L-谷氨酰胺 52

十、抗菌素液 52

十一、细胞用液的分装方法和要求 53

实验四 细胞原代培养 56

一、乳鼠肺组织培养程序 57

二、原代细胞培养操作要领 60

三、原代细胞培养注意事项 61

四、原代细胞培养的取材 62

五、原代细胞培养方法 66

实验五 培养细胞的观察 74

一、培养细胞的分型 75

二、细胞培养中常用术语 76

三、培养细胞一代生长过程 78

四、细胞周期 82

五、培养细胞的生命期 84

实验六 培养细胞常规检查和生物学检测 88

一、培养细胞常规检查 88

二、培养细胞生物学检查和鉴定 94

实验七 细胞传代培养 99

一、细胞传代方法 100

二、乳鼠原代肺细胞培养物传代 100

三、盖玻片条细胞培养法 102

四、培养细胞活力的测定 103

五、培养细胞Giemsa染色法 103

实验八 细胞冻存、复苏、运输和短期保存 107

一、影响冻存细胞活性的因素 108

二、细胞冻存方法 109

三、组织细胞短期保存方法 111

四、细胞复苏方法 112

五、细胞运输 112

实验九 细胞的分离和纯化 114

一、成纤维型细胞的分离和去除 114

二、骨髓和外周血有核细胞的纯化 117

三、肿瘤细胞的纯化 119

四、单核细胞和巨噬细胞的纯化 122

五、上皮细胞的纯化 122

六、细胞移速分离纯化 123

一、克隆形成实验 124

实验十 培养细胞活力检测方法 124

二、梁料排斥试验 130

三、四唑盐（MTT）比色法 131

实验十一 细胞形态学研究方法 133

一、培养细胞的固定 133

二、细胞梁色法 135

三、培养细胞透射电镜样品的制备 146

四、培养细胞扫描电镜样品的制备 148

实验十二 细胞遗传学的检测方法 149

一、细胞DNA含量测定 149

二、细胞DNA合成测定 151

三、人外周血淋巴细胞染色体标本制备 155

四、培养细胞染体标本制备 156

五、染色体G显带 157

六、姐妹染色单体区分（sister chromatid differentiation,SCD）染色法 163

七、染色体核仁组成区的银染技术 165

实验十三 恶性肿瘤细胞侵袭的实验研究方法 168

一、动物体内瘤细胞侵袭模型 168

二、体外瘤细胞侵袭模型 172

三、转移性瘤细胞筛选试验 177

实验十四 显微镜的光学部件和显微照相操作 180

一、显微镜光学构造 180

二、滤光镜的选择 186

三、显微照相操作前的准备 188

四、Olympus PM-10 AD型全自动黑白显微照相操作程序 191

五、黑白照片影像不佳及其纠正措施 193

六、彩色显微摄影操作程序 195

七、彩色照片影像不佳及其纠正措施 196

八、黑白胶片的冲洗和放大 197

实验十五 相差显微镜 202

一、相差显微镜构造特点 202

二、相差显微镜检原理 203

三、重光XSZ-D2型相差显微镜摄影程序 204

四、Olympus CK2型相差显微镜摄影程序 205

实验十六 荧光显微镜 206

一、荧光显微镜构造特点 206

二、荧光显微术样品制作要求 209

三、荧光显微镜摄影操作程序 209

四、荧光显微镜摄影注意事项 210

附录 国内外著名细胞库和已建立的细胞系（或株） 213

参考文献 247