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第一篇 生物显微实验技术 2

第一章 各种光学显微镜 2

实验一 普通光学显微镜的使用（一）——细胞形态结构的观察 2

实验二 普通光学显微镜的使用（二）——细胞大小的测量 7

实验三 普通光学显微镜的使用（三）——生物显微绘图 10

实验四 普通光学显微镜的使用（四）——细胞计数 12

实验五 相差显微镜的使用——活细胞的相差显微镜观察 13

实验六 暗视野显微镜的使用——细胞的暗视野显微镜观察 17

实验七 荧光显微镜的使用——细胞的荧光显微镜观察 20

实验八 偏光显微镜的使用 23

实验九 干涉显微镜的使用——培养细胞的观测 27

实验十 微分干涉反差显微镜的使用——培养细胞的观察 30

实验十一 激光扫描共聚焦显微镜及其使用 32

实验十二 扫描隧道显微镜的原理及其应用 35

实验十三 电子显微镜在生物学研究中的应用——透射电镜细胞样品的制备和观察 36

实验十四 扫描电镜样品的制备——体外培养细胞的制备 41

实验十五 核小体电镜样品的制备与观察 44

实验十六 染色体的电镜制样和观察 46

实验十七 细胞冰冻蚀刻制样和观察 49

实验十八 胶体金免疫标记电镜技术 53

实验十九 电镜标本的负染色技术 55

实验二十 核酸电镜技术 57

实验二十一 电镜放射自显影技术 59

实验二十二 电镜酶细胞化学技术 65

第二章 生物显微制片技术 70

实验二十三 石蜡切片法（一）——取材、固定、洗涤、脱水 70

实验二十四 石蜡切片法（二）——透明、透蜡、包埋 76

实验二十五 石蜡切片法（三）——切片、贴片 78

实验二十六 石蜡切片法（四）——染色、封藏 82

实验二十七 石蜡切片实例（一）细胞形态染色Ⅰ.兔肝的制片——苏木精-伊红（简称H.E）对染法 87

实验二十八 石蜡切片实例（二）细胞形态染色Ⅱ.根的制片——番红-固绿对染法 89

实验二十九 石蜡切片实例（三）细胞形态染色Ⅰ.核酸的显示方法——Feulgen反应 91

实验三十 石蜡切片实例（四）细胞形态染色Ⅱ.糖类的显示方法——PAS反应 93

实验三十一 石蜡切片实例（五）细胞形态染色Ⅲ.组蛋白的显示方法——碱性固绿法 96

实验三十二 石蜡切片实例（六）细胞形态染色Ⅳ.碱性磷酸酶的显示方法——钙钻法 97

实验三十三 徒手切片法 99

实验三十四 木材切片法 100

实验三十五 火棉胶切片法 102

实验三十六 冰冻切片法 103

实验三十七 整体制片法 105

实验三十八 解离法 106

实验三十九 压片法（一）——果蝇幼虫唾液腺巨大染色体的制作 108

实验四十 压片法（二）——植物根尖染色体的制片 109

实验四十一 涂布法 110

实验四十二 磨片法 111

第三章 显微摄影术 113

实验四十三 OLYMPUS BH2系列显微镜与PM-10AD摄影装置的使用 113

实验四十四 胶片的冲洗 116

实验四十五 印相和放大 121

实验四十六 黑白感光幻灯片制作技术 122

实验四十七 显微缩时电影术 126

实验四十八 NIKON显微演示及图像分析系统 127

第二篇 生物无菌培养技术 131

第四章 微生物的培养和发酵 131

实验四十九 微生物培养基的配制 131

实验五十 高压蒸汽灭菌法与消毒方法 133

实验五十一 微生物接种技术 136

实验五十二 从土壤中分离和纯化微生物 138

实验五十三 真菌的组织块分离法 140

实验五十四 单孢子分离法 141

实验五十五 解酚菌的富集和筛选 143

实验五十六 稀有放线菌选择分离 144

实验五十七 厌氧菌的分离培养 145

实验五十八 污水中大肠菌群的计数——MPN法 147

实验五十九 荧光显微镜直接计数法 149

实验六十 微生物的诱变选育 150

实验六十一 微生物菌种的保藏方法 152

实验六十二 斯达油脂酵母胞外多糖发酵 154

实验六十三 不同碳源对菊糖酶合成的影响 156

实验六十四 菊糖酶发酵培养基配方的正交试验 158

实验六十五 小型自控发酵罐菊糖酶发酵 160

实验六十六 5’-磷酸二酯酶的固体发酵 163

第五章 植物组织培养 166

实验六十七 植物的试管快速繁殖技术 166

实验六十八 茎尖脱毒技术 168

实验六十九 花药培养及单倍体育种 170

实验七十 植物细胞的悬浮培养 172

实验七十一 植物细胞突变体的筛选 173

实验七十二 植物细胞同步培养 175

实验七十三 细胞的连续发酵——人参细胞的工业化生产 177

实验七十四 原生质体的制备 180

实验七十五 原生质体的培养及植株再生 181

实验七十六 原生质体的融合技术 183

实验七十七 人工种子的制作 185

实验七十八 人工种子的保存和发芽 186

实验七十九 植物茎尖及分生组织的超低温保存——两步冰冻法 187

实验八十 培养细胞的超低温保存——玻璃化法 189

第六章 动物组织培养 192

实验八十一 组织块培养技术 192

实验八十二 分散细胞培养技术 194

实验八十三 贴附型细胞的传代培养 197

实验八十四 悬浮型细胞的传代培养 199

实验八十五 肿瘤细胞株的建立与鉴定 200

实验八十六 细胞的化学诱变与转化 202

实验八十七 器官培养技术 204

实验八十八 细胞克隆技术 207

实验八十九 动物细胞融合技术 211

实验九十 培养细胞生长曲线的绘制 216

实验九十一 培养细胞分裂指数的测定 218

实验九十二 细胞集落形成率测定 220

实验九十三 培养细胞的显微注射法 222

实验九十四 细胞骨架和核骨架的显示、分离及观察 225

实验九十五 培养细胞的冻存与复苏 228

附录 232

主要参考文献 242