花卉基因工程PDF电子书下载

第1章　概论 1

1.1　花卉产业发展的特点 1

1.1.1 主要花卉的种植面积 2

1.1.2　花卉的经济价值 2

1.1.3　花卉产业发展的潜力 6

1.2　丰富的花卉资源 8

1.2.1 丰富的花卉种类 8

1.2.2　丰富的热带种质资源及利用 11

1.3　花卉育种进展 12

1.3.1 传统育种研究进展 13

1.3.2　生物技术育种研究进展 16

本章参考文献 31

第2章　目的基因的克隆 34

2.1　植物基因的结构与功能 34

2.1.1 植物基因的结构特点 34

2.1.2　植物基因的功能 36

2.2　植物基因的克隆策略 36

2.2.1 基因芯片技术分离目的基因 36

2.2.2　基因文库技术分离目的基因（基因组文库和cDNA文库） 40

2.2.3　PCR技术克隆目的基因 41

2.2.4　mRNA差别显示技术分离差异表达的目的基因 42

2.2.5 插入突变技术克隆目的基因 48

本章参考文献 53

第3章　目的基因的遗传转化 55

3.1　受体系统的建立及特性 55

3.1.1　愈伤组织再生系统 55

3.1.2　直接分化再生系统 55

3.1.3　原生质体再生系统 55

3.1.4　胚状体再生系统 56

3.1.5 生殖细胞受体系统 56

3.2　载体构建 56

3.2.1 载体的种类及特性 56

3.2.2　植物表达载体的构建 56

3.3　根癌农杆菌介导的转化 60

3.3.1 根癌农杆菌的特点 60

3.3.2 农杆菌介导的T-DNA的插入机理 60

3.3.3　T-DNA在植物基因组中的整合及染色体水平上的分布 61

3.3.4　根癌农杆菌的转化策略 64

3.3.5 根癌农杆菌的转化方法 66

3.4　DNA直接导入基因转化 67

3.4.1 基因枪法 67

3.4.2　PEG介导基因转化 68

3.4.3　脂质体介导基因转化 68

3.4.4　花粉管导入法 69

3.5　转基因表达的类型 69

3.5.1　组成型表达 70

3.5.2　诱导型表达 70

3.5.3 基因瞬时表达和稳定表达 72

3.6　外源基因在转基因植物中的表达特点 73

3.6.1 外源基因插入拷贝数、插入位点与排列 73

3.6.2　外源基因表达序列特征 74

3.6.3 外源基因表达的沉默 75

3.6.4　环境因素对转基因表达活性的影响 77

3.7　无选择标记基因的转化系统 77

3.7.1 无毒选择标记系统获得转基因植物 78

3.7.2　标记基因的去除 78

3.8　提高转基因表达水平的若干技术途径 79

3.8.1 启动子及终止子的修饰改造 79

3.8.2　转基因的修饰与改造 80

3.8.3 使用植物偏爱的密码子 81

3.8.4　蛋白质的定向运输 82

本章参考文献 83

第4章　转基因植物的检测与鉴定 85

4.1　报告基因的检测 85

4.1.1 葡糖醛酸酶基因（gus）的检测 85

4.1.2　绿色荧光蛋白基因（gfp）的检测 86

4.1.3 绿霉素乙酰转移酶基因（cat）的检测 86

4.1.4 荧光霉素基因的检测 86

4.1.5 花青素基因的检测 86

4.2　外源基因的PCR检测 87

4.2.1 外源基因整合的PCR-Southern杂交检测 87

4.2.2　外源基因拷贝数的IPCR检测 87

4.2.3 外源基因表达的RT-PCR检测 87

4.3　外源基因的Southern blot检测 89

4.3.1 Southern斑点杂交 89

4.3.2 Southern印迹杂交 89

4.4　外源基因的Northern blot检测 89

4.5　外源基因表达蛋白的检测（Western） 90

4.5.1 ELISA检验 90

4.5.2 Western杂交 90

4.6　外源基因整合及表达的原位杂交检测 91

4.6.1 染色体DNA原位杂交 91

4.6.2　组织细胞mRNA原位杂交 92

4.6.3 外源基因表达蛋白的组织细胞免疫定位 94

本章参考文献 96

第5章　花卉基因工程 97

5.1　花色基因工程 97

5.1.1 花色形成的原理 97

5.1.2 重要花色基因的克隆及基因工程方法 98

5.1.3　外源花色基因改变植物花色的转化及检测方法 101

5.1.4　应用 103

5.2　花形基因工程 104

5.2.1 影响花形的因素 104

5.2.2　重要功能基因的克隆 105

5.2.3　转化及检测 106

5.2.4　应用 106

5.3　利用基因工程增加花卉的香味 112

5.3.1　花香释放的机理 112

5.3.2　重要花香基因的克隆 113

5.3.3 外源基因的导入及表达 115

5.3.4　应用 116

5.4　利用基因工程增强花卉的抗逆性 116

5.4.1　抗性基因工程育种的原理 118

5.4.2 重要抗性功能基因的克隆、载体构建及转化 120

5.5　利用基因工程延长花卉的保鲜期 122

5.5.1 花卉采后保鲜的原理 122

5.5.2　与采后保鲜相关的重要功能基因的克隆、载体构建及转化 123

5.5.3　应用 124

5.6　利用基因工程改变花期 125

5.6.1 花期控制的分子生物学基础 125

5.6.2 重要功能基因的克隆、载体构建及转化 125

5.6.3　应用 125

5.7　花卉的功能基因组学的研究 128

5.7.1 功能基因组学研究进展 128

5.7.2　功能基因组学在花卉育种中的应用 135

本章参考文献 136

第6章　重要花卉基因工程应用 142

6.1　热带兰花 142

6.1.1 蝴蝶兰 143

6.1.2　石斛兰 145

6.1.3 大花蕙兰 147

6.1.4 文心兰 148

6.1.5 问题与展望 149

6.2　非洲菊 149

6.2.1 非洲菊的经济价值 149

6.2.2　基因工程在非洲菊上的应用 150

6.3　安祖花 154

6.3.1　安祖花的经济价值 154

6.3.2　安祖花的离体再生 154

6.4　百合 155

6.4.1 百合的经济价值 155

6.4.2　基因工程在百合上的应用 157

6.5　香石竹 164

6.5.1　香石竹的经济价值 164

6.5.2　病毒病危害与脱毒 164

6.5.3　基因工程在香石竹上的应用 166

6.6　月季 167

6.6.1 月季的经济价值 167

6.6.2 月季的离体再生体系的建立 168

6.6.3　月季的遗传转化 170

6.7　菊花 172

6.7.1 菊花的经济价值 172

6.7.2　菊花的离体再生 172

6.7.3　菊花的遗传转化 173

6.8　观赏凤梨 174

6.8.1 观赏凤梨的经济价值 174

6.8.2　观赏凤梨的离体再生 175

本章参考文献 177

第7章　转基因植物（食品）安全性 184

7.1　转基因植物（食品）产业发展趋势 184

7.2　转基因植物（食品）的潜在风险与生物安全性 185

7.2.1 转基因植物释放引发“超级杂草” 185

7.2.2 转基因植物中35S启动子的生物安全性 185

7.2.3 载体骨架序列的生物安全性 186

7.2.4　抗生素抗性标记基因的生物安全性 186

7.2.5 转基因食品的安全性 187

7.3　主要应对措施 187

7.3.1 完善转基因植物（食品）的安全性评价体系 187

7.3.2　加强我国的生物安全性研究 190

7.3.3 采取有效的生物安全控制措施 190

7.3.4 建立健全生物安全管理体制的法规体系 192

7.3.5　对转基因产品标识的管理 193

7.3.6　理性认识转基因植物（食品）的安全性 197

本章参考文献 199

附录：缩写词表（Abbreviation） 201