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第一章 生化技术实训要求与基本技能 1

第一节 生化实训应遵守的规则与要求 1

一、生化实训室规则及常识 1

二、生化实训“六个环节”的基本要求 2

第二节 生化实训基本技能 4

一、生化实训中常用玻璃仪器的洗涤 4

二、常用清洗液 5

三、特殊清洗液 6

四、吸量管的种类和使用 7

五、取液器（pipette）的种类和使用 9

六、溶液的混匀 11

七、过滤 13

复习思考题 13

第二章 膜分离技术 15

第一节 膜分离基本技术 15

一、透析 17

二、超滤 18

三、微滤 19

四、电渗析 20

五、反渗透 21

六、纳米过滤技术 23

复习思考题 24

第二节 实训项目 24

实训2-1 蛋白质的透析脱盐和超滤浓缩、脱盐 24

第三章 层析分离技术 33

第一节 层析分离基本技术 33

一、分离原理 33

二、层析技术的分类 33

三、吸附层析 35

四、分配层析 36

五、离子交换层析 37

六、凝胶层析 39

七、亲和层析 41

八、高效液相层析 43

复习思考题 46

第二节 实训项目 46

实训3-1 纸层析法分离鉴定氨基酸 46

实训3-2 糖的薄层层析 51

实训3-3 蛋白质溶液的凝胶过滤脱盐 55

实训3-4 离子交换层析法分离核苷酸 61

第四章 生物化学中的化学检测技术 69

第一节 生物化学中的化学检测基本技术 69

一、重量法 69

二、化学法 71

复习思考题 74

第二节 实训项目 74

实训4-1 总氮量的测定法测定蛋白质的含量——改良微量凯氏定氮法 74

实训4-2 总氮量的测定法测定蛋白质的含量——半自动凯氏定氮仪法 80

实训4-3 抗坏血酸（维生素C）含量测定 85

第五章 电泳技术 89

第一节 电泳基本技术 89

一、电泳的基本原理 89

二、区带电泳 91

三、其他电泳技术 94

复习思考题 96

第二节 实训项目 96

实训5-1 蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳 96

实训5-2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质相对分子质量 103

实训5-3 血清蛋白质的聚丙烯酰胺等电聚焦电泳 110

实训5-4 DNA琼脂糖凝胶电泳 113

实训5-5 血清蛋白质的醋酸纤维薄膜电泳 117

实训5-6 DNA的膜转移电泳 122

实训5-7 蛋白质的膜转移电泳 128

第六章 分光光度检测技术 135

第一节 分光光度检测基本技术 135

一、概述 135

二、分光光度检测技术的应用 137

复习思考题 144

第二节 实训项目 144

实训6-1 福林-酚试剂法测定蛋白质含量 144

实训6-2 紫外吸收法测定蛋白质含量 149

实训6-3 双缩脲法测定蛋白质含量 153

实训6-4 淀粉酶活力的测定 155

第七章 生物大分子提取与离心沉淀技术 160

第一节 生物大分子提取与分离技术 160

一、细胞破碎技术 160

二、生物大分子提取技术 165

三、离心分离技术 168

四、沉淀分离技术 172

复习思考题 177

第二节 实训项目 177

实训7-1 大肠杆菌细胞的超声波细胞破碎 177

实训7-2 大蒜SOD的分离提取与测活 179

实训7-3 DNA的提取 184

实训7-4 RNA的提取 188

附录 192

附录一 实验用水的制备 192

附录二 缓冲溶液的配制方法 196

附录三 常用的离子交换剂 206

附录四 常用的凝胶过滤介质 209

附录五 亲和层析常用基质 211

附录六 透析袋、微孔滤膜和超滤膜 218

附录七 氨基酸及蛋白质的一些物理常数 220

附录八 离心机转速与相对离心力换算列线图 223

附录九 常用化学试剂的规格、保存、配制及取用 224

附录十 实验室常用的干燥剂 227

附录十一 实训室常用的生化设备的使用 231

主要参考文献 242