酶的凝胶电泳检测手册 原著第2版PDF电子书下载

第1章 简介 1

参考文献 3

第2章 酶凝胶电泳检测的基本原理 5

2.1 显色反应 5

2.1.1 能还原四唑盐的产物 5

2.1.2 能与重氮盐偶联的产物 7

2.1.3 引起pH值变化的产物 7

2.1.4 正磷酸 8

2.1.5 焦磷酸 9

2.1.6 过氧化氢 9

2.1.7 碳酸根离子 10

2.1.8 有色产物 10

2.1.9 带有还原型巯基的产物 11

2.1.10 影响淀粉-碘反应的产物 11

2.1.11 聚合酶的产物 12

2.1.12 解聚酶的产物 12

2.2 荧光生成反应 12

2.2.1 NADH和NADPH 12

2.2.2 4-甲基伞形酮 13

2.2.3 形成发光镧系金属螯合物的产物 13

2.2.4 其它 14

2.3 放射自显影 14

2.4 生物自显影 15

2.5 二维凝胶光谱分析 16

2.6 蛋白质印迹 16

2.6.1 固定化基质 16

2.6.2 蛋白质的转移 16

2.6.3 特异性的抗体和标记的抗抗体 17

2.6.4 检测印迹中被转移的蛋白质 18

2.7 其它方法 19

2.7.1 将不溶于水的底物掺入分离凝胶进行检测 19

2.7.2 脂代谢酶的检测 19

2.7.3 通过二维电泳进行检测 19

2.7.4 用特异性探针检测酶蛋白 20

2.7.4.1 以标记的适配体和适配体信标作为特异性探针 20

2.7.4.2 以标记的抑制剂作为特异性探针 20

2.7.5 一些非酶蛋白的特异性检测 20

2.7.5.1 用反向酶谱检测蛋白酶和核酸酶的抑制蛋白 20

2.7.5.2 以生物素标记的蛋白酶为特异性探针检测蛋白酶抑制蛋白 21

2.7.5.3 生物素标记的乙酰透明质酸作为特异性探针检测乙酰透明质酸结合蛋白 21

2.7.5.4 转铁蛋白 21

参考文献 21

第3章 特异性酶的检测方法 24

3.1 酶单页的结构 24

参考文献 25

3.2 一般原则、评价和建议 26

3.2.1 酶电泳和检测的支持介质的选择 26

3.2.1.1 醋酸纤维素凝胶 26

3.2.1.2 聚丙烯酰胺凝胶 26

3.2.1.3 淀粉凝胶 27

3.2.2 凝胶染色的策略 28

3.2.2.1 酶谱方法的选择 28

3.2.2.2 染色液的制备 28

3.2.2.3 染色液的使用方式 29

3.2.2.4 增强酶活性条带染色强度的方式 30

3.2.2.5 酶谱方法的特异性和一些相关问题 32

3.2.3 记录和保存酶谱 34

3.2.4 节省资源的策略 35

3.2.4.1 在同一块凝胶上同时检测几种酶 35

3.2.4.2 在同一块凝胶上连续检测不同的酶 36

3.2.4.3 染色液的重复使用 36

3.2.4.4 在一块凝胶上使用几个原点 36

3.2.4.5 用电印迹法对电泳凝胶进行多次复制 37

3.2.4.6 使用半制备凝胶产生连接酶制备物 37

3.2.5 疑难解答 37

3.2.6 安全规则 38

参考文献 38

3.3 酶单页 40

酶单页中常用的缩写 40

附录 559

附录A-1 Escherichia coli的基本培养基 559

附录A-2 Pediococcus cerevisiae的柠檬酸盐培养基 560

附录B-1 酶的目录（中文） 562

附录B-2 酶的目录（英文） 568

附录C 酶的电泳所用的缓冲系统 574

附录D 非常用化合物中英文名称对照 578