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第一章　实验动物设施的消毒与灭菌操作技术 1

第一节　饲育器具及饲育室内物品的消毒与灭菌 1

一、饲育架 1

二、饲育笼 2

三、垫料 4

四、饲料盒、饮水瓶 5

五、饲料 5

六、饮水 6

七、过滤器 7

八、实验器具 8

九、衣服类 8

十、污物 9

十一、动物尸体 10

十二、运输笼 11

十三、其他（工作车、拖鞋、笔记用品、门把手等） 12

第二节　各种区域的消毒与灭菌 13

一、验收、检疫区域 13

二、普通动物的饲育区域——干式结构 14

三、SPF动物的饲育区域 14

四、无菌动物、悉生动物饲育区域 14

五、感染实验区域 15

第三节　各种动物室的消毒与灭菌 15

一、啮齿类动物室 15

二、兔饲育室 17

三、犬饲育室 18

四、灵长类饲育室 19

第四节　各种区域内的消毒与灭菌 20

一、从外部区域进入动物设施时 20

二、SPF动物饲育区域内的操作 22

第五节　各种病原体的消毒与灭菌 24

一、细菌 24

二、支原体 30

三、真菌 31

四、病毒 34

第六节　微生物抵抗性试验法 40

一、细菌 40

二、真菌 42

三、病毒 42

第七节　消毒药的毒性及安全性 44

一、乙醇 44

二、异丙醇 46

三、福尔马林 47

四、碘伏 48

五、次氯酸钠 49

六、石炭酸 50

七、甲酚皂 51

八、氯化新洁尔灭 52

九、洗必泰 53

主要参考文献 54

第二章　实验动物生产管理操作技术 56

第一节　引进动物的操作程序 56

一、引进动物的隔离检疫 56

二、动物的引进 56

第二节　饲育与喂食的操作程序 58

一、动物一般状况的检查程序 58

二、动物饲料的种类与处理方式 58

三、动物饲育笼使用规格 59

四、每种动物喂食次数及量 60

五、饮水的添加 60

第三节　动物识别与记录的操作程序 61

一、动物个体的识别 61

二、性别判定 61

三、动物生产记录卡的填写 62

第四节　光照、温度、湿度和洁净度控制的操作程序 62

一、光照监控 62

二、动物房温、湿度等环境指标 62

三、动物房温、湿度记录 63

四、动物房内空气洁净度的控制 63

第五节　实验动物保种、生产的操作程序 63

一、实验动物的保种 63

二、实验动物的生产管理 66

三、停止繁殖 71

四、繁殖动物工作记录 71

五、繁育性状的计算 71

第六节　饲料管理操作程序 72

一、饲料采购 72

二、饲料进货与验收 72

三、饲料及垫料的贮存 72

第七节　生产管理中紧急事件处理的操作程序 73

一、节假日值班 73

二、紧急停电处理 73

三、空调故障处理 73

第八节　动物健康监测与饲养环境监测操作程序 74

一、健康监测采样 74

二、血清学病毒监测 74

三、细菌学监测 75

四、寄生虫学监测 75

五、组织采样 76

六、空气落菌数监测 76

七、屏障系统内饮用水水质监测 76

八、饲料微生物监测 76

九、垫料微生物监测 76

十、小鼠免疫球蛋白测定 77

十一、实验鸡的病原微生物监测 77

主要参考文献 79

第三章　实验动物隔离器的操作技术 80

第一节　隔离器操作人员守则 80

一、操作人员须具备的基本条件 80

二、操作人员工作前的准备 80

三、隔离器操作结束后工作 80

第二节　隔离器操作规程 81

一、隔离器的安装 81

二、隔离器的检漏 82

三、隔离器的消毒与灭菌 82

四、隔离器的使用 83

五、隔离器相关设备的使用 88

第三节　实验动物大、小鼠生物净化的操作规程 89

一、器材的准备 89

二、净化手术的准备 89

三、生物净化的操作 90

四、乳母哺育 90

五、无菌试验 90

第四节　隔离器内动物的保种与饲养管理 91

一、近交系的保种方法 91

二、远交群的保种方法 91

三、突变系的保种方法 92

四、核心保种群数据的记录与保存 92

五、隔离器内动物的饲养管理 93

主要参考文献 94

第四章　实验动物胚胎、精子和卵巢冷冻保存的操作技术 96

第一节　小鼠的体外受精与2-细胞胚胎的冷冻保存 96

一、小鼠超数排卵 96

二、小鼠精子的采集与体外授精 98

三、小鼠胚胎玻璃化冷冻保存 100

四、小鼠精子玻璃化冷冻保存 104

五、精子的解冻及体外授精 105

六、2-细胞胚胎输卵管内移植 108

第二节　小鼠卵巢的冷冻、复苏与移植操作程序 111

一、材料的准备 111

二、卵巢的冷冻 111

三、冷冻卵巢的融解 112

四、卵巢的移植 113

第三节　小鼠3日龄胚胎和大鼠5日龄胚胎缓慢冷冻的操作程序 115

一、胚胎的采集 115

二、胚胎的评价与选择 115

三、0.25ml塑料受精麦管（保存胚胎用）的准备 116

四、胚胎移入抗冷冻液 116

五、胚胎移入麦管 117

六、植冰与冷却 117

七、胚胎贮藏 117

第四节　小鼠3日龄、大鼠5日龄胚胎玻璃化冷冻保存的操作程序 117

一、胚胎的评价与选择 117

二、0.25ml塑料麦管准备 117

三、在玻璃化溶液中平均存放胚胎 118

四、玻璃化冷冻 119

五、胚胎贮藏 119

六、冷冻胚胎解冻 119

七、在麦管中稀释胚胎冷冻保护剂液 119

八、从麦管中回收胚胎 119

九、胚胎体外培养 120

十、甘油作为抗冷冻剂冷冻大鼠8-细胞胚胎 120

十一、用甘油溶液缓慢冷冻的大鼠胚胎的复苏和移植 122

十二、大鼠胚胎收集或剖腹取胎的同步发情 123

第五节　实验兔胚胎的冷冻保存操作程序 124

一、超数排卵和胚胎的采集 124

二、精子的采集与人工授精 124

三、兔桑椹胚的冷冻与复苏 127

四、兔精子的冷冻与解冻 128

五、2-细胞胚胎输卵管内移植 129

六、桑椹胚的子宫内移植 129

七、胚胎和胚胎移植针的准备 130

第六节　各种培养基和抗冷冻剂配制的操作程序 130

一、1000ml PB1溶液（基础保存液）的配制 130

二、甘油溶液的配制 131

三、蔗糖溶液的配制 131

四、M16培养基的配制 132

五、M2培养基的配制 133

六、用浓缩液配制M2培养基和M16培养基 134

七、小鼠体外授精培养液的配制 137

八、VS3a玻璃化溶液的配制 137

附录　胚胎、精子冷冻常用配方和记录表 140

主要参考文献 151

第五章　动物实验基础操作技术 153

第一节　总则 153

一、宗旨 153

二、实验动物管理委员会的组成 153

三、实验动物管理委员会的任务 153

四、专业人员 154

五、研究人员 154

六、兽医师 154

七、危险物品使用人员的资格 154

八、实验动物管理人员的卫生与安全措施 154

九、使用高危险性物品的动物实验 155

十、其他注意事项 155

十一、实验动物管理及使用手册之修订 155

第二节　实验动物的抓取和保定操作程序 156

一、实验动物抓取与保定的原则 156

二、小鼠 156

三、大鼠和沙鼠 156

四、豚鼠 157

五、兔 157

六、犬 157

七、蟾蜍 157

第三节　实验动物分组和标记编号操作程序 158

一、分组 158

二、标记编号 158

第四节　实验动物性别判定的操作程序 159

一、小鼠、大鼠和沙鼠性别鉴定 159

二、豚鼠性别判定 160

三、兔子性别判定 160

第五节　实验动物采血的操作程序 160

一、大、小鼠采血 160

二、豚鼠采血 162

三、兔采血 163

四、犬采血 164

第六节　实验动物各种体液采集的操作程序 165

一、淋巴液采集 165

二、消化液采集 165

三、尿液采集 167

四、脑脊液采集 168

五、胸水采集 169

六、腹水采集 169

七、精液采集 169

八、阴道内液体采集 170

九、骨髓采集 170

第七节　实验动物麻醉的操作程序 171

一、常用啮齿类动物的麻醉方法 171

二、小鼠麻醉 172

三、大鼠麻醉 174

四、豚鼠麻醉 176

五、仓鼠麻醉 178

六、沙鼠麻醉 180

七、实验兔麻醉 181

八、实验猫麻醉 184

九、实验犬麻醉 186

十、实验猪麻醉 188

十一、山羊麻醉 190

十二、猴及其他灵长类麻醉 192

十三、雪貂麻醉 194

十四、鸟类与家禽类麻醉 195

十五、爬行类动物麻醉 196

十六、两栖类动物麻醉 197

十七、鱼类动物麻醉 197

十八、其他动物麻醉 198

十九、主要麻醉药的共同麻醉深度判定指标 198

第八节　实验动物术后照顾 199

一、术后恢复期的照顾 199

二、恢复期可能出现的危险 199

三、术后疼痛的处理 199

第九节　实验动物被毛去除方法 200

一、拔毛法 200

二、剪毛法 200

三、剃毛法 200

四、脱毛法 200

第十节　实验动物给药的操作程序 201

一、人与动物及各类动物间药物剂量的换算方法 201

二、实验动物的给药 204

第十一节　药品安全性试验操作程序 206

一、单次给药毒性试验 206

二、反复给药毒性试验 207

三、生殖、发育毒性试验 209

四、致突变试验 211

五、致癌试验 213

主要参考文献 215

第六章　各种实验动物的实验操作技术 216

第一节　大鼠 216

一、抓取和保定 216

二、性别鉴定 216

三、日龄判断 217

四、标记 217

五、被毛去除 218

六、给药 219

七、麻醉 223

八、处死 225

九、体液采集 226

十、尸检及主要脏器采取 231

第二节　小鼠 233

一、抓取和保定 233

二、性别鉴定 233

三、日龄判断 234

四、标记 234

五、被毛去除 235

六、给药 236

七、麻醉 241

八、处死 242

九、体液采集 243

十、尸检及主要脏器采取 248

第三节　豚鼠 250

一、抓取和保定 250

二、性别鉴定 251

三、日龄判断 251

四、标记 251

五、被毛去除 252

六、给药 252

七、麻醉 256

八、处死 257

九、体液采集 258

十、尸检及主要脏器采取 261

第四节　兔 262

一、抓取和保定 262

二、性别鉴定 262

三、年龄判断 263

四、标记 263

五、被毛去除 264

六、给药 265

七、麻醉 268

八、处死 269

九、体液采集 270

十、尸检及主要脏器采取 273

第五节　犬 274

一、抓取和保定 274

二、性别鉴定 275

三、年龄判断 275

四、标记 276

五、被毛去除 276

六、给药 277

七、麻醉 279

八、处死 280

九、体液采集 281

十、尸检及主要脏器采取 282

第六节　猕猴 284

一、抓取和保定 284

二、性别鉴定 285

三、年龄判断 285

四、标记 286

五、被毛去除 286

六、给药 287

七、麻醉 289

八、处死 290

九、体液采集 290

十、尸检及主要脏器采取 292

第七节　猪 294

一、抓取和保定 294

二、性别鉴定 294

三、年龄判断 294

四、标记 295

五、被毛去除 296

六、给药 296

七、麻醉 298

八、处死 300

九、体液采集 300

十、尸检及主要脏器采取 303

第七章　实验动物相关实验室管理操作技术 305

第一节　实验室工作管理规程 305

一、寄生虫实验室 305

二、细菌实验室 306

三、病毒实验室检测 308

四、病理实验室检测 309

五、遗传实验室检测 310

六、环境营养实验室检测 312

七、检测实验室相关仪器的管理规程 313

第二节　质量检测实验室各岗位职责 313

一、质量监督员岗位职责 313

二、检测业务管理员的职责（兼） 314

三、标准收集员的职责（兼） 314

四、仪器管理员的职责（兼） 314

五、各检测实验室复核员的职责 315

六、各专业检测实验室技术人员的职责 315

第三节　各种管理规程和操作细则的管理 316

第四节　实验室管理规程 317

一、采样室（包括细胞培养室） 317

二、动物实验室 318

三、实验室清洁卫生规程 318

四、实验室的消防规程 318

第五节　实验室安全、保密规程 319

一、实验室安全规程 319

二、标准菌株与毒种安全规程 320

三、实验室保密规程 320

四、实验室出入规程 320

第六节　质量检测操作规程 320

一、样品管理规程 320

二、原始记录管理规程 321

三、检验报告审查签发管理规程 322

四、复检及仲裁规程 322

五、检测事故分析报告操作规程 323

第七节　仪器设备的管理规程 323

一、仪器设备的管理程序 323

二、仪器使用保管操作程序 324

三、计量器具管理规程 324

四、计量器具检定的操作程序 324

五、计量器具使用维护保养操作程序 325

第八节　检测实验室其他管理规程 325

一、检测收费财务操作规程 325

二、检测人员培训、考核规程 325

第八章　实验动物相关设备的使用与维护操作技术 327

第一节　屏障设施相关设备的使用与维护 327

一、空调系统 327

二、送、排风机组 329

三、消毒灭菌系统 329

四、发电机 333

五、空调自动化控制系统 334

六、逆渗透（RO）纯水设备 334

七、空气过滤器 335

第二节　屏障设施相关饲育设备的使用与维护 336

一、独立送风隔离笼具（IVC） 336

二、超净工作台 339

三、层流架 340

四、淋浴室 341

第三节　感染动物实验室（P3实验室）运行及操作规范 341

一、P3实验室运行规范 341

二、P3实验室操作规范 342

三、EPC的使用与维护 342

第四节　实验动物废弃物处理的操作规范 343

主要参考文献 344

第九章　实验动物饲料生产的操作技术 345

第一节　饲料生产各工段的操作要点 345

一、饲料生产前的技术检查和准备 345

二、各工段的操作要点 345

第二节　实验动物配合饲料品质保证技术 347

一、饲料产品的安全性 347

二、饲料加工的质量保证技术 350

三、饲料的安全性控制 352

第三节　实验动物饲料质量检验基本要求 353

第四节　350型实验动物饲料机组的操作程序 354

一、开机 354

二、投料员 355

三、粉碎员 355

四、制粒员 356

五、出料员 357

六、配料员 357

七、动物实验料加工 358

八、辐照料加工 358

九、饲料厂设备维护、保养计划 359

十、饲料加工机组的维护保养规范 359

第五节　饲料生产相关物品进出的操作程序 360

一、原料采购质量控制 360

二、加工工艺流程质量控制 362

三、成品料质量控制 362

四、成品的入库 363

五、自用成品料管理 363

第六节　实验动物饲料生产相关管理制度 364

一、饲料厂（车间）环境卫生管理规范 364

二、饲料厂（车间）日常管理制度 364

三、饲料部安全生产管理规范 365

第十章　实验动物突发事件应急处理的操作技术 366

第一节　突发事件分类及应急通知系统 366

一、实验动物设施可能出现的突发事件 366

二、突发事件应急处理通知系统的建立 366

三、突发事件应急处理工作小组的建立 366

第二节　常见突发事件应急处理的操作程序 367

一、动物咬伤 367

二、种群动物感染 367

三、意外断电 367

四、漏电 368

五、瓦斯溢气 368

六、火灾 368

七、断水 369

八、净化空调箱故障 369

九、高压灭菌器故障 369

第三节　化学品泄漏与污染时的应急处理操作程序 370

一、化学品泄漏与污染预防的操作程序 370

二、化学品泄漏与污染应急处理的操作程序 370

第四节　实验动物污染时应急处理的操作程序 371

一、病原体污染时首先应采取的对策 371

二、污染动物的一般处置与生物净化 372

三、污染饲养室的净化 373

第五节　检测实验室突发事件处理的操作程序 374

一、突发停水 374

二、突发停电 374

三、发现样品变质 374

四、样品倾翻 374

第六节　其他突发事件的应急处理操作程序 375

一、人员意外伤害 375

二、自然灾害危机处理 375

三、人为灾害危机 375