现代生物学技术进展PDF电子书下载

第一篇 核酸技术 3

第一章 核酸制备 3

第一节 真核生物基因组DNA的提取与纯化 3

第二节 细菌基因组DNA的提取与纯化 9

第三节 质粒DNA的提取与纯化 13

第四节 酵母基因组DNA的提取 21

第五节 λ噬菌体DNA的提取 21

第六节 石蜡包埋组织DNA的提取 23

第七节 总RNA的提取 26

第八节 mRNA的提取 31

第二章 核酸的检测 34

第一节 核酸浓度和纯度的测定 34

第二节 核酸的浓缩、沉淀、纯化与保存 36

第三节 核酸电泳 41

第四节 RNA的定量和完整性分析 56

第三章 DNA序列测定 58

第一节 同位素标记测序技术 58

第二节 非同位素银染测序技术 66

第四章 聚合酶链反应（PCR） 71

第五章 核酸探针与核酸杂交技术 80

第一节 概论 80

第二节 核酸探针制备 86

第三节 核酸分子杂交常规实验 95

第六章 原位杂交技术 99

第一节 原位杂交组织（或细胞）化学概述 99

第二节 原位杂交组织（或细胞）化学技术 106

第三节 荧光原位杂交技术（FISH） 110

第七章 单链构象多态性分析（SSCP）检测基因突变 113

第一节 基因突变的检测方法 113

第二节 单链构象多态性分析（SSCP） 117

第八章 限制片段长度多态性（RFLP）和随机扩增多态DNA（RAPD）技术 121

第一节 RFLP技术 121

第二节 RAPD技术 123

第九章 基因突变及人工诱变技术 125

第一节 基因突变 125

第二节 DNA的定点诱变 128

第十章 常用基因克隆技术 137

第一节 cDNA的合成 137

第二节 DNA限制性内切酶消化 140

第三节 DNA片段的分离回收 145

第四节 外源DNA片段和质粒载体的连接反应 151

第五节 感受态细菌的制备和转化 153

第六节 青核细胞的基因导入方法 157

第七节 重组体阳性克隆的筛选 167

第十一章 mRNA差别显示技术 171

第十二章 细胞凋亡的分子生物学检测方法 176

第十三章 RNAi的原理和方法 178

第一节 siRNA的设计 178

第二节 siRNA的制备 179

第三节 siRNA的转染方法 181

第四节 转染实验的注意事项 181

第五节 RNAi的应用前景 182

第二篇 蛋白质技术 187

第一章 蛋白质的分离提取方法 187

第一节 溶解法 187

第二节 沉淀法 193

第三节 超速离心法 211

第四节 透析法 214

第五节 超滤法 217

第二章 蛋白质的纯化鉴定技术 224

第一节 电泳法 224

第二节 层析法 267

第三节 蛋白质印迹 307

第四节 蛋白质芯片 320

第五节 质谱法 324

第三章 蛋白质的含量测定 335

第一节 凯氏定氮法 335

第二节 双缩脲测定法 337

第三节 Folin酚法（Lowry法） 339

第四节 考马斯亮蓝法 341

第五节 紫外分光测定法 345

第六节 BCA蛋白质定量检测 349

第四章 蛋白质结构的测定 352

第一节 蛋白质一级结构的测定方法 352

第二节 蛋白质三维结构研究方法 363

第五章 蛋白质活性的测定 368

第一节 DNA酶活性的测定方法 368

第二节 蛋白酶活性的测定方法 371

第三节 抗癌蛋白活性的检测 374

第六章 酵母双杂交技术 378

第一节 酵母双杂交技术的概况 378

第二节 酵母双杂交的基本过程 380

第三篇 生物信息学 387

第一章 绪言 387

第一节 生物信息学概述 387

第二节 生物信息学服务内容 388

第三节 重要的生物信息学网址和生物信息学服务器 388

第二章 生物学数据库介绍 390

第一节 GenBank（数据库） 390

第二节 美国国家生物技术信息中心（NCBI） 399

第三节 数据库的冗余与偏差 408

第四节 向数据库发送序列数据及其他 409

第三章 序列比对 411

第一节 两个序列的比较：BLAST和FASTA 412

第二节 查询序列与一个数据库来比较：BLAST和FASTA 413

第三节 BLAST的详细步骤 415

第四节 BLAST搜索的一些策略 422

第五节 高级比对搜索：用BLAST来发现新基因 423

第六节 多序列比对 424

第四章 基因表达的生物信息学方法 435

第一节 mRNA：基因表达的研究对象 436

第二节 cDNA文库的基因表达分析 436

第三节 基因表达系列分析 440

第四节 微阵列：基因表达的全基因组测量 442

第五章 蛋白质分析和蛋白质组学 445

第一节 蛋白质结构预测 445

第二节 蛋白质定位 459

第三节 蛋白质功能预测 460

第四节 蛋白质组学：对高通量蛋白质数据进行分析的生物信息学工具和方法 462

第六章 基因组测定及分析 469

第一节 DNA测序及序列片断的拼接 469

第二节 基因区域的预测 476

第三节 基因组的比较 487

第四篇 细胞分子免疫学实验技术 495

第一章 免疫电泳技术 495

第一节 免疫电泳技术的基本概况 495

第二节 免疫电泳操作程序 498

第二章 基因工程抗体技术 513

第一节 小分子抗体 513

第二节 人—鼠嵌合抗体 516

第三节 抗体库技术 520

第四节 基因工程抗体的表达，纯化及活性测定 527

第三章 噬菌体展示技术 533

第一节 噬菌体展示技术基本原理 533

第二节 噬菌体展示技术筛选多肽 534

第三节 噬菌体肽库的应用 541

第四章 HLA分型技术 543

第一节 PCR-SSO HLA分型技术 544

第二节 PCR-RPLP HLA分型技术 549

第三节 PCR-SSP HLA分型技术 553

第四节 常用HLA DNA分型技术的特点和选用 557

第五章 T细胞克隆技术和HLA／抗原肽四聚体制备技术 559

第一节 T细胞克隆技术 559

第二节 HLA／抗原肽四聚体制备技术 564

第三节 四聚体的制备及应用 571

第六章 免疫学中的特殊PCR技术 574

第一节 免疫PCR(IM—PCR) 574

第二节 定量PCR 577

第三节 原位PCR(In situ PCR) 581

第四节 PCR技术在免疫学中的应用 584

第七章 免疫亲和层析技术 588

第一节 免疫亲和层析的基本过程 588

第二节 免疫亲和层析的主要影响因素 590

第三节 免疫亲和层析具体实施方案 592

第八章 免疫标记技术 602

第一节 细胞爬片、甩片或切片的制备 602

第二节 免疫荧光标记技术 603

第三节 放射性核素标记技术 614