第一篇 核酸技术 3
第一章 核酸制备 3
第一节 真核生物基因组DNA的提取与纯化 3
第二节 细菌基因组DNA的提取与纯化 9
第三节 质粒DNA的提取与纯化 13
第四节 酵母基因组DNA的提取 21
第五节 λ噬菌体DNA的提取 21
第六节 石蜡包埋组织DNA的提取 23
第七节 总RNA的提取 26
第八节 mRNA的提取 31
第二章 核酸的检测 34
第一节 核酸浓度和纯度的测定 34
第二节 核酸的浓缩、沉淀、纯化与保存 36
第三节 核酸电泳 41
第四节 RNA的定量和完整性分析 56
第三章 DNA序列测定 58
第一节 同位素标记测序技术 58
第二节 非同位素银染测序技术 66
第四章 聚合酶链反应（PCR） 71
第五章 核酸探针与核酸杂交技术 80
第一节 概论 80
第二节 核酸探针制备 86
第三节 核酸分子杂交常规实验 95
第六章 原位杂交技术 99
第一节 原位杂交组织（或细胞）化学概述 99
第二节 原位杂交组织（或细胞）化学技术 106
第三节 荧光原位杂交技术（FISH） 110
第七章 单链构象多态性分析（SSCP）检测基因突变 113
第一节 基因突变的检测方法 113
第二节 单链构象多态性分析（SSCP） 117
第八章 限制片段长度多态性（RFLP）和随机扩增多态DNA（RAPD）技术 121
第一节 RFLP技术 121
第二节 RAPD技术 123
第九章 基因突变及人工诱变技术 125
第一节 基因突变 125
第二节 DNA的定点诱变 128
第十章 常用基因克隆技术 137
第一节 cDNA的合成 137
第二节 DNA限制性内切酶消化 140
第三节 DNA片段的分离回收 145
第四节 外源DNA片段和质粒载体的连接反应 151
第五节 感受态细菌的制备和转化 153
第六节 青核细胞的基因导入方法 157
第七节 重组体阳性克隆的筛选 167
第十一章 mRNA差别显示技术 171
第十二章 细胞凋亡的分子生物学检测方法 176
第十三章 RNAi的原理和方法 178
第一节 siRNA的设计 178
第二节 siRNA的制备 179
第三节 siRNA的转染方法 181
第四节 转染实验的注意事项 181
第五节 RNAi的应用前景 182
第二篇 蛋白质技术 187
第一章 蛋白质的分离提取方法 187
第一节 溶解法 187
第二节 沉淀法 193
第三节 超速离心法 211
第四节 透析法 214
第五节 超滤法 217
第二章 蛋白质的纯化鉴定技术 224
第一节 电泳法 224
第二节 层析法 267
第三节 蛋白质印迹 307
第四节 蛋白质芯片 320
第五节 质谱法 324
第三章 蛋白质的含量测定 335
第一节 凯氏定氮法 335
第二节 双缩脲测定法 337
第三节 Folin酚法（Lowry法） 339
第四节 考马斯亮蓝法 341
第五节 紫外分光测定法 345
第六节 BCA蛋白质定量检测 349
第四章 蛋白质结构的测定 352
第一节 蛋白质一级结构的测定方法 352
第二节 蛋白质三维结构研究方法 363
第五章 蛋白质活性的测定 368
第一节 DNA酶活性的测定方法 368
第二节 蛋白酶活性的测定方法 371
第三节 抗癌蛋白活性的检测 374
第六章 酵母双杂交技术 378
第一节 酵母双杂交技术的概况 378
第二节 酵母双杂交的基本过程 380
第三篇 生物信息学 387
第一章 绪言 387
第一节 生物信息学概述 387
第二节 生物信息学服务内容 388
第三节 重要的生物信息学网址和生物信息学服务器 388
第二章 生物学数据库介绍 390
第一节 GenBank（数据库） 390
第二节 美国国家生物技术信息中心（NCBI） 399
第三节 数据库的冗余与偏差 408
第四节 向数据库发送序列数据及其他 409
第三章 序列比对 411
第一节 两个序列的比较：BLAST和FASTA 412
第二节 查询序列与一个数据库来比较：BLAST和FASTA 413
第三节 BLAST的详细步骤 415
第四节 BLAST搜索的一些策略 422
第五节 高级比对搜索：用BLAST来发现新基因 423
第六节 多序列比对 424
第四章 基因表达的生物信息学方法 435
第一节 mRNA：基因表达的研究对象 436
第二节 cDNA文库的基因表达分析 436
第三节 基因表达系列分析 440
第四节 微阵列：基因表达的全基因组测量 442
第五章 蛋白质分析和蛋白质组学 445
第一节 蛋白质结构预测 445
第二节 蛋白质定位 459
第三节 蛋白质功能预测 460
第四节 蛋白质组学：对高通量蛋白质数据进行分析的生物信息学工具和方法 462
第六章 基因组测定及分析 469
第一节 DNA测序及序列片断的拼接 469
第二节 基因区域的预测 476
第三节 基因组的比较 487
第四篇 细胞分子免疫学实验技术 495
第一章 免疫电泳技术 495
第一节 免疫电泳技术的基本概况 495
第二节 免疫电泳操作程序 498
第二章 基因工程抗体技术 513
第一节 小分子抗体 513
第二节 人—鼠嵌合抗体 516
第三节 抗体库技术 520
第四节 基因工程抗体的表达，纯化及活性测定 527
第三章 噬菌体展示技术 533
第一节 噬菌体展示技术基本原理 533
第二节 噬菌体展示技术筛选多肽 534
第三节 噬菌体肽库的应用 541
第四章 HLA分型技术 543
第一节 PCR-SSO HLA分型技术 544
第二节 PCR-RPLP HLA分型技术 549
第三节 PCR-SSP HLA分型技术 553
第四节 常用HLA DNA分型技术的特点和选用 557
第五章 T细胞克隆技术和HLA／抗原肽四聚体制备技术 559
第一节 T细胞克隆技术 559
第二节 HLA／抗原肽四聚体制备技术 564
第三节 四聚体的制备及应用 571
第六章 免疫学中的特殊PCR技术 574
第一节 免疫PCR(IM—PCR) 574
第二节 定量PCR 577
第三节 原位PCR(In situ PCR) 581
第四节 PCR技术在免疫学中的应用 584
第七章 免疫亲和层析技术 588
第一节 免疫亲和层析的基本过程 588
第二节 免疫亲和层析的主要影响因素 590
第三节 免疫亲和层析具体实施方案 592
第八章 免疫标记技术 602
第一节 细胞爬片、甩片或切片的制备 602
第二节 免疫荧光标记技术 603
第三节 放射性核素标记技术 614