分子生物学实验PDF电子书下载

第一篇 分子生物学实验技术及原理 1

第一章 常用工具与方法 1

第一节 载体 1

第二节 常用工具酶 9

第三节 电泳 14

第二章 核酸操作技术 21

第一节 DNA的定性和定量分析 21

第二节 RNA的定性和定量分析 30

第三节 DNA重组技术 40

第四节 核酸文库构建 44

第三章 蛋白质研究技术 52

第一节 蛋白质分离与纯化 52

第二节 蛋白质定量 56

第三节 蛋白质免疫印迹 61

第四节 流式细胞分析技术 64

第五节 免疫共沉淀 67

第四章 基因功能研究相关技术 71

第一节 基因表达与调节 71

第二节 转基因技术 78

第三节 基因敲除 81

第四节 基因沉默 84

第五章 细胞研究技术 88

第一节 细胞培养 88

第二节 细胞凋亡的检测 91

第二篇 分子生物学实验 95

第六章 DNA操作实验 95

实验一 质粒DNA的微量快速提取 95

实验二 外周血白细胞DNA的微量快速提取（离心柱法） 97

实验三 质粒DNA的酶切与鉴定 98

实验四 聚合酶链反应技术（PCR） 100

实验五 DNA序列测定（双脱氧测序银染法） 101

实验六 DNA印迹杂交技术（Southern印迹法） 106

实验七 DNA重组与鉴定 110

实验八 克隆化DNA的定点突变实验 113

第七章 RNA操作实验 116

实验一 肝总RNA的制备 116

实验二 Northern印迹法 118

实验三 利用RT-PCR对大鼠肝组织SOD基因进行半定量分析 121

实验四 实时荧光定量PCR（2-△△Ct法）检测大鼠不同组织中碱性成纤维细胞生长因子bFGF基因表达水平的差异 123

实验五 cDNA文库构建 128

第八章 蛋白质研究相关实验 134

实验一 血清γ-球蛋白的分离纯化与鉴定 134

实验二 肝组织蛋白质定量 136

实验三 小鼠肝β-actin蛋白免疫印迹检测 140

实验四 免疫组织化学 144

实验五 免疫荧光染色方法 146

实验六 流式细胞仪对血小板活化的测定 148

实验七 免疫共沉淀 151

第九章 基因表达与调节实验 154

实验一 利用荧光素酶报告基因系统检测启动子的转录活性 154

实验二 染色质免疫沉淀技术 156

实验三 DNA甲基化特异性PCR 158

实验四 Red同源重组技术对大肠埃希菌ClpP基因的敲除 162

实验五 siRNA技术沉默基因 163

实验六 microRNA技术沉默基因 165

第十章 转基因实验 168

实验一 绿色荧光蛋白基因真核表达载体的构建及其在酿酒酵母中的表达 168

实验二 原核表达载体构建 173

实验三 哺乳动物细胞的转染 178

实验四 用电穿孔方法将重组质粒转化细菌 179

实验五 克隆化基因在大肠埃希菌的诱导表达 180

实验六 转基因动物的建立 181

第十一章 细胞研究实验 185

实验一 小鼠原代细胞培养 185

实验二 细胞培养实验 186

实验三 细胞凋亡检测 187

第三篇 分子生物学软件应用 190

第十二章 PCR引物设计及相关软件使用 190

第十三章 核酸序列分析与预测 203

第一节 核酸序列分析一般内容 203

第二节 miRNA序列数据库及靶点预测 219

第十四章 蛋白质序列分析与结构预测 225

第一节 蛋白质序列分析 225

第二节 二级结构及三级结构预测 234

第十五章 科研论文中的图片处理 240

第一节 基本概念 240

第二节 图片的获取与保存 241

第三节 图片的修复、编排与标注 242

第四节 图片的制作规范 242

第五节 结语 242

第十六章 EndNote软件的安装及其在医学文献管理和科研写作中的应用 243

第一节 EndNote X7的安装 243

第二节 EndNote X7的简介 245

第三节 EndNote X7的使用 247

参考文献 259

附录 260

附录1 分子生物学实验室常用设备介绍 260

附录2 分子生物学及基因工程常用试剂 276