生物化学技术实验指导PDF电子书下载

第一部分　生物化学技术原理 1

一、实验记录与实验报告的书写 1

二、实验室基本操作 2

（一）玻璃仪器的洗涤与清洁 2

（二）塑料器皿的清洗 3

（三）清洗液的原理与配制 3

（四）量器类的使用法 4

（五）过滤方法 7

（六）试管及离心管中液体的混匀操作 7

三、几种常规仪器的使用 8

（一）分光光度计 8

（二）电子天平 11

（三）干燥箱和恒温箱 13

（四）电热恒温水浴 14

（五）离心机 15

四、生物大分子的制备及鉴定 16

（一）盐析技术 17

（二）透析和超滤 20

（三）减压浓缩和冷冻干燥 20

五、层析技术 21

（一）吸附层析 21

（二）分配层析 22

（三）离子交换层析 23

（四）凝胶过滤层析 26

（五）亲和层析 28

六、电泳技术 29

（一）基本原理 29

（二）影响泳动率的因素 29

（三）电泳技术的种类 31

第二部分　生物化学实验 35

第一节　基本实验 35

实验一　苯酚-硫酸法测定水溶性多糖 35

实验二　氨基酸纸上层析 37

实验三　糖的硅胶G薄层层析 39

实验四 磷脂的分离与鉴定——薄层层析法 41

实验五 甲醛滴定法定量测定氨基酸 44

实验六 蛋白质的两性反应和等电点的测定 45

实验七　蛋白质浓度的测定 49

实验八　微量凯氏定氮法测总蛋白氮 55

实验九　核酸的定量测定 59

实验十　维生素C的定量测定——2,6-二氯酚靛酚滴定法 63

第二节　综合性实验 66

实验一　蔗糖酶的提取及初提纯 66

实验二 蔗糖酶的纯化——Q Sepharose-柱层析法 68

实验三　蔗糖酶活力的测定 71

实验四 蔗糖酶蛋白质含量测定及比活力计算 73

实验五　SDS-PAGE测定蛋白质的相对分子质量 76

实验六 蔗糖酶的固定化及活力测定 81

第三节　选择性实验 84

实验一 底物浓度对酶促反应速度的影响——米氏常数的测定 84

实验二　酶的特异性、温度、pH及激活剂对酶活性的影响 86

实验三 大豆总异黄酮的提取及含量测定 90

实验四　类胡萝卜素的色层分析及鉴定 92

实验五　组织DNA的提取及定量测定 94

实验六　DNA琼脂糖凝胶电泳 98

实验七　纸电泳法定量分析腺苷三磷酸 101

实验八　葡聚糖凝胶层析法测定蛋白质的分子量 103

实验九 酶联免疫吸附实验（ELISA）测定乳汁中孕酮含量 107

实验十　血清蛋白质的层析分离——血清γ-球蛋白的分离纯化（分子筛层析法） 110

实验十一 血清蛋白质的电泳分离——醋酸纤维素薄膜电泳 112

实验十二　脲酶的凝胶过滤分离纯化 114

实验十三　血清蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳 118

实验十四　肝糖原的提取和定量 120

实验十五　蛋白质印迹分析 122

实验十六　单向定量免疫电泳 126

附录 129

一、生物化学实验室规则 129

二、实验室安全及防护知识 129

三、常用数据表 131

参考文献 137