生物化学与分子生物学实验教程PDF电子书下载

第一章 实验室规章制度和实验记录、实验报告 1

一、实验室规章制度 1

二、实验室安全及防护 2

三、实验记录和实验报告 3

（一）实验记录 3

（二）实验报告 3

四、生物化学与分子生物学实验的绘图要求、方法及实验数据处理分析方法 4

（一）实验报告中的图表 4

（二）实验数据的处理与分析 6

第二章 实验室常用仪器设备、常用试剂及常用实验技术 9

一、实验室常用玻璃仪器的介绍 9

（一）常用玻璃仪器 9

（二）常用玻璃仪器的洗涤 10

二、常用试剂的配制、缓冲溶液与缓冲体系的介绍 11

（一）常用试剂配制要点 11

（二）实验试剂的使用 12

（三）溶液浓度 12

（四）缓冲溶液 12

三、离心技术 14

（一）离心中常用概念 14

（二）离心方法 16

（三）离心机的构造 16

（四）离心机的分类 17

（五）离心机使用注意事项 17

四、分光光度技术 17

（一）原理 17

（二）分光光度计的基本结构 18

（三）分光光度计的应用 18

（四）分光光度计的常用类型 18

（五）分光光度计的使用 19

五、层析技术 20

（一）层析原理 20

（二）层析分类 22

（三）主要的层析技术 24

六、电泳技术 32

（一）电泳的基本原理 32

（二）影响电泳的因素 32

（三）电泳的分类 33

（四）常用的电泳技术 34

七、PCR技术 37

（一）PCR技术的基本原理 37

（二）PCR技术操作要素 38

（三）PCR技术所需仪器设备 41

（四）各种PCR技术的变体 42

八、细胞培养技术 42

（一）设施器材及培养基 43

（二）细胞培养常规操作 44

（三）细胞培养具体流程 44

（四）注意事项 46

（五）细胞培养方式 47

（六）细胞培养存在的不足 47

九、其他常规仪器设备的使用 47

（一）移液器 47

（二）酶标仪 49

（三）水浴锅 51

第三章 实验项目 53

第一节 基础性实验项目 53

一、蛋白质定量分析实验 53

实验一 考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量 53

实验二 BCA法测定蛋白质含量 54

实验三 Folin-酚试剂法（Lowry法）测定蛋白质含量 56

实验四 紫外分光光度法测定蛋白质含量 58

二、层析分离纯化实验 59

实验五 血清γ-球蛋白的分离纯化与鉴定 59

实验六 血清脂质的薄层层析 62

三、电泳实验 64

实验七 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳及定量分析 64

实验八 心、肝、肾组织乳酸脱氢酶同工酶的电泳分离 66

实验九 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白 69

实验十 SDS-PAGE测定蛋白质相对分子质量 75

四、酶学实验 78

实验十一 碱性磷酸酶的分离、纯化与比活性测定 78

实验十二 酶促反应动力学实验 83

实验十三 MMP-2和MMP-9表达的明胶酶谱分析 90

五、物质代谢实验 92

实验十四 胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响 92

实验十五 肝糖原的提取与鉴定 97

六、分子生物学实验 99

实验十六 组织细胞基因组DNA的提取 99

实验十七 质粒DNA的提取、定量、电泳与酶切鉴定 101

实验十八 核酸含量的测定 105

实验十九 PCR扩增目的基因 109

实验二十 DNA琼脂糖凝胶电泳及限制性内切核酸酶酶谱分析 112

第二节 融合性实验项目 114

一、免疫生化技术 114

实验二十一 凝集反应 114

实验二十二 沉淀反应 119

实验二十三 免疫扩散和免疫电泳 125

实验二十四 酶联免疫吸附实验 131

实验二十五 免疫胶体金实验 135

二、分子生物学、细胞生物学、生物化学整合实验 139

实验二十六 培养细胞或组织总RNA的提取及RT-PCR扩增目的基因 139

实验二十七 培养细胞绿色荧光蛋白基因转染及荧光显微镜检测表达效率 146

实验二十八 蛋白质印迹（Western blot）实验 150

第三节 创新性实验项目 159

实验二十九 基因克隆与重组表达质粒的构建 159

实验三十 基因重组表达质粒在原核细胞中的表达、纯化与鉴定 164

实验三十一 基因重组表达质粒在真核细胞中的表达与检测 168

实验三十二 免疫酶组织（细胞）化学技术 172

实验三十三 免疫荧光细胞化学技术 175

参考文献 178