酶标记免疫技术的原理方法和应用 上PDF电子书下载

目录 1

第一章 绪言 1

第二章 酶的基本知识 8

一、酶的发现 8

二、酶的作用特点 9

三、酶的作用原理及动力学 11

（一）酶的作用原理 11

（二）酶的活性部位（活化中心） 12

（三）影响酶促反应的因素 13

第三章 酶免疫微量分析技术原理 23

一、均一性酶免疫测定法（HEI） 23

（一）HEI的基本原理 24

（二）常用的几种HEI方法 25

二、非均一性酶免疫测定法 34

（一）竞争性ELISA 35

（二）非竞争性ELISA 40

（三）葡萄球菌A蛋白ELISA（PPA-ELISA） 45

（四）酶标记抗原抗体定位技术 53

第四章 免疫血清及纯化抗体、抗原的制备 57

一、免疫血清的制备 57

（一）免疫动物所用的抗原 57

（二）佐剂 58

（三）免疫动物的选择 59

（四）免疫方法 60

（一）盐析法（盐） 63

二、抗体的纯化 63

（二）凝胶过滤（分子筛层析） 66

（三）离子交换层析 76

（四）亲和层析 84

（五）抗体纯化实例—IgG型抗体的纯化 88

三、可溶性抗原的制备和纯化 88

（一）可溶性抗原的制备 88

（二）可溶性抗原的纯化 89

四、葡萄球菌A蛋白的提取和纯化 90

（一）粗提SPA的制备 91

（二）SPA的纯化 95

五、纯化抗体或抗原蛋白质含量的测定 96

（一）紫外光吸收法 96

（二）Folin—酚试剂反应法 98

第五章 酶标记物的制备 100

一、酚标试验中常用的酶 100

（一）均一性酶标试验常用的酶 100

（二）非均一性酶标试验常用的酶 101

二、酶标记物的制备 104

（一）戊二醛交联法 104

（二）过碘酸钠（NaIO4）氧化法 108

（三）二马来酰亚胺键法 110

（四）酶标记半抗原的制备 111

三、酶结合物质量检查指标 112

（一）标记效果及酶结合物活性测定 112

（四）酶结合物质量评定 113

（三）定量指标 113

（二）酶结合物产率测定 113

第六章 酶联免疫吸附试验（ELISA） 115

一、材料、溶液和仪器 115

（一）固相载体 115

（二）溶液配制 119

（三）国产酶标测定仪 121

二、ELISA技术 122

（一）包被 122

（二）洗涤 125

（三）加待检标本 126

（四）洗涤 127

（五）加酶标记物 127

（六）洗涤 128

（七）加底物 128

（八）终止反应 128

（九）结果判断 129

（十）特异性考核 130