分子免疫学实验指南PDF电子书下载

第一章 蛋白质分析与纯化 2

第一节 蛋白质浓度测定 2

一、Bradford法 2

二、Lowry法测蛋白质含量 3

三、紫外吸收法测蛋白质含量 4

第二节 蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳 5

第三节 Western印迹 7

第四节 蛋白质纯化 9

第五节 离子交换层析 11

第六节 亲和层析 13

一、谷胱甘肽亲和层析 14

二、金属螯合亲和层析 15

三、ProteinA、ProteinG亲和层析 17

第七节 疏水作用层析 17

参考文献 19

第二章 抗体制备技术 20

第一节 多克隆抗体的制备 20

双向免疫扩散法测定抗血清效价 21

第二节 单克隆抗体的制备 23

一、动物免疫 23

二、细胞融合技术 24

三、杂交瘤细胞克隆化 26

四、单抗亚类测定 26

五、单克隆抗体的大量制备 28

参考文献 28

第三章 抗体纯化和标记技术 29

第一节 抗体的纯化 29

一、IgG的纯化 29

二、IgM的纯化 33

第二节 抗体片段的制备 34

一、IgG片段的纯化 34

二、IgM片段的纯化 37

第三节 放射性同位素标记抗体技术 38

一、氯胺T法 38

二、Iodogen法 39

第四节 荧光素标记抗体技术 40

第五节 酶标记抗体技术 41

第六节 生物素标记抗体技术 42

第七节 铕标记抗体技术 43

第八节 胶体金标记抗体技术 45

参考文献 46

第四章 免疫检测技术 47

第一节 免疫荧光技术 47

间接细胞免疫荧光技术 47

第二节 酶免疫技术 49

一、双抗体夹心法检测抗原 49

二、间接法测定抗体 51

三、竞争法 52

第三节 放射免疫技术 53

一、放射免疫分析 54

二、免疫放射分析 55

第四节 化学发光免疫分析技术 56

化学发光酶联免疫分析 56

参考文献 58

第五章 免疫细胞分离技术 59

第一节 密度梯度分离技术 59

第二节 黏附分离技术 61

第三节 磁珠分离技术 62

第四节 流式细胞仪分离技术 64

参考文献 65

第六章 细胞功能检测 66

第一节 细胞增殖试验 66

第二节 吞噬试验 67

第三节 细胞黏附试验 68

第四节 抗体依赖的细胞毒试验 70

第五节 补体介导的细胞毒试验 71

第六节 凋亡检测 72

一、细胞凋亡的形态学检测 72

二、磷脂酰丝氨酸外翻分析 73

三、线粒体膜势能的检测 73

四、DNA片段化检测 73

五、Caspases活性的检测 73

第七章 免疫组织化学和免疫电镜 75

第一节 免疫组织化学 75

第二节 免疫电镜 77

参考文献 79

第八章 细胞因子及其活性的检测 80

第一节 ELISA法定量检测细胞因子 80

第二节 ELISPOT法检测细胞因子分泌细胞 82

第三节 流式细胞仪检测细胞内细胞因子 84

第四节 细胞因子依赖细胞株检测细胞因子活性 86

MTT比色分析法 86

参考文献 87

第九章 生物信息学简介 90

第十章 核酸与蛋白质数据库 93

第一节 核酸数据库 93

一、子数据库及其命名 94

二、核酸序列数据库格式 94

三、核酸数据库的检索 96

第二节 蛋白质序列数据库 97

一、蛋白质序列数据库简介 97

二、蛋白质序列数据库的检索 99

第三节 蛋白质结构数据库 105

一、PDB数据库检索 106

二、PDB数据库格式 107

第十一章 序列比对分析 110

第一节 两序列比对分析 110

一、两序列对比分析 110

二、序列两两比对的数据库相似性检索分析 112

第二节 多序列比对分析 115

第十二章 核酸与蛋白质结构预测 119

第一节 核酸结构预测 119

一、核酸序列的一级结构及翻译 119

二、密码子偏好性分析 122

三、RNA二级结构预测 125

第二节 蛋白质序列分析 127

一、蛋白质一级序列分析 127

二、蛋白质序列的反向翻译 134

第三节 蛋白质二级结构及其预测 135

一、蛋白质二级结构 135

二、蛋白质二级结构预测 136

第四节 蛋白质空间结构预测及常用在线预测方法 139

一、蛋白质空间结构预测 139

二、常用在线预测方法 140

三、常用在线预测方法实例 140

第十三章 蛋白质相互作用理论模拟 149

第十四章 抗原表位预测 154

第十五章 免疫信息学 165

一、IMGT数据库 165

二、KABAT数据库 165

三、dbMHC 165

四、AntiJen 165

五、SYFPEITHI 166

六、HDB 166

七、MHCBN 166

八、BCIPEP 167

第十六章 免疫学相关重要Web网站的简介 169

参考文献 177

第十七章 基本分子生物学技术 180

第一节 质粒DNA的分离、纯化和鉴定 180

第二节DNA酶切及凝胶电泳 186

第三节 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 189

第四节 RNA的提取和cDNA合成 191

第五节 重组质粒的连接、转化及筛选 195

第六节 基因组DNA的提取 198

一、细菌基因组DNA的制备 198

二、基因组DNA的检测 199

参考文献 199

第十八章 PCR技术 200

第一节 PCR克隆基因 200

第二节 PCR法进行基因突变 203

第三节 PCR法全合成新基因 205

参考文献 208

第十九章 分子文库的构建及筛选 209

第一节 cDNA文库的构建及筛选 209

第二节 噬菌体展示文库的构建及筛选 214

参考文献 217

第二十章 分子杂交技术 218

第一节 核酸探针以及制备方法 218

一、双链DNA探针及其标记方法 218

二、单链DNA探针 220

三、末端标记DNA探针 221

四、寡核苷酸探针 222

五、RNA探针 223

六、几种常见的非同位素标记探针的方法 223

第二节 几种常见的杂交 227

一、Southern杂交 227

二、Northern杂交 229

三、菌落原位杂交 230

四、斑点杂交 231

第三节 杂交反应的条件及参数的优化 232

参考文献 233

第二十一章 RNAi技术 234

参考文献 239

第二十二章 信号转导蛋白的活化水平分析 242

第一节 免疫细胞化学 242

第二节 激酶活性测定 244

第三节 凝胶阻滞电泳 247

参考文献 249

第二十三章 第二信使含量测定 250

第一节 Ca2+测定 250

第二节 IP3的测定 251

第三节 cAMP的测定 253

参考文献 254

第二十四章 亚细胞定位分析 255

第一节 细胞分步分离法 255

第二节 免疫荧光结合激光共聚焦显微镜分析 256

参考文献 258

第二十五章 蛋白-蛋白相互作用分析 259

第一节 免疫共沉淀检测蛋白-蛋白相互作用 259

第二节 GST pull down 261

第三节 采用GFP和荧光共振能量转移技术测定蛋白质相互作用 262

第四节 酵母双杂交 264

参考文献 274

第二十六章 蛋白-DNA相互作用分析 275

第一节 CHIP Assay 275

第二节 报道分子测定 278

参考文献 280

第二十七章 磷酸化多肽双向作图和磷酸氨基酸分析 281

第一节 磷酸化多肽双向作图 281

第二节 磷酸氨基酸分析 284

参考文献 287

第二十八章 蛋白质组学的双向电泳与生物质谱 288

第一节 双向电泳技术 288

第二节 生物质谱技术 292

考马斯亮蓝染色的胶内酶切 292

参考文献 294